원핵세포와 진핵세포
수업 목표:
· 광학현미경의 구조를 연구하고, 빛을 설치하는 기술, 임시 준비물을 준비하고 현미경으로 관찰하는 기술을 습득합니다.
· 세포의 구조에 대해 알아보고 원핵 세포와 진핵 세포를 구별하는 방법을 배웁니다.
· 실험실 보고서를 적절하게 준비하는 방법을 알아보세요.
자율학습을 위한 질문과 과제
1. 과학으로서의 생물학. 생물학의 방법.
2. 생물학의 기본 개념.
3. 생명체의 기본 특성.
4. 생명체의 조직 수준.
5. 생명과 살아있는 유기체에 대한 현대적 정의.
6. 현대 세포 이론의 기본 조항.
7. 지배권(제국)과 살아있는 유기체의 왕국.
8. 원핵세포의 구조.
9. 현미경의 기계적, 광학적, 조명 부분을 보여주고 그 구조에 대해 이야기할 수 있습니다.
10. 접안렌즈에는 어떤 종류가 있나요? 렌즈와 초점 거리. 침지렌즈의 특징.
11. 현미경의 배율과 분해능은 얼마입니까?
12. 명시야 방식을 사용하여 조명을 설정합니다.
13. 광학 현미경 작업에 대한 기본 규칙.
14. 영구 및 임시 마이크로슬라이드. 임시 마이크로슬라이드를 준비하는 주요 단계.
장비 및 재료:
1. 현미경 Mikmed-5 또는 이에 상응하는 것.
2. 슬라이드 및 커버슬립, 페트리 접시, 물 컵, 눈 피펫, 핀셋, 가위, 탈지면 조각, 침지 오일.
3. 영구 마이크로슬라이드: Bacillus subtilis 및 Sarcina 배양물의 고정된 염색 도말, 개구리 혈액.
4. 임시준비 재료 : 양파 2~3개.
5. 0.01% 메틸렌블루용액, 요오드용액.
일 1.1. 광학 현미경의 구조 연구
광학 현미경은 생물학적 대상을 연구하는 주요 방법 중 하나이므로 생물학의 모든 후속 연구는 물론 미생물학자의 실제 활동을 위해서는 현미경 기술의 숙달이 필요합니다.
국내에서 생산되는 현미경 Mikmed-5를 예로 들어 광학현미경의 설계를 생각해 보자. 광학현미경은 크게 기계, 조명, 광학의 세 부분으로 구성된다. 에게 기계적인 부분 포함 사항: 삼각대, 회전 장치, 매크로 및 마이크로미터 나사, 스테이지(그림 1).
그림 1 - 광학 현미경 Mikmed-5의 설계
1 – 접안렌즈; 2 – 쌍안경 부착; 3 – 노즐 고정용 나사; 4 – 회전 장치; 5 – 렌즈; 6 – 삼각대; 7 – 객체 테이블; 8 – 링;
9 – 거친 포커싱 메커니즘(랙)의 핸들; 10 – 마이크로미터 포커싱 메커니즘의 핸들; 11 – 스위치; 12 – 광원의 밝기를 조정하는 핸들; 13 – 콘덴서 고정 나사; 14 – 콘덴서; 15 – 삼각대 베이스; 16 – 약물 관리자; 17 – 물체를 세로 방향으로 이동시키는 핸들; 18 – 물체를 가로 방향으로 움직이는 핸들; 19 – 하우징의 수집기
삼각대거대한 베이스와 각진 튜브 홀더로 구성됩니다. 베이스 하단에는 4개의 지지 플랫폼이 있어 데스크탑에서 현미경의 안정적인 위치를 보장합니다.
튜브 홀더의 상부에는 쌍안경 부착물을 고정하기 위한 헤드와 리볼버용 나사산이 있는 소켓이 있습니다. 튜브 (안구관)은 접안렌즈가 상단에 삽입되는 속이 빈 관입니다.
리볼버(위도부터. 리볼보- 회전)은 렌즈를 나사로 고정하기 위한 4개의 소켓이 있는 회전 디스크입니다.
현미경 거친 포커싱 나사 – 거시적 나사 , 또는 고문 – 삼각대의 왼쪽에 있습니다. 이 나사의 도움으로 스테이지는 장거리에 걸쳐 수직으로 위아래로 움직입니다. 매크로메트릭 나사는 물체를 주로 한 평면에서 연구할 때 낮은 배율로 사용됩니다.
마이크로메트릭 포커싱 노브(직경이 더 작음)은 삼각대의 양쪽에 위치하며 고배율로 사용되며 사용 시 서로 다른 깊이에 있는 물체의 세부 사항을 검사할 수 있습니다. 래칫을 사용하여 물체에 정확한 초점을 맞출 때만 사용해야 합니다.
