세균학 연구는 다양한 테스트를 수행하는 가장 인기 있는 방법 중 하나입니다. 생물학적 체액. 혈액 배양이 의미된다면, 우리는 세균 감염을 확인하는 데 도움이 되는 검사에 대해 이야기하고 있습니다. 인간의 몸. 일상적인 혈액 검사로 균혈증의 존재를 확인할 수 없는 경우 배양 탱크가 필요합니다. 파종 탱크에는 물질을 채취하고 박테리아가 매우 빠르게 증식할 수 있는 성분이 포함된 영양 배지에 추가로 넣는 작업이 포함됩니다.
세균학적 혈액 검사 결과는 다음과 같습니다. 사전 재배영양 배지에서 배양합니다. 따라서 의사들은 그러한 검사를 문화 연구라고 부릅니다. 며칠 후 박테리아가 활발하게 성장하기 시작하면 생성된 검체가 다음 기관으로 보내집니다. 현미경 검사. 배양이 충분히 성장하면 세균뇨를 판단하는 것이 더 이상 어렵지 않습니다. 그러나 이것이 분석의 전부는 아닙니다. 이 경우 예비 평가만 제공됩니다. 박테리아를 보다 정확하게 식별하기 위해 다음 단계가 수행됩니다. 이것은 액체 배양 시료를 페트리 접시의 고밀도 배지에 접종하는 탱크입니다. 이 테스트는 성장하는 박테리아 군집을 식별하는 데 도움이 됩니다. 이제 샘플을 사용하여 화학적 테스트를 수행할 수 있으므로 최종 미생물 유형을 보다 정확하게 결정할 수 있습니다.
이 모든 단계는 다양한 유형의 항생제에 대한 민감도에 대해 박테리아 종을 테스트하기 위한 준비 단계입니다. 이는 감염과 싸우기 위해 가장 적합한 약물을 찾는 데 필요합니다.
함으로써 세균학적 분석혈액이 감지될 수 있습니다:
- 포도상 구균;
- 연쇄구균;
- 장내 세균;
- 효모균.
다음에 대한 혈액 검사 박테리아 감염 V 필수적인면역력이 저하된 환자에게 실시합니다. 예를 들어, 결핵균은 HIV 감염자에게서 흔히 발견됩니다. 이러한 검사는 잘못된 결과를 제거하는 데 도움이 됩니다.
전염병의 경우 박테리아와 미생물은 혈류에 침투하여 발생원 근처에 있는 다른 신체 시스템에 들어갈 수 있는 기회를 갖습니다. 혈액배양검사에서 양성 결과가 나오면 이미 감염이 진행된 것입니다. 이는 체온 상승, 백혈구 증가, 심장 기능 장애를 동반할 수 있습니다.
분석의 특징
다른 테스트와 마찬가지로 세균학 연구 방법에는 장단점이 있습니다. 장점 중 하나는 방법의 높은 특이성입니다. 이는 교차 거짓 반응을 방지합니다. 모든 생물학적 유체는 연구에 적합합니다. 도말배양, 소변검사, 혈액검사 등을 시행할 수 있습니다. 치료 목적특정 치료제에 대한 확인된 미생물의 민감성을 결정하는 것입니다. 이를 통해 불필요한 처리에 시간을 낭비하지 않고 미생물을 신속하게 파괴할 수 있습니다.
물론 몇 가지 단점도 있습니다. 그중에서도 세균 파종을 완료하는 데 시간이 걸린다는 점을 알 수 있습니다. 일반적으로 연구 대상 물질은 최소 일주일 동안 실험실에 보관됩니다. 물질 수집에는 심각한 요구 사항이 있습니다. 세균 연구용 물질 수집에 대한 모든 규칙을 따르는 것이 중요합니다. 또한 실험실 직원은 특별한 자격을 갖추어야 합니다.
일반적으로 세균학 연구의 결과는 비인두 점액부터 뇌척수액까지 인간의 체액 샘플에서 얻습니다. 다른 액체와 마찬가지로 혈액 배양에는 분석을 위한 특별한 준비가 필요하지 않습니다. 2~3일 동안은 기름진 음식과 튀긴 음식을 금하고 술도 마시지 않는 것이 좋습니다. 헌혈하는 경우에는 최소 12시간 전에 마지막 식사를 마쳐야 합니다. 이 배달 기능은 공복시에만 엄격하게 호출됩니다. 검사 몇 시간 전부터 흡연은 금지됩니다.
불임과 관련하여 배양용 혈액은 특정 기간에 여러 번 채취됩니다. 감염이 항상 가능한 것은 아니기 때문입니다. 영양배지한 번에 하나의 샘플을 채취하므로 단일 샘플링은 효과적인 것으로 간주되지 않습니다. 일련의 연구가 적어도 두 번 수행된 후에만 특정 미생물이 특정 감염의 유발자라고 말할 수 있습니다. 반복적인 테스트 결과, 의심되는 세균을 식별해야 합니다. 혈액뿐만 아니라 기타 체액에 대한 동시 검사도 가능합니다.
혈액은 최대한 수집해야합니다 높은 온도. 동시에 예비 항생제 치료결과가 흐려질 수 있습니다. 안에 최후의 수단으로, 마지막 항생제 투여 후 최소 24시간이 경과해야 합니다. 혈액 샘플링은 아침에 수행됩니다.
수집 후 박테리아 성장에 유리한 영양 배지에 파종합니다. 이러한 샘플은 며칠 동안 37-38도 온도에서 보관됩니다.
현재 두 가지 유형의 파종이 수행됩니다. 그것은 관하여주요 항생제 스펙트럼에 대한 민감도를 결정하기 위해 배양하고, 항생제에 대한 민감성을 결정하기 위해 배양합니다. 넓은 범위약. 첫 번째 결과를 얻기까지는 일반적으로 최소 3일이 소요됩니다. 때로는 연구가 최대 2주까지 지속되기도 합니다.
바이러스 감염
바이러스가 체내에 들어오면 이를 통해 바이러스 유무를 진단할 수 있다. 일반 분석피. 일반적으로 환자 자신도 검사 결과를 손에 받아 아무런 문제없이 감염 여부를 확인할 수 있습니다. 그러나 이것이 전문가와의 상담을 배제해야 한다는 의미는 아닙니다.
감염이 바이러스에 의한 것인지 박테리아에 의한 것인지 확인하려면 얻은 데이터를 주의 깊게 읽어야 합니다. 사실 감염 원인이 바이러스인지 박테리아인지에 따라 구조적 혈액 구성이 다르게 변합니다.
이유라면 기분이 좋지 않다바이러스가 된 경우 백혈구 수치는 정상이거나 약간 낮아질 수 있으며, 가장 드문 경우에는 약간의 증가가 있습니다. 림프구는 단핵구와 마찬가지로 정상보다 높게 나타납니다. 바이러스는 호중구에 우울한 영향을 미치므로 그 수가 감소합니다. ESR은 일반적으로 정상으로 유지되거나 아주 약간 증가합니다.
설명된 모든 내용이 분석 내용과 일치하더라도 발생한 증상을 고려하는 것이 중요합니다. 을 위한 바이러스 감염작은 것이 특징 잠복 기간. 보통 5일을 넘지 않습니다. 동시에, 때로는 바이러스 발생의 배경에 대해 박테리아의 발현이 발생하고 전문가 만이 병인을 결정하는 데 문제가 있기 때문에 독립적 인 진단을 배제해야합니다.
다양한 샘플
세균검사를 위해 소변을 채취할 때, 평균 분량인 아침 소변을 채취하는 것으로 가정한다. 외부 생식기의 화장실이 먼저 수행됩니다. 수집은 10-15ml를 담는 멸균 용기에서 수행됩니다. 테스트는 2시간 이내에 실험실로 전달되어야 합니다.
목과 코의 면봉을 검사 해야하는 경우 아침에는 양치질을 금지하고 입과 코를 헹구는 것이 금지되어 있습니다. 소독액. 음식과 물 섭취는 금지되어 있습니다. 대변의 세균 배양을 수행해야 하는 경우 멸균 주걱을 사용하여 아침 대변에서 대변을 멸균 용기에 수집합니다. 분석량은 15-30g이어야 합니다. 소변이 샘플에 들어가지 않는 것이 중요합니다.
테스트는 5시간 이내에 완료되어야 합니다. 테스트를 밤새 보관하거나 냉동하는 것은 금지되어 있습니다. 관장제와 완하제를 사용하여 대변을 수집하는 것도 배제되어야 합니다.
가래를 검사해야 하는 경우 기침이 발생하는 동안 아침에 공복에 점액과 함께 멸균 용기에 수집합니다. 수집 전 양치질은 허용되지만, 린스만 사용해야 합니다. 끓인 물. 분석 결과는 1시간 이내에 실험실로 전달됩니다.
수집 모유예선 후에 실시 위생 절차. 유두 주변 부위는 70% 정도 적신 면봉으로 닦아야 합니다. 에틸 알코올. 첫 15ml는 기부용으로 사용할 수 없습니다. 평균 부분에서 5ml를 따라냅니다. 분석 전달은 2시간 이내에 완료되어야 합니다.
생식기 분비물 분석이 수행되면 여성의 경우 월경 중 검사가 금지되며 그 후 최소 일주일이 지나야 합니다. 이전에 항생제 치료를 받은 경우 완료 후 한 달이 지나야 합니다. 외부 생식기의 화장실이 먼저 수행됩니다. 2시간 동안 소변을 보지 않는 것이 좋습니다. 남성은 화장실에 가지 않는 시간을 5시간까지 연장하는 것이 좋습니다.
세균 배양– 환자로부터 채취한 생물학적 물질(혈액, 소변, 대변 등)을 병원체의 성장과 번식을 촉진하는 인공 영양 배지에 배치하여 연구하는 방법입니다. 이 연구를 통해 병원체의 존재뿐만 아니라 그 농도도 밝힐 수 있습니다. 이런 방법으로 이미 나열된 것 외에도 뇌척수액(CSF), 가래, 담즙, 목구멍의 분비물, 코, 눈, 호흡기, 생식기, 상처. 즉, 미생물은 신체의 거의 모든 부분에서 접종될 수 있습니다. 이러한 기술은 박테리아와 곰팡이를 찾고 식별하는 데 편리합니다. 이러한 방식으로 바이러스를 탐지하는 것은 바이러스 생물학의 특성으로 인해 훨씬 더 어렵습니다.
세균 배양을 통해 특정 질병을 유발하는 미생물의 유형을 결정할 수 있을 뿐만 아니라 효과적인 항생제(미생물에 대한 민감도 결정) 회복에 도움이 될 것입니다. 항생제 치료를 시작하기 전에 물질의 샘플링만 수행하면 됩니다. 세균 배양은 진료소(예: 잘 알려진 이상 세균증에 대한 대변 검사)와 병원(예: 장 감염 및 뇌척수액과 같이 생물학적 물질에 접근하기 어려운 경우)에서 처방될 수 있습니다. 환자에게서 물질을 채취한 후 특수 영양배지에 올려 놓고 3~10일 후에 결과를 평가합니다. 그의 미생물학 실험실의 전문가들은 형태적, 문화적, 생화학적 특성을 결정하여 미생물을 인식(식별)할 수 있습니다. “해충”의 형태(구조)는 현미경으로 연구되며, 문화재는 영양 배지에서 미생물의 성장 요구, 조건 및 유형을 특징으로 합니다. 생화학적 특성생명 과정에서 미생물이 합성하는 일련의 효소에 의해 결정됩니다. 또한 미생물 군집과 영양 배지를 착색하는 색소(예: 황금색 색소는 황색포도상구균을 형성함)에 주의를 기울이십시오.