주제 테이블중앙에 구멍이 있는 사각형 판으로, 그 위에 연구 대상이 있는 슬라이드 유리가 놓여 있습니다. 변위를 방지하기 위해 슬라이드는 특수 슬라이드 클램프로 고정됩니다. 오른쪽의 대상 테이블 아래에는 표본을 가로 및 세로 방향으로 이동할 수 있는 좌표 이동 메커니즘용 핸들이 있습니다.
조명 부품
현미경은 조명기, 조리개 다이어프램이 있는 콘덴서 및 제거 가능한 필터로 구성됩니다.
일루미네이터
삼각대 베이스에 내장되어 있습니다. 관찰자의 오른쪽 삼각대 측면에 있는 스위치를 사용하여 켜집니다. 광원 밝기 조절 손잡이(스위치 아래 오른쪽 삼각대에 있음)를 돌려 광원의 밝기를 변경할 수 있습니다.
할로겐 램프 소켓 홀더는 아래쪽에서 두 개의 나사를 사용하여 삼각대 바닥에 부착되어 있으며 장치를 기울여 접근할 수 있습니다. 나사를 풀면 물체의 조명이 고르지 않을 경우 베이스의 콩 모양 구멍에 있는 램프와 함께 소켓 홀더를 이동할 수 있습니다. 이 현미경의 광원이 LED인 경우 조명을 조정할 때 이동할 필요가 없습니다.
콘덴서무대 아래에 위치하며 무대에 부착된 브래킷에 삽입되어 공통 프레임에 장착된 두 개의 렌즈로 구성됩니다. 응축기를 이동하려면 관찰자의 왼쪽에 있는 특수 핸들을 사용하십시오. 콘덴서의 위치를 변경하면 물체의 조명 강도를 변경할 수 있습니다. 낮추면 조명이 감소하고 높이면 증가합니다.
아이리스 다이어프램콘덴서 바닥에 내장되어 있습니다. 특수 손잡이를 사용하여 이동 및 분리가 가능한 이동 가능하게 강화된 철판이 있는 링입니다. 광선이 통과할 수 있도록 중앙에 구멍이 남아 있습니다. 다이어프램을 사용하면 광속의 양을 조정할 수 있습니다. 최대한 좁혀 이미지의 선명도를 높이는 데 기여합니다.
광학 부품 현미경은 접안렌즈와 대물렌즈로 표현됩니다.
접안 렌즈(위도부터. 안구– 눈)은 튜브 상부에 위치하여 눈을 향하게 합니다. 접안렌즈는 금속 슬리브로 둘러싸인 두 개의 렌즈로 구성됩니다. 접안렌즈 상단에 있는 숫자로 배율(x7, x10, x15)을 판단할 수 있습니다. 필요에 따라 접안렌즈를 튜브에서 제거하고 다른 것으로 교체할 수 있습니다.
렌즈일반적인 금속 프레임에 장착된 렌즈 시스템입니다. 렌즈는 리볼버의 소켓에 나사로 고정되어 있으며 측면에 숫자로 표시되는 다양한 배율을 갖습니다. 가장 작은 물체를 연구하는 데 사용되는 저배율 렌즈(x4 및 x10), 고배율 렌즈(x40) 및 몰입형 렌즈(x100)가 있습니다.
모든 렌즈는 적용 방법에 따라 건식 렌즈와 침지 렌즈(위도부터)로 구분됩니다. . 몰입- 담그거나 담근다). 건식 렌즈는 전면 렌즈와 문제의 표본 사이에 공기가 있습니다. 공기와 유리는 서로 다른 빛의 굴절률(각각 1.0과 1.52)을 가지므로 한 매체에서 다른 매체로 전달되는 광선이 굴절되고 산란되며 문제의 물체가 부분적으로 왜곡됩니다(그림 2). ). 침지형 렌즈의 경우, 전면 렌즈와 프렙 사이의 공간은 일반적으로 삼나무 오일이나 물로 채워집니다. 슬라이드 유리, 렌즈 유리, 삼나무유는 빛의 굴절률(1.52와 1.515)이 거의 동일하므로 한 매질에서 다른 매질로 전달되는 광선이 거의 굴절되지 않고 빛이 산란되지 않으며 문제의 물체가 왜곡되지 않습니다. . 침지용 조성물로 사용되는 다른 물질도 유리에 가까운 광굴절률을 가지고 있습니다: 피마자유(1.48-1.49), 정향유(1.53), 피마자유와 정향유의 혼합물(1.515).
그림 2 - 콘덴서와 현미경 렌즈 사이의 광선 경로
오른쪽은 건식렌즈, 왼쪽은 침지렌즈입니다. 1 – 대물렌즈; 2 – 상부 콘덴서 렌즈; 3 – 유리 슬라이드; 4 - 개체; 5 – 커버 유리; 6 – 침지 오일; 7 – 공기. AB - 공기를 통과하는 광선이 편향되어 렌즈에 들어 가지 않습니다. VG - 침지 오일을 통과하는 광선이 렌즈에 들어갑니다.
현미경의 전체 배율은 대물렌즈 배율과 접안렌즈 배율의 곱과 같습니다. 그러나 이 값이 현미경의 모든 기능을 특징짓는 것은 아닙니다. 확대한 이미지는 선명하지 않을 수도 있습니다. 결과 이미지의 선명도가 결정됩니다. 해결 현미경 후자는 아직 하나로 병합되지 않은 두 개의 가시 지점 사이의 최소 거리로 이해됩니다. 해상도가 높을수록 물체를 더 작게 볼 수 있습니다.
광학현미경의 분해능은 주로 광선의 회절에 의해 결정되며 사용된 빛 파장의 약 절반과 같습니다. 더 짧은 파장의 빛(파란색 또는 파란색)으로 프렙을 조명하면 더 작은 물체를 볼 수 있습니다. 이 경우 현미경의 해상도는 0.2 마이크론에 가깝습니다. 이를 위해 현미경에는 파란색 필터가 장착되어 있습니다.
운동. 광학현미경의 구조에 대해 알아보세요. 모든 주요 부분을 찾아 이름을 지정하십시오.
일 1.2. 임시 준비 준비.
조명 설정
현미경으로 작업할 때 최상의 결과는 물체에 적절한 조명이 비추는 경우에만 얻을 수 있습니다. 다음은 Mikmed-5 현미경에 조명을 설치하는 한 가지 방법입니다.
1. 현미경을 설정하려면 두 개의 머리카락을 십자형으로 배치한 준비물을 준비합니다. 이 임시 준비를 준비하려면 가위를 사용하여 약 3cm 길이의 머리카락을 자르고 반으로 자른 다음 두 조각을 유리 슬라이드 위에 서로 겹쳐서 십자가 모양을 만듭니다. 그런 다음 점안기를 사용하여 머리카락에 물 한 방울을 바르고 커버 슬립으로 덮습니다.
커버 슬립 아래에 기포가 형성되지 않도록 하십시오. 커버 슬립의 측면 가장자리를 잡고 그 가장자리를 가장자리에서 떨어지는 물방울 표면에 닿아 물이 커버 슬립의 가장자리를 따라 퍼지도록 한 다음 커버 슬립을 슬라이드 위로 조심스럽게 낮추십시오. 커버슬립 아래의 전체 공간을 채울 만큼의 양의 액체 한 방울을 섭취하는 방법을 배우십시오. 너무 작은 액체 한 방울은 전체 공간을 채우지 못하고 거품 형태로 남은 공기는 작업을 어렵게 만듭니다. 너무 큰 방울을 떨어뜨리면 커버슬립 너머로 물이 나오는 것을 볼 수 있습니다. 이 경우 여과지를 사용하여 여분의 물을 제거해야 합니다.
시편을 시편 테이블 위에 놓고 시편 홀더의 클램프로 고정합니다. 머리카락의 교차점을 광선의 중앙에 정확히 놓습니다. 지정된 약물 대신 다른 약물을 사용할 수 있으며 그 세부 사항은 낮은 배율에서 명확하게 보입니다.
2. 저배율 렌즈(x4)를 작업 위치로 설정합니다. 렌즈가 테이블 구멍 위의 중앙 위치에 오면 리볼버의 걸쇠가 걸리고 약간의 딸깍 소리가 들리며 리볼버가 잠깁니다. 콘덴서를 최대한 들어 올리십시오. 다른 배율의 렌즈로 이동할 때 콘덴서의 높이 위치를 변경하지 마십시오.
3. 측면에서 보면 매크로메트릭 나사를 사용하여 물체가 대물렌즈 전면 렌즈에 거의 닿을 때까지 스테이지를 올립니다. 접안렌즈를 통해 보는 동안 래칫을 반대 방향으로 천천히 회전시키고 물체의 윤곽이 시야에 나타날 때까지 스테이지를 조심스럽게 내립니다. 피사체의 선명한 이미지를 얻으려면 마이크로미터 포커싱 메커니즘 손잡이를 사용하십시오.
4. 쌍안경 부착물의 오른쪽 접안렌즈 튜브에서 접안렌즈를 제거합니다. 접안렌즈관을 통해 관찰하면서 콘덴서 조리개 조리개를 렌즈의 출사동 크기만큼 엽니다.