분석 유형
세균 혈액 검사
표시: 혈액 중독 의심; 오랫동안 온도 상승, 원인을 확인할 수 없습니다. 특정 전염병(예: 장 감염, 유행성 수막염, 포도구균 및 연쇄구균 감염). 최대 체온 상승 시(이 기간 동안 혈액 내 미생물 농도가 특히 높을 때), 항생제 복용 전(아직 진단이 확립되지 않은 경우) 또는 항생제 복용 10~14일 후(~10~14일)에 혈액을 채취합니다. 치료 결과를 모니터링하십시오). 환자의 침대 옆이나 탈의실에서 혈액을 채취하여 즉시 영양배지에 접종합니다. 일회성 혈액검사는 조건부로 검출되면 효과가 없습니다. 병원체, 인간의 피부에 사는 경우, 그리고 언제 특정 조건(감소하면서 방어력질병을 일으킬 수 있는 유기체)에 대한 반복적인 연구 없이는 결과의 진실을 이해하기 어렵습니다. 따라서 일정 기간 동안 일련의 3개 이상의 연구를 수행할 수 있습니다. 에서 그것을 주장하려면 이 경우원인 물질은 모든 미생물이면 미생물을 신속하게(48시간 이내) 검출할 수 있고, 혈액에서 반복적으로 분리하거나 다른 종류의 시험물질(혈액과 소변, 혈액과 가래 등)에서 동시에 분리할 수 있으며, 또한 다양한 영양배지에서 동시에 검출.
분비물, 상기도에서 면봉 채취
표시: 염증성 질환가래가 없는 상기도 및 폐렴, 진단 전염병호흡기관(디프테리아, 백일해, 성홍열), 수막구균의 세균 보균 진단, 디프테리아 및 포도구균 감염. 마른 멸균 면봉을 사용하여 비강에서 물질을 수집하고, 촉촉한 멸균 면봉을 사용하여 인두에서 물질을 수집합니다. 코와 목의 면봉은 다른 면봉으로 채취됩니다. 인두와 편도선의 물질은 위생적인 절차를 수행하기 전 공복에 섭취하거나 식사 후 3~4시간 이내에 섭취합니다. 인두 뒤쪽과 편도선을 채취할 때 면봉이 혀나 볼점막, 치아에 닿아서는 안 되므로 부모가 여건을 만들어 주어야 한다. 간호사아기와 함께 작업하는 것이 편리했습니다. 절차가 매우 짧을 것이라고 미리 알려주는 것이 좋지만 아기의 입에 사는 미생물을 잡을 수는 있지만 이를 위해서는 입을 벌리고 움직이지 않아야 합니다. 몇 초(몇 초).
소변의 세균학적 검사
표시: 신장 및 방광의 염증성 질환 및 치료 후 조절, 감염성 질환(장티푸스, 렙토스피라증) 진단. 항생제 치료를 시작하기 전에 소변 세균총 검사를 실시합니다. 자유롭게 배출되는 소변의 평균 분량(3~5ml)을 멸균 용기에 수집합니다. 소변의 중간 부분은 외부 생식기에 있을 수 있는 미생물로 가장 덜 오염되어 있습니다. 이 연구는 신장 상태에 대한 보다 객관적인 그림을 제공합니다. 요로. 사용하기 가장 좋습니다 아침 소변포함하는 가장 큰 수박테리아. 재료를 복용하기 전에 외부 생식기의 철저한 화장실이 필요합니다. 남아는 포경수술을 하지 않은 경우 음경 머리를 노출시키고 소량의 소변을 배출해야 합니다. 그런 다음 소변의 일부를 멸균 용기에 넣고(마지막 부분은 수집하지 않음), 용기를 닫고 실험실로 옮깁니다. 여아의 경우 따뜻한 물로 성기를 씻으십시오. 비눗물, 앞에서 뒤로 방향으로; 생식기를 다시 헹구십시오 따뜻한 물그리고 멸균 천으로 닦아주세요. 멸균 용기에 중간 소변 샘플을 수집합니다(이것은 실험실에서 수집해야 합니다). 소변은 연구 전 실온에서 1~2시간 이상 보관할 수 없으며, 냉장고에는 하루 이상 보관할 수 없습니다. 이는 세균 증식 및 연구 결과 왜곡의 위험이 있기 때문입니다.
상처 분비물
표시: 상처의 화농성 염증 과정의 징후. 재료는 의사가 가져옵니다. 상처 주변의 피부를 소독제로 처리하고 멸균 냅킨을 사용하여 고름을 제거합니다. 멸균된 면봉을 사용하여 물질을 채취합니다. 상처에 배액 장치(상처의 내용물이 흐르는 관)가 있는 경우, 그 배액액을 주사기로 1~2ml 흡입하여 멸균 튜브에 넣습니다.
대변의 세균학적 검사
표시: 장내 감염 진단, 급성 환자 퇴원 시 관리 장 감염(이질, 살모넬라증 등) 병원에서 진단, 진단 만성 기능 장애장, 장내세균 불균형 진단, 박테리아 운반체 식별. 테스트할 물질은 자연 배변 또는 특수 탐폰(루프)을 사용하여 얻은 대변일 수 있습니다. 자연 배변을 통해 물질을 수집하려면 철저히 세척하고 흔적이 없도록 사용하십시오. 소독제그릇이나 냄비. 소독제 흔적으로부터 물질을 보호하기 위해 깨끗한 종이 한 장을 용기 바닥에 놓을 수 있습니다. 대변 검체는 배변 직후 멸균 유리막대, 철사 고리, 나무 주걱, 또는 실험실에서 구할 수 있는 멸균 용기 뚜껑에 장착된 특수 스푼을 사용하여 채취합니다. 점액, 고름 또는 기타 이물질이 있는 경우 이러한 불순물이 포함되어 있지만 혈액이 없는 부위를 선택해야 합니다. 직장 탐폰(루프)을 사용하여 직장에서 물질을 채취하는 작업은 간호사가 수행합니다. 아이는 옆으로 누워 엉덩이를 배쪽으로 당기고 엉덩이를 손바닥으로 벌리도록 요청받습니다. 루프(탐폰)가 삽입됩니다. 항문 5-6cm 깊이로 재료를 빈 멸균 용기 또는 방부제가 들어 있는 시험관에 수집합니다. 방부제를 사용하지 않는 경우 세균 검사 시작 전 시간은 어떠한 경우에도 2시간을 초과해서는 안 됩니다. 대변에서 병원성 미생물이 검출되더라도 항상 질병의 존재를 나타내는 것은 아니지만 박테리아 보균으로 인한 것일 수 있습니다. 따라서 결과 평가는 질병의 증상을 고려하여 수행되어야합니다. 결과를 정확하게 평가하려면 1~2일 간격으로 2~3회의 연구를 수행하는 것이 좋습니다. 장내 미생물 불균형의 진단은 대장 미생물총 구성의 질적 및 양적 변화를 평가하여 수행됩니다. 특정 시점의 장내 미생물군의 상태뿐만 아니라 장에서 일어나는 변화도 중요하다는 점에 유의해야 합니다. 따라서 보다 정확한 상태를 평가하기 위해 장내 미생물연구는 또한 여러 번 반복되어야 합니다. 얻은 결과의 신뢰성은 재료 운송 시간 제한 준수 여부에 따라 크게 영향을 받습니다. 어떤 경우에는 이러한 기한을 맞추는 것이 비현실적이라면 박테리아 수 측정을 거부하거나 박테리아 수 감소에 대한 정보에 주의 깊게 접근해야 합니다.