5. 접안렌즈 튜브에 접안렌즈를 설치하고 접안렌즈의 시야를 관찰합니다. 시야의 조명이 고르지 않은 경우 사용 설명서에 표시된 대로 램프를 중앙에 맞추십시오. 최상의 이미지 품질을 얻으려면 각 렌즈마다 콘덴서 조리개 조리개를 렌즈 출사동의 1/3까지 덮고 파란색 필터를 사용하는 것이 좋습니다.
조명 시스템의 정상적인 작동은 1~2mm 두께의 유리 슬라이드를 사용할 때만 보장됩니다.
운동. 위에서 설명한 대로 마이크로슬라이드를 준비하고 조명을 설정합니다.
현미경에는 기계 부품과 광학 부품이 있습니다. 기계적인 부분은 삼각대(베이스와 튜브홀더로 구성)와 그 위에 렌즈를 부착하고 교체하기 위한 리볼버가 장착된 튜브로 표현됩니다. 기계 부분에는 준비 단계, 콘덴서 및 광 필터 고정 장치, 거친(매크로 메커니즘, 매크로 나사) 및 미세(마이크로 메커니즘, 마이크로 나사) 이동을 위해 삼각대에 내장된 메커니즘도 포함됩니다. 스테이지 또는 튜브 홀더.
광학 부품은 렌즈, 접안렌즈 및 조명 시스템으로 표현되며 대물대 아래에 위치한 아베 콘덴서와 저전압 백열등 및 변압기가 내장된 조명 장치로 구성됩니다. 렌즈는 리볼버에 나사로 고정되어 있으며 이미지를 관찰하는 해당 접안 렌즈는 튜브 반대쪽에 설치됩니다.
그림 1. 현미경 구조
기계 부품에는 베이스와 튜브 홀더로 구성된 삼각대가 포함되어 있습니다. 베이스는 현미경을 지지하는 역할을 하며 전체 삼각대 구조를 지탱합니다. 베이스에는 거울이나 내장 조명용 소켓도 포함되어 있습니다.
- 프렙 배치 및 수평 이동에 사용되는 대상 테이블;
- 장착 및 수직 조명 필터용 어셈블리입니다.
대부분의 현대 현미경에서는 고정된 튜브 홀더가 있는 매크로 및 마이크로 메커니즘을 사용하여 대물대를 수직으로 이동하여 포커싱을 수행합니다. 이를 통해 튜브 홀더에 다양한 부착물(현미경 등)을 설치할 수 있습니다. 미세 조작기와 함께 작동하도록 설계된 일부 현미경 설계에서는 고정 스테이지가 있는 튜브 홀더의 수직 이동에 의해 초점이 맞춰집니다.
현미경 튜브- 렌즈와 접안렌즈를 서로 일정한 거리에 설치하는 데 사용되는 장치입니다. 튜브로 윗부분에는 접안 렌즈 또는 접안 렌즈가 있고 아랫 부분에는 렌즈 부착 및 교환 장치가 있습니다. 일반적으로 이것은 다양한 배율의 렌즈를 빠르게 교체하기 위한 여러 개의 소켓이 있는 리볼버입니다. 리볼버의 각 소켓에서 렌즈는 항상 현미경의 광축 중심에 유지되도록 고정됩니다. 현재 튜브의 디자인은 접안렌즈를 운반하는 튜브 부분과 렌즈가 있는 리볼버가 구조적으로 연결되지 않는다는 점에서 이전 현미경과 크게 다릅니다. 튜브 중간 부분의 역할은 삼각대로 수행할 수 있습니다.
생물학적 현미경 튜브의 기계적 길이는 일반적으로 160mm입니다. 렌즈와 접안렌즈 사이의 튜브에는 광선의 방향을 변경하는 프리즘과 접안 배율과 튜브의 광학 길이를 변경하는 중간 렌즈가 있을 수 있습니다.
접안렌즈(직선 및 경사)를 운반하는 튜브 섹션에는 접안렌즈(안구 부착물)의 수에 따라 서로 교체 가능한 다양한 디자인이 있습니다.
- 단안의- 한쪽 눈으로 관찰하기 위해 한쪽 접안렌즈를 사용합니다.
- 쌍안경- 두 눈으로 동시에 관찰하기 위한 두 개의 접안 렌즈가 있으며 현미경 모델에 따라 디자인이 다를 수 있습니다.
- 삼안- 두 개의 접안렌즈와 프로젝션 출력이 있어 두 눈으로 시각적 관찰과 동시에 적절한 광학 장치를 사용하여 약물 이미지를 컴퓨터 모니터나 기타 이미지 수신기에 투사할 수 있습니다.
튜브가 있는 튜브 홀더 외에도 현미경의 기계 부품에는 다음이 포함됩니다.
- 개체 테이블을 부착하기 위한 브래킷;
- 프렙을 배치하고 현미경 축을 기준으로 두 개의 수직 방향으로 수평 이동하는 데 사용되는 스테이지입니다. 일부 테이블의 디자인은 프렙을 회전할 수 있도록 합니다. 대물 스테이지의 수직 이동은 매크로 및 마이크로 메커니즘에 의해 수행됩니다.