분비액
표시: 뇌수막염(부드러운 부위의 염증) 의심 수막). CSF(뇌척수액)는 다음을 통해 얻습니다. 요추 천자(관에서 뇌척수액을 얻습니다. 척수), 뇌의 측면 심실 천공으로 덜 자주 발생합니다 (이 경우 뇌척수액은 소위 뇌실에서 얻어 외부 뇌실 뒤에 천공됩니다. 외이도). 뇌척수액은 의사가 채취합니다. 이 절차는 항상 병원에서만 수행됩니다. 술은 일반적으로 멸균 상태이므로 미생물을 발견한다는 사실이 중요할 수 있습니다. 어린이의 경우 수막염에는 종종 균혈증이 동반됩니다. 이는 혈액에 병원체가 존재하므로 혈액과 뇌척수액에 대한 동시 연구가 수행됩니다.
세균학 연구 결과
의사만이 검사 결과를 정확하게 읽을 수 있습니다. 어떤 경우에는 특정 미생물의 검출 사실이 아니라 그 양이 중요한 경우가 있습니다. 종종 양은 질병의 예후와 치료의 성격에 영향을 미칩니다. 예를 들어 방광일반적으로 소변은 무균 상태이지만 요도의 하부 1/3을 통과하는 동안 요도와 접촉하게 됩니다. 정상적인 미생물및 가용성 병리학적 과정그들은 병원체의 역가(그 양)가 10 4 CFU/ml 이상인 경우에만 말합니다. 상처 분비물의 미생물 수를 평가하는 것은 과정 과정을 예측하는 데 중요합니다. 상처의 미생물 오염 수준이 105 세포( 미생물 세포) 조직 1g 당 (배출물 1ml 당) 생존 가능한 조직에서도 진정이 발생합니다. 상처에 죽은 조직이 있는 경우, 혈종, 이물질개발 화농성 과정더 많이 가능 낮은 수준오염. 또한, 상처 분비물 1g당 105개 이상의 세포로 상처 오염 수준이 높아지면 패혈증 발생 위험이 급격히 증가합니다. 검사 결과에 따라 치료 요법이 어떤 식으로든 변경됩니다. 결론적으로, 세균학을 포함한 모든 분석 결과는 오류가 있을 수 있으므로 의사는 병원체의 DNA를 확인하기 위한 중합효소연쇄반응(PCR) 등과 같은 확증적이거나 명확한 연구를 처방할 수 있습니다.
고전적인 세균학적 검사는 미생물학적 진단의 "황금" 표준입니다.
세균학 연구의 목적은 병원체의 순수한 배양물을 분리하고 동정하는 것입니다.
세균학 연구를 위한 알고리즘:
연구 대상 물질의 1차 현미경 검사(물질의 특성에 따라 선택 단계)
순수 배양물을 분리하기 위한 1차 파종;
순수문화의 축적
단지 연구 생물학적 특성선택된 문화;
병원체의 최종 식별.
연구 첫째 날
1. 기본 현미경
1차 현미경의 결과는 다양한 존재에 대한 대략적인 아이디어를 제공합니다. 형태학적 형태미생물을 식별할 수 있으며, 형태학적 및 착색 특성과 1차 접종을 위한 배지 선택을 통해 1차 식별이 가능합니다.
화농성 분비물 - 일차 현미경 검사가 필요합니다.
뇌척수액- 퇴적물에 대한 1차 현미경 검사가 필요합니다.
가래 - 1차 현미경 검사는 10 4 -10 5의 희석으로 수행됩니다.
목과 코의 면봉 - 기본 현미경 검사는 수행되지 않습니다.
혈액 - 기본 현미경 검사는 수행되지 않습니다.
대변 - 기본 현미경 검사는 수행되지 않습니다.
2. 1차 파종
1차 현미경 검사 후 또는 없는 시험 물질(대변, 소변, 비강 및 인후 면봉, 혈액)을 적절한 배지에 접종하여 순수 배양물을 분리합니다.
설탕 국물, 혈액 한천 - 연쇄상 구균의 경우;
노른자 소금 한천, 혈액 한천 - 포도상 구균의 경우;
엔도 배지 - 장내세균과(Enterobacteriaceae)의 박테리아용;
MPA(고기 펩톤 한천) - 그람 음성 박테리아;
MPA(Shukevich 방법에 따른 시딩) - Proteus를 분리하기 위한 것입니다.
Kitta-Tarozzi 배지 - 혐기성 미생물 분리용;
Sabouraud의 배지 - 곰팡이 분리용.
파종은 세균학적 검사의 첫 번째 단계입니다(1차 현미경 검사를 수행하지 않는 경우).
파종이 수행됩니다. 다음과 같은 방법으로:
연속으로 파종하고 루프를 발사합니다. 소성된 세균 루프로 재료를 채취하고 컵의 윗부분에 줄무늬를 촘촘하게 접종합니다. 다음으로, 루프를 다시 하소하여 촘촘하게 씨가 뿌려진 부분으로 가져오고 컵 전체에 2-3개의 수직선을 그립니다. 그런 다음 컵을 뒤집고 촘촘하게 씨가 뿌려진 부분이 컵의 아래쪽 필드에 남아 있습니다. 루프가 다시 가열되고 파종은 2-3 수평 스트로크로 컵 전체에 퍼집니다.
주걱으로 파종합니다. 물질을 주걱이나 피펫을 사용하여 배지 표면에 도포한 후 주걱을 사용하여 전체 표면에 뿌립니다.
면봉으로 파종. 접종을 위해 시험물질이 담긴 면봉을 컵에 넣고 내용물을 영양배지에 원을 그리며 문지릅니다.
부문별 파종. 이 파종을 통해 컵 바닥이 섹터로 그려지고 파종은 컵 가장자리에서 중앙 및 섹터를 따라 돌진 이동으로 수행됩니다.
연구 2일차
1. 영양 배지에서의 성장을 균질 또는 이질로 기록합니다.
2. 문화재에 대한 설명을 실시합니다.
식민지를 기술하는 알고리즘
영양 배지에서 성장한 결과 콜로니(한 세포의 자손)가 형성됩니다. 분리된 콜로니를 선택하고 연구합니다. 박테리아의 문화적 특성을 연구하는 것을 목표로 하는 연구의 두 번째 단계가 시작됩니다. 각 유형의 미생물이 특정 영양 배지에서 자랄 때 특정 문화재에 해당하기 때문에 결과적인 순수 배양물을 식별하려면 이러한 특성에 대한 지식이 필요합니다.
식민지 연구:
육안으로: 육안으로 투과광과 반사광을 관찰합니다.
현미경: 건식 현미경 시스템의 저배율.
투과광에서 그들은 다음을 연구합니다:
콜로니의 크기(대형, 중형, 소형, 왜성)
집락 모양(정규, 불규칙, 원형);
콜로니 투명성(투명, 불투명).
반사광에서 다음을 결정합니다.
색상(무색 또는 유색);
표면의 특성(매끄러움, 울퉁불퉁함, 윤기 있음, 거칠음)
배지 표면 위의 콜로니 높이(눌림, 편평, 융기).
현미경으로 평가:
가장자리(부드러움, 고르지 않음);
구조(균질, 불균일).
콜로니 연구는 도말 준비, 그람 염색 및 현미경 검사로 끝납니다.
도말을 준비하기 위해 군집에서 물질을 채취할 때 농도가 평가됩니다(부드러움, 미끈미끈함, 건조함).
현미경으로 배양액이 깨끗한 것으로 판명되면 경사진 한천에 계대배양하여 축적합니다.
연구 3일차
1. 성장 패턴에 대한 설명한천에 경사 :
동종, 이종;
스트로크를 따라 연속적이고 연속적입니다.
2. 축적된 배양물의 순도를 확인합니다. 도말표본을 준비하고 그람 염색을 한 후 현미경으로 검사합니다. 순수 배양물이 축적된 경우 추가 식별 과정을 거칩니다. 속과 종에 대한 박테리아의 식별은 대사 특성 연구(생화학적 식별 및 항원 구조) - 혈청학적 식별을 기반으로 합니다.
3. 생화학적 특성 연구. 생화학적 특성 - 적절한 효소 생산을 통해 특정 기질을 분해하는 박테리아의 능력. 생화학적 특성을 연구하기 위해 다양한 기질(다양한 계열)을 포함하는 감별진단배지를 사용합니다. 여기에는 탄수화물이 포함된 Hiss 배지, 리트머스 우유, 젤라틴, 아미노산이 포함된 배지, 황화수소 및 인돌 지표가 포함된 MPB(고기-펩톤 국물)가 포함됩니다.
당분해 특성은 Hiss 미디어에서 연구됩니다. 여기에는 펩톤수, 탄수화물 기질(다양한 단당류 및 다당류), 다가 알코올 및 지시약이 포함되어 있습니다.
박테리아에 탄수화물 기질을 분해하는 효소가 있으면 대사산물(산 또는 산과 가스)을 방출합니다. 산이 형성되면 표시기가 매체의 색상을 변경하고, 가스가 형성되면 매체의 파손이 기록됩니다.
젤라틴과 리트머스 우유를 배양하여 단백질 분해 특성을 연구합니다. 박테리아에 프로테아제가 있으면 젤라틴이 액화됩니다. 크림색 응고가 우유에 나타나고 그 위에 액체가 나타납니다. 우유의 펩톤화 (박테리아 프로테아제가 우유 카제인을 펩톤으로 분해하기 때문입니다).
펩톨분해성. 더 자주 박테리아는 단백질 분해의 중간 생성물인 펩톤을 분해할 수 있습니다. 이 공정의 생성물: 아민(스카톨, 인돌), 아미노산, 가스(황화수소, 암모니아, 이산화탄소). 표시 용지를 사용하여 감지할 수 있습니다.
리트머스 테스트 - 암모니아를 검출합니다.
옥살로아세트산으로 적신 - 인돌을 검출합니다.
아세트산 납을 적셔 황화수소를 검출합니다. 아미노산의 탈아미노화 및 탈카르복실화 생성물은 배지의 pH가 변할 때 색상이 변하는 테스트 스트립을 사용하여 검출됩니다.
연구 4일차
1. 생화학적 검사 결과를 기록합니다. 배양물이 해당 종에 대해 확인된 후 항생제에 대한 민감성, 독성, 독성 인자의 존재, 플라스미드 프로파일 및 종내 분화와 같은 여러 가지 추가 특성이 연구됩니다.
2. 생화학적 동정 결과는 혈청학적 동정의 기초가 됩니다. 분리된 배양물의 혈청학적 식별은 적절한 면역 흡착 혈청을 사용하여 유리 응집 반응으로 수행되며, 선택은 생화학적 식별 결과에 따라 결정됩니다.