- 콘덴서와 센터링의 고정 및 수직 이동, 조명 필터 배치용 장치.
현미경은 육안으로 보이지 않는 물체를 연구하기 위한 광학 기기입니다. 현미경(그림 1)은 기계 부품과 광학 부품을 구별합니다. 장치의 기계적 부분은 튜브, 접안렌즈 및 렌즈가 장착된 튜브 홀더가 부착된 다리(렌즈는 회전 장치를 사용하여 교체됨), 무대 및 거울이 있는 조명 장치로 구성됩니다. 튜브는 튜브 홀더에 이동 가능하게 부착되어 있으며 두 개의 나사를 사용하여 올리거나 내립니다. 마이크로미터 나사는 초점을 사전 설정하는 데 사용됩니다. 마이크로미터 나사 - 미세 초점 맞추기용. 대상 테이블에는 표본을 수평면에서 다양한 방향으로 이동할 수 있는 장치가 장착되어 있습니다. 조명 장치는 거울과 테이블 사이에 위치한 콘덴서와 다이어프램으로 구성됩니다.
쌀. 1. 생물학적 현미경:
1 - 접안렌즈;
2 - 쌍안경 부착;
3 - 튜브 교체용 시트가 있는 리볼버 부착용 헤드;
4 - 쌍안경 부착물 고정용 나사;
5 - 썰매의 리볼버;
6 - 렌즈;
7 - 개체 테이블;
8 및 9 - 약물 운전자의 세로(8) 및 가로(9) 이동을 위한 양;
10 - 직접 및 경사 조명의 비평면 콘덴서;
11 - 테이블 센터링 나사;
12 - 거울;
13 - 마이크로메커니즘 날개;
14 - 콘덴서 브래킷;
15 - 스테이지 상부를 고정하는 나사 머리;
16 - 마이크로 메커니즘이 있는 상자;
17 - 다리;
18 - 거친 움직임 나사;
19 - 튜브 홀더.
다이어프램은 콘덴서로 들어오는 빛의 강도를 제어합니다. 콘덴서를 수직 방향으로 움직여 렌즈에 들어오는 광속의 강도를 변경할 수 있습니다. 렌즈는 물체의 역배율 이미지를 제공하는 상호 중심 렌즈 시스템입니다. 렌즈의 배율은 프레임에 표시됩니다(X10, X20, X40, X90). 렌즈에는 건식 렌즈와 침수형(잠수정)의 두 가지 유형이 있습니다. 먼저 눈으로 조절되는 매크로스크류를 사용하여 침지 렌즈를 침지 오일에 담근 다음, 마이크로스크류를 조작하여 물체의 선명한 이미지를 얻습니다. 접안렌즈는 렌즈를 통해 얻은 상을 확대하는 광학계입니다. 접안렌즈 배율은 프레임(X5 등)에 표시됩니다. 현미경의 전체 배율은 대물렌즈의 배율에 접안렌즈의 배율을 곱한 것과 같습니다.
쌀. 2. OI-19 조명기가 장착된 MBI-1 현미경.
특수 조명 장치를 광원으로 사용하여 일광 및 인공 조명에서 현미경으로 작업할 수 있습니다(그림 2). 콘덴서 작업시 광원에 관계없이 평면거울을 사용합니다. 오목 거울은 콘덴서 없이 작동됩니다. 낮에는 콘덴서가 무대 높이까지 올라가고, 인공 조명에서는 광원이 표본 평면에 나타날 때까지 낮아집니다. 현미경 기술, 현미경법을 참조하십시오.
빛은 육안으로 보이지 않는 물체를 연구하도록 설계된 광학 기기입니다. 광학현미경은 다음과 같이 나눌 수 있다. 생물학적이고 입체적인. 생물학현미경이라고도 불린다. 실험실, 의료투과광으로 얇고 투명한 샘플을 검사하기 위한 현미경입니다. 생물학 실험실 현미경은 배율이 높으며 가장 일반적인 것은 1000x이지만 일부 모델은 최대 1600x까지 배율을 가질 수 있습니다.
입체 현미경은 반사광을 통해 불투명한 물체(동전, 광물, 수정, 전기 회로 등)를 검사하는 데 사용됩니다. 입체 현미경은 작은 배율(20x, 40x, 일부 모델은 최대 200x)을 갖지만 동시에 관찰된 물체의 3차원 이미지를 생성합니다. 이 효과는 예를 들어 금속 표면을 연구할 때 매우 중요합니다.
이 기사에서는 생물학 실험실 현미경의 구조에 대해 더 자세히 살펴보고 현미경의 광학, 기계 및 조명 시스템을 별도로 고려할 것입니다.
2. 노즐
4. 베이스
5. 포탑
6. 렌즈
7. 좌표표
8. 무대
9. 아이리스 다이어프램 콘덴서
10. 라이터
11. 스위치(켜기/끄기)
12. 매크로메트릭(대략) 포커싱 나사
13. 마이크로메트릭(미세) 포커싱 나사
현미경 광학 시스템
현미경의 광학 시스템은 다음과 같이 구성됩니다. 렌즈포탑 머리 부분에 위치하며, 접안렌즈. 광학 시스템의 도움으로 연구 중인 샘플의 이미지가 실제로 눈의 망막에 형성됩니다. 생물학적 현미경을 사용하여 얻은 이미지는 반전되어 있습니다.
배율 = 렌즈 배율 X 눈 배율.
기계식 현미경 시스템
기계 시스템은 튜브, 삼각대, 스테이지, 초점 메커니즘 및 터렛으로 구성됩니다.
초점 메커니즘은 이미지의 초점을 맞추는 데 사용됩니다. 거친(거시적) 포커싱 나사낮은 배율로 작업할 때 사용됩니다. 미세(마이크로메트릭) 포커싱 나사– 고배율로 작업할 때.
연구 중인 물체가 무대 위에 놓입니다. 객체 테이블에는 고정(고정), 이동, 좌표 등 여러 유형이 있습니다. 사용하여 좌표 테이블 X 및 Y축을 따라 수평면에서 연구 중인 샘플을 이동할 수 있습니다.
~에 포탑 머리렌즈가 위치하고 있습니다. 돌리면 하나의 렌즈 또는 다른 렌즈를 선택하여 배율을 변경할 수 있습니다.
접안렌즈가 튜브에 삽입됩니다.
현미경 조명 시스템
조명 시스템은 광원, 콘덴서 및 다이어프램으로 구성됩니다.
광원은 내장형이거나 외장형일 수 있습니다. 생물학적 현미경에는 바닥 조명이 있습니다.
콘덴서와 다이어프램을 사용하여 프렙의 조명을 조정할 수 있습니다. 콘덴서단렌즈, 이중렌즈, 3렌즈가 있습니다. 콘덴서를 올리거나 내리면 시료에 떨어지는 빛이 각각 응축되거나 산란됩니다. 횡격막아마도 아이리스구멍 직경의 원활한 변화 또는 계단식직경이 다른 여러 개의 구멍이 있습니다. 따라서 구멍의 직경을 줄이거나 늘리면 연구 중인 물체에 떨어지는 빛의 흐름이 그에 따라 제한되거나 늘어납니다.
현미경의 구조와 작업 규칙
현미경 방법(gr. micros - 최소형, scorеo - 모양)을 사용하면 현미경(빛, 위상차, 형광, 자외선, 전자)을 사용하여 세포의 구조를 연구할 수 있습니다. 광학현미경에서는 물체가 가시광선으로 보입니다. 이를 위해 MBR, MBI, MBS-1, R-14, MIKMED-1 등과 같은 현미경이 사용됩니다.
현미경은 기계 부품, 조명 부품, 광학 부품으로 구성됩니다.
에게 기계적인 부분현미경에는 삼각대 스탠드(신발), 삼각대 컬럼(튜브 홀더), 튜브, 시료용 클램프 또는 클램프가 있는 스테이지, 분류 나사(스테이지와 시료를 이동하기 위한 나사), 리볼버, 매크로가 포함됩니다. 마이크로미터 나사, 콘덴서 나사, 조리개 레버, 광 필터용 프레임. 정렬 나사는 슬라이드의 중앙에 개체를 배치하는 데 사용됩니다. 리볼버는 중앙 나사로 서로 연결된 두 개의 볼 세그먼트로 구성됩니다. 공의 위쪽 부분이 튜브에 부착됩니다. 하단 부분에는 렌즈를 나사로 고정할 수 있는 구멍이 있습니다. 매크로 및 마이크로미터 나사는 대략적이고 마이크로미터 포커싱을 제공합니다(렌즈와 연구 대상 사이의 거리 변경).