종내 분화 - 균주가 특정 phagovar, bacteriocinogenovavar, bacteriocynovar, biovar, resistancer 등에 속하는지 여부를 결정합니다. 이를 통해 동일한 종의 계통 간의 역학적 연관성을 확인할 수 있습니다.
분리된 배양균을 식별하면 어떤 미생물이 어떤 역할을 하는지 결론을 내릴 수 있습니다. 병인적 요인질병. 조건부로 분리하는 경우 병원성 박테리아병인학적 중요성의 기준을 준수해야 합니다.
병리학적 초점의 물질에 최소 10 5 CFU ml/g의 양으로 박테리아가 존재합니다.
동일한 배양 물질로부터 반복적으로 분리합니다.
자가균주에 대한 환자의 혈청 내 항체가가 4배 이상 증가합니다.
박테리아 파지 측정(파지 타이핑)
Phagovar 식별은 아픈 사람들 사이의 역학적 연결을 설정하기 위해 역학적 징후에 따라 수행됩니다. 연구를 수행하려면 MPA가 포함된 페트리 접시를 가져다가 표면을 건조시키고 바닥을 사각형으로 그려 표시하십시오. 다음으로, 국물에서 3-4시간 동안 배양한 후 잔디밭에 파종하고 건조시킨 후 작업 희석액에 해당하는 표준 파지 한 방울을 각 사각형에 적용합니다. 작물을 하루 동안 온도 조절 장치에 두었습니다. 24시간 후, 용해 작용에 의한 특정 파지에 대한 배양의 민감도 스펙트럼이 고려됩니다.
박테리오시노바의 결정
박테리오시노바를 결정하기 위해, 기준 박테리오시노바에 대한 연구된 균주의 민감도를 결정합니다. 파지 타이핑과 마찬가지로 역학적 징후에 따라 수행됩니다.
연구를 수행하기 위해 일반적인 박테리오신의 해당 표준 생산 배양물을 영양 배지에 뿌립니다. 작물을 37°C의 온도 조절 장치에 48시간 동안 두었습니다.
성장한 지표 배양 콜로니를 클로로포름으로 비활성화한 후 2~4ml의 용융 한천을 표면에 붓고 여기에 연구 중인 4시간 배양액 0.2ml를 먼저 첨가합니다. 한천이 굳은 후 작물을 다시 18~24시간 동안 항온조에 두며, 지표 배양물 주변의 성장 억제 구역의 존재를 고려하여 연구된 박테리아의 박테리오시노바를 결정합니다.
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페이지 생성일 : 2016-04-27
얻기 위해 신뢰할 수 있는 결과분석은 항생제 및/또는 항균제를 마지막으로 투여한 후 최소 2주 후에 실시해야 합니다.
- 긁어내기 요도 마지막 배뇨 후 2시간 후부터 검사를 받는 것이 좋습니다. 인두와 비인두 – 공복 시(마지막 식사 후 4~5시간, 이 경우 양치질과 입을 헹구는 것을 제외해야 함), 기타 위치의 경우 특별 훈련필요하지 않습니다.
- 오줌. 연구 대상은 방부제를 사용하지 않고 외부 생식기의 철저한 화장실을 마친 후 멸균 플라스틱 일회용 용기 (용기는 접수처에서 구할 수 있음)에 담긴 3-5ml의 자유롭게 방출되는 소변의 평균 부분입니다. . 실험실로의 배송 시간은 실온에서 1~2시간, 온도 2~8°C~5~6시간입니다.
- 정액 세균학 연구를 위해 목이 넓은 멸균 플라스틱 일회용 용기에 자위로 수집합니다(용기는 접수처에서 구입 가능). 실온에서 재료를 실험실로 배송하는 데 걸리는 시간은 1-2시간입니다.
- 담 아침에 위생처리 후 공복에 채취하는 것이 좋습니다. 구강, 멸균 플라스틱 용기에 담습니다. 실온에서 물질을 실험실로 전달하는 데 걸리는 시간은 1~2시간, 온도가 2~8°C인 경우 5~6시간입니다.
- 울타리 비밀 전립선 전립선의 예비 마사지 후 비뇨기과 전문의가 수행합니다 (이 조작은 중앙 사무실에서만 수행됩니다). 전립선 분비물을 채취하기 전, 성적 금욕최소 2일 동안.
- 세균학 연구 모유 . 모유는 아기에게 수유하기 전이나 수유 후 2시간 후에만 채취됩니다. 검사받는 환자는 왼쪽과 오른쪽을 씻는다 유선따뜻한 물과 비누를 사용하고 깨끗한 수건으로 물기를 닦아냅니다. 70% 에틸알코올을 적당히 적신 탈지면으로 유두와 손가락 끝의 표면을 닦아줍니다. 첫 번째 모유 약 0.5ml는 버립니다. 그런 다음 손으로 젖꼭지를 만지지 않고 여성은 각 샘에서 0.5-1ml의 우유를 별도의 멸균 용기에 표현합니다 (용기는 접수처에서 얻을 수 있음). 실험실로의 배송 시간은 실온에서 1~2시간, 온도 2~8°C~5~6시간입니다.
- 울타리 유동체 세균 학적 검사의 경우 의사가 멸균 플라스틱 용기에 담아 수행합니다 (용기는 접수처에서 구할 수 있습니다). 이 절차는 실험실 환경에서 수행되지 않습니다. 실온에서 물질을 실험실로 전달하는 데 걸리는 시간은 1~2시간, 온도가 2~8°C인 경우 5~6시간입니다.
- 울타리 상처 분비물 세균 학적 검사는 Ames 배지가 담긴 일회용 용기에 의사가 수행합니다 (용기는 접수처에서 구할 수 있습니다). 실온에서 물질이 실험실로 전달되는 데 걸리는 시간은 6시간 이내, 온도 2~8°C에서는 최대 2일입니다.
- 담즙 세균학 연구의 경우 프로빙 중에 A, B 및 C 부분을 별도로 3개의 멸균 튜브에 수집하거나 수술 중에 주사기를 사용하여 하나의 튜브에 수집하여 무균 규칙을 준수합니다(이 절차는 실험실에서 수행되지 않음). 실온에서 물질을 실험실로 전달하는 데 걸리는 시간은 1~2시간, 온도가 2~8°C인 경우 5~6시간입니다.