조명부분이동식 거울, 조리개 조리개, 콘덴서 및 조명 필터(무광택 및 파란색)로 구성됩니다. 거울은 빛을 포착하여 준비물(물체)로 향하게 하는 역할을 합니다. 거울에는 평면과 오목한 두 가지 표면이 있습니다. 거울의 평평한 표면은 밝은 빛에 사용되고, 오목한 표면은 어두운 빛에 사용됩니다. 다이어프램은 레버의 움직임으로 인해 중앙으로 수렴되거나 분기될 수 있는 금속판 시스템으로 구성됩니다. 다이어프램은 콘덴서 아래에 위치하며 광선의 폭을 변경하는 역할을 합니다. 콘덴서(렌즈 시스템)는 산란된 광선을 평행 광선의 얇은 광선으로 집중시켜 물체를 향하게 합니다. 특수 나사를 사용하여 위아래로 움직이므로 약물의 최적 조명을 설정할 수 있습니다. 콘덴서의 정상 위치는 가장 높습니다. 빛 필터는 빛의 회절을 제거합니다. 홍채 다이어프램 아래에 위치한 특수 접이식 프레임에 있습니다. 확산 조명에는 무광택 필터가 사용되며 밝은 빛에는 파란색 필터가 사용됩니다.
확대 장치:현미경 MBR-1 및 현미경 R-14.
기계 부분: 1 - 삼각대 스탠드(베이스); 2 - 삼각대 컬럼(튜브 홀더); 3 - 튜브; 4 - 리볼버; 5 - 개체 테이블; 6 - 나사 정렬; 7 - 거시적 나사; 8 - 마이크로미터 나사; 9 - 콘덴서 나사; 10 - 조리개 다이어프램 레버, 11 - 필터 프레임.
조명부분: 12 – 거울; 13 - 다이어프램; 14 – 콘덴서.
광학 부품: 15 - 접안 렌즈; 16 - 렌즈.
광학부품리볼버의 소켓에 있는 렌즈(물체를 향한 렌즈 시스템)와 접안렌즈(연구원의 눈을 향한 렌즈 시스템)로 구성됩니다. 접안렌즈는 튜브의 위쪽 구멍에 삽입됩니다. 일반적으로 현미경에는 세 가지 대물렌즈(8x - 저배율 대물렌즈, 40x - 고배율 대물렌즈, 90x - 침지 대물렌즈)가 장착되어 있습니다. 따라서 대물렌즈에는 8, 40 또는 90이 표시됩니다. 접안렌즈에도 배율이 표시되어 있습니다. 가장 일반적으로 사용되는 접안렌즈는 7x, 10x 및 15x 배율입니다.
현미경의 총 배율(이미지의 선형 치수가 물체의 선형 치수보다 몇 배나 큰지 나타내는 값)은 접안렌즈와 대물렌즈의 배율을 곱한 것과 같습니다. 예를 들어, 10x 접안렌즈와 8x 대물렌즈로 작업할 때 물체의 선형 치수는 80배(8 x 10 = 80) 증가합니다.
광학 현미경의 가장 중요한 특징은 해상도입니다. 해상도(d)는 별도로 보이는 물체의 두 지점 사이의 최소 거리입니다. 이는 다음 공식에 의해 결정됩니다.
d = 0.61 _________________
여기서 λ는 빛의 파장, n은 물체와 렌즈 사이의 매체 굴절률, α는 렌즈의 광축과 렌즈에 들어오는 가장 많이 편향된 광선 사이의 각도입니다. "n sin α" 값을 렌즈의 개구수라고 합니다. 8x 렌즈의 경우 0.20입니다. "40x" 렌즈의 경우 - 0.65; "90x" 렌즈는 1.25입니다. 현미경의 분해능 한계는 광원의 파장에 따라 달라집니다. 광학현미경으로 보면 555nm이다. 따라서 현대 광학현미경의 유용한 배율 한계는 최대 1500배입니다.
저배율(8x 렌즈)에서 현미경을 사용하는 규칙.
1. 작업을 시작하기 전에 현미경의 서비스 가능성을 확인하고 접안 렌즈, 대물 렌즈, 콘덴서 및 거울을 냅킨으로 닦으십시오. 접안렌즈와 렌즈를 푸는 것은 금지되어 있습니다.
2. 현미경을 테이블 가장자리에서 손바닥 너비만큼 작업대의 왼쪽에 놓고 튜브 홀더가 사용자를 향하고 대상 테이블이 사용자에게서 멀어지도록 놓습니다.
3. 응축기를 올려서 대상 테이블 높이에 놓고 다이어프램을 엽니다.
4. 저배율 렌즈 "8x"가 딸깍 소리를 낼 때까지 리볼버를 움직입니다(딸깍 소리는 접안렌즈의 광축이
그리고 렌즈 일치).
5. 매크로메트릭 나사를 회전시켜 스테이지에서 1cm 떨어진 곳에 "8x" 대물렌즈를 배치합니다.
6. 시야 조명: 접안렌즈를 통해 보면서 전체 시야가 고르고 충분히 강렬하게 조명될 때까지 광원을 기준으로 한 손 또는 양 손의 엄지와 집게손가락으로 거울을 회전시킵니다. 거울 자체를 가리지 않도록 손가락을 거울 측면에 대십시오. 이제부터 현미경은 작업장에서 이동할 수 없습니다.