세균학 연구는 미생물학적 진단을 위해 세균의 특성을 분리하고 연구하기 위해 고안된 연구입니다.
시험물질은 무균상태에서 멸균용기에 담아 가능한 한 빨리 실험실로 전달해야 한다. 필요한 경우 샘플을 냉장 보관해야 합니다. 샘플링 기술은 대상, 질병의 성격 및 미생물의 특성에 따라 다릅니다. 세균학 연구의 일반적인 방법 중 하나는 세균경 검사입니다.
고정되지 않은 박테리아를 연구하려면 두 가지 방법, 즉 분쇄된 방울(슬라이드와 커버 유리 사이)이 사용됩니다. 고정되지 않은 박테리아 제제는 감염성이 있다는 점을 기억해야 합니다.
고정 제제의 세균 내시경 검사에는 도말이 사용됩니다. 이를 준비하기 위해 시험액 한 방울을 유리 슬라이드 표면에 분산시킨 후 건조시킵니다. 약물을 고정하는 가장 일반적인 방법은 가스 버너의 불꽃을 통과시키는 것입니다. 어떤 경우에는 고정 화합물이 사용됩니다. 고정된 제제는 일반적으로 염색됩니다(미생물 염색 참조). 번호까지 필수 요소세균학 연구에는 세균 루프 또는 파스퇴르 피펫을 사용하여 수행되는 접종 및 계대배양이 포함됩니다. 루프를 불꽃으로 어닐링하여 멸균한 다음, 접종되지 않은 한천 부위에 닿거나 헹구어 냉각시킵니다. 멸균액. 파스퇴르 피펫을 사용할 때는 핀셋으로 끝부분을 떼어내고 피펫을 버너 불꽃에 여러 번 통과시킨 후 식힙니다. 파종시 액체 및 고체 영양배지가 사용됩니다. 기울어진 한천에 뿌리면 박테리아 배양물을 한천 표면에 고리로 문지릅니다. 한천이나 젤라틴 기둥의 두께로 파종하는 경우 영양 배지는 루프 또는 특수 바늘을 사용하여 튜브 바닥에 뚫립니다. 액체 배지에 파종할 때는 액체가 흘러나와 튜브와 마개 가장자리를 적시지 않도록 주의해야 합니다. 접종과 계대 배양은 가스 버너 불꽃 근처에서 수행해야 하며, 시험관은 오랫동안 열려 있어서는 안 되며, 배양액이 들어 있는 루프나 파스퇴르 피펫이 아무 것도 건드리지 않아야 합니다. 시험관을 닫기 전에 가장자리를 태워야 합니다. 접종된 튜브에는 즉시 라벨을 부착해야 합니다.
세균학 연구의 가장 중요한 단계는 식별, 즉 순수 배양 형태로 얻은 박테리아의 종 또는 유형을 결정하는 것입니다. 박테리아를 식별할 때 생리학적, 생화학적 특성과 독소 형성이 연구됩니다. 박테리아(반응 및)를 식별하기 위한 혈청학적 방법이 널리 사용됩니다. 많은 경우, 미생물을 식별하는 생물학적 방법은 연구 대상 물질이나 박테리아 배양 결과를 실험실 동물에 감염시키고 동물의 특징적인 병리학적 변화를 식별하는 것에 기초하여 효과적입니다.
순수한 배양물을 분리하기 위해 기계적, 생물학적 방법이 사용됩니다. 기계적 방법의 예: 시험 물질 한 방울을 동일한 멸균 주걱 또는 박테리아 루프를 사용하여 조밀한 영양 배지 표면 위에 연속적으로 첫 번째, 두 번째 및 세 번째로 분쇄합니다. 순수 배양물의 분리는 성장한 개별 콜로니에서 이루어지며 신선한 영양 배지에 대한 검사 및 스크리닝으로 구성됩니다. 순수 배양물을 분리하기 위한 생물학적 방법은 분리된 미생물의 하나 또는 다른 특성을 고려하는 것을 기반으로 하며, 이는 연구 중인 물질에서 발견된 다른 미생물과 구별됩니다.
생물학적 방법을 사용하면 발달에 유리한 조건이 조성되는 영양 배지가 사용됩니다. 특정 유형미생물 생물학적 방법에는 분리된 박테리아 종에 민감한 실험실 동물의 감염도 포함됩니다.
세균학 연구 - 식별 방법 세트 병원성 미생물환자, 캐리어 또는 물체에 외부 환경. 세균학 연구는 또한 외부 환경의 오염 정도를 특성화하는 기회주의적이고 위생을 나타내는 미생물을 탐지하고 특정 환경(물체)의 미생물 환경을 연구하는 데에도 사용됩니다. 세균학 연구는 진단, 전염병 예방, 인간 환경의 위생 및 위생 특성, 과학 연구에 사용될 수 있습니다.
세균학 연구의 재료와 방법은 분석 목적, 환경 조건, 병인 및 질병 경과에 따라 다릅니다. 균혈증이 있는 경우 혈액 배양을 통해 미생물을 검출합니다. 뚜렷한 국소 병변이 있는 경우, 해당 기관의 분비물이나 분비물(디프테리아, 이질, 임질 등)에서 병원균을 찾아야 합니다. 마지막으로, 복잡한 경과를 보이는 질병에서 (예를 들어 장티푸스와 같이) 균혈증이 병변으로 대체되는 경우 소장, 각 단계에서 적절한 연구 방법이 사용됩니다. 질병의 첫 번째 주 동안 혈액 배양이 두 번째로 가장 안정적으로 수행됩니다. 혈청학적 검사, 3주째부터는 대변 배양에서 양성 결과가 나옵니다. 후자의 방법은 회복기의 박테리아 보균자를 검출하고 모니터링하기 위한 대조 연구로도 사용됩니다.
이러한 작업은 미생물의 분리 및 측정을 위해 고안된 방법을 사용하여 수행됩니다. 미생물의 특성에 따라 전체 방법 또는 일부 방법이 사용됩니다.
세균경검사는 물질의 현미경 검사를 기반으로 하는 가장 접근하기 쉬운 기술입니다. 신선한 제제를 현미경으로 관찰할 때 일부 미세화학 반응(예: 요오드성 박테리아를 루골 용액으로 염색)을 사용하거나 박테리아의 다양한 구조적 부분을 선택적으로 염색할 수 있습니다.
박테리아는 착색된 제제에서 더 명확하게 식별될 수 있습니다. 시험재료는 다음에 적용된다. 미끄러지 다최대한 얇고 균일한 층으로 만듭니다. 준비물을 자연 건조시키고 일반적으로 허용되는 방법 중 하나를 사용하여 고정합니다. 그러나 가장 자주 화염을 사용하여 준비물을 버너 화염 위로 2~3회 빠르게 통과시켜 유리가 따뜻하지만 뜨겁지 않도록 합니다. 고정 후 냉각된 제제는 단순 염색 또는 차별 염색으로 염색됩니다(미생물 염색 참조). 형광 현미경 검사의 경우 기본 및 건조 준비가 모두 사용됩니다. 이 경우 특정 염료로 처리하면 미생물체의 구조나 미생물 전체가 자외선이나 짧은 청색광으로 빛나게 됩니다. 또 다른 변형에서는 미생물을 형광물질(염료)로 표지된 특정 혈청으로 처리합니다. 혈청과 일치하는 박테리아는 라벨이 붙은 혈청이 부착됨에 따라 빛을 발합니다. 이종 박테리아는 빛나지 않습니다.
세균내시경법은 일부 감염성 질환(임질, 결핵, 재발열), 기관(편도선, 질), 제품 또는 기타 물체의 미생물 총체 전체를 연구할 때에도 마찬가지입니다.
파종 방법, 즉 원하는 미생물의 순수 배양물을 분리하는 방법은 세균 내시경보다 더 정확하고 신뢰할 수 있는 세균 진단 방법입니다. 신선한 재료를 페트리 접시에 부은 조밀한 영양배지 표면에 펼칩니다. 1차 파종은 특정 미생물에 유리한 일반 배지, 차등 또는 선택 배지에서 수행됩니다. 영양 배지 선택(참조)과 신선한 파종 재료의 전처리 방법은 동반되는 외부 미생물에 의한 오염 정도에 따라 달라집니다. 24~48시간 후. 주어진 미생물에 대한 최적의 온도로 온도 조절 장치에 보관된 컵을 검사하고 의심스러운 집락을 이 병원체의 증식을 촉진하는 배지에 계대배양합니다. 이러한 방식으로 균질한 박테리아의 배양물이 얻어지며 이를 식별해야 합니다.
미생물의 식별은 미생물의 모양과 이동성을 결정하기 위해 착색된 제제와 분쇄된 방울(참조)에서 형태를 연구하는 것으로 시작됩니다. 다음 단계각 유형에 특정한 조합으로 탄수화물, 아미노산 및 요소를 분해하는 박테리아의 효소 능력에 대한 연구입니다. 박테리아에서는 설탕과 단백질 분해 효소가 가장 많이 연구됩니다.
미생물의 식별은 각 미생물 속과 유형의 특징적인 다른 특성에 대한 연구를 통해 보완되어야 합니다. 이러한 특성에는 다른 동물의 적혈구를 선택적으로 용해시키는 능력(용혈), 혈장 응고(혈장 응고), 피브린 응고 용해(섬유소분해) 등이 포함됩니다. 박테리아의 이러한 모든 특징은 차별적 특징으로 결정하는 데 사용될 수 있습니다. .
주로 병원성 대장균군 박테리아인 일부 미생물 종의 최종 식별에는 혈청학적 식별이 포함됩니다(미생물 식별 참조). 일반적으로 이러한 목적을 위해 응집 반응이 수행됩니다. 즉, 동일한 이름의 면역 혈청의 영향으로 박테리아가 밀집되어 있음이 감지됩니다. 특정 종에 대한 혈청 내 미생물의 응집은 해당 종의 구성원임을 나타냅니다. 일반적으로 응집 반응은 대략 유리 위에서 수행되며 혈청 희석액이 있는 시험관에서 최종 측정을 위해 수행됩니다.
설명된 방식으로는 다수의 미생물을 완전히 식별할 수 없습니다. 그런 다음 실험실 동물의 감염으로 식별을 보완해야 합니다. 왜냐하면 일부 박테리아는 동물이 감염될 때 드러나는 병원성 또는 독성을 특징으로 하기 때문입니다. 어떤 경우에는 동물의 감염이 병원성 미생물의 축적을 위한 수단이 되기도 합니다.
형태, 생화학적, 혈청학적, 그리고 필요한 경우 생물학적 특성을 연구하는 동안 수집된 배양물의 모든 특성에 대한 비교만이 식별의 근거를 제공할 수 있습니다. 언제 대답하세요 긍정적인 결과분리된 미생물이 대표적이라면 연구는 어렵지 않다. 이 경우 속, 종, 그리고 결정된 경우 박테리아의 유형을 표시하십시오. 일반적인 특성에서 일부 특성을 벗어나는 미생물이 분리되면 비정상적인 특성을 나타내는 답이 제공됩니다. 이 경우 질병의 경과나 물질 수집 조건이 허용하는 경우 연구를 반복하는 것이 유용합니다. 비정형 미생물 배양에 대해 다른 보다 복잡한 방법을 사용하여 추가 연구를 수행하는 것도 유용합니다.
세균학 연구의 부정적인 결과는 상대적으로 중요하며 재료의 테스트된 부분에 필요한 미생물이 포함되어 있지 않거나 생존할 수 없다는 것만을 보여줍니다. 그러나 다른 부분에 존재할 수도 있습니다. 따라서 예를 들어 간균 보균 여부를 검사할 때( 장티푸스, 이질, 디프테리아) 반복적인 연구가 필요하다.