7. 슬라이드의 측면 옆에 엄지손가락과 집게손가락을 사용하여 조직학 상자에서 표본을 꺼냅니다. 프렙의 앞면이 어디에 있는지 확인하세요. (앞면에 커버글래스가 있습니다.) 약물을 빛에 대고 들어보세요. 물체의 위치를 결정합니다. 물체 자체가 스테이지 구멍의 중앙에 오도록 현미경 스테이지에 시편을 위로 향하게 놓습니다.
8. 측면에서 보면 매크로메트릭 나사를 사용하여 저배율 렌즈를 표본으로부터 0.5cm 거리, 즉 초점 거리 아래로 낮춥니다.
9. 접안렌즈를 통해 보면서 매크로메트릭 나사를 자신 쪽으로 이동하고 물체의 선명한 이미지가 나타날 때까지 튜브를 부드럽게 들어 올립니다.
10. 정렬 나사 또는 손가락의 부드러운 움직임을 사용하여 관심 있는 개체 또는 개체의 일부를 시야 중앙으로 가져온 다음 준비 작업을 연구하고 앨범에 스케치하기 시작합니다.
11. 표본을 연구한 후 매크로메트릭 나사를 사용하여 "8x" 렌즈를 2~3cm 정도 올립니다. 표본을 스테이지에서 제거하고 조직학 상자에 넣습니다.
12. 작업이 끝나면 무대 위에 냅킨을 놓고 "8x" 렌즈를 무대에서 0.5cm 거리까지 내립니다. 현미경을 덮개로 덮고 보관 위치에 놓습니다. 현미경을 운반할 때는 한 손으로 현미경의 삼각대를 잡고 다른 손으로 거울을 아래에서 받쳐주어야 합니다.
고배율(40x 대물렌즈)의 현미경 작업 규칙.
1. 고배율 현미경으로 작업할 때는 먼저 "8x" 렌즈 작업에 대한 모든 규칙을 따라야 합니다(1~10번 항목 참조).
2. 저배율에서 물체를 찾은 후, 정렬 나사를 사용하여 관심 있는 부분을 시야 중앙으로 정확히 가져와야 합니다. (고배율로 이동할 경우 렌즈 전면 렌즈의 직경이 5만큼 감소합니다.) 번 발생하므로 센터링이 수행되지 않으면 물체가 시야 밖으로 나올 수 있습니다.
3. 매크로미터 나사를 사용하여 렌즈를 2 - 3cm 위로 들어올리고 리볼버를 사용하여 "8x" 렌즈를 "40x" 렌즈로 교체합니다.
4. 측면에서 보면 매크로메트릭 나사를 사용하여 "40x" 렌즈를 낮추어 렌즈와 시편 사이의 거리가 1mm가 되도록 합니다. 즉, 렌즈가 초점 거리 아래에 있게 됩니다.
5. 접안렌즈를 통해 관찰하면서 매크로메트릭 나사를 사용하여 물체의 이미지가 나타날 때까지 튜브를 부드럽게 들어 올립니다.
6. 초점 재조정은 마이크로미터 나사를 사용하여 수행되며, 이 나사는 0.5바퀴 이하로 앞뒤로 회전할 수 있습니다.
7. 약을 연구하십시오. 스케치.
8. 표본을 연구한 후 매크로메트릭 나사를 사용하여 "40x" 렌즈를 최대로 올립니다. 2~3cm 정도 테이블에서 검체를 꺼내 조직학 상자에 넣습니다. 리볼버를 돌려 "40x" 렌즈를 "8x" 렌즈로 교체하고 대물대 위에 냅킨을 놓습니다.
와 함께 매크로메트릭 나사를 사용하여 "8x" 렌즈를 0.5cm 거리로 낮추고 현미경을 덮개로 덮고 보관 위치에 놓습니다.
몰입형 렌즈(90x 렌즈)로 작업합니다.
"90x" 렌즈는 매우 작고 얇은 물체를 작업할 때 사용됩니다. 렌즈와 시편 사이의 공간은 특수 침지 오일로 채워져 있습니다. 오일은 유리의 굴절률에 근접한 굴절률을 갖고 있으므로 광선이 다른 매체를 통과할 때 굴절되거나 방향이 바뀌지 않고 렌즈에 들어갑니다. 몰입형 렌즈는 전면 렌즈의 크기가 작기 때문에 취급 시 주의가 필요합니다.
초점 거리와 거칠게 취급하면 렌즈와 표본이 모두 손상될 수 있습니다.
1. 90x 렌즈로 작업을 시작하기 전에 56x와 280x에서 피사체를 찾아야 합니다. 정렬 나사를 사용하여 관심 물체의 일부를 시야 중앙으로 정확하게 가져오십시오. 배율과 전면 렌즈 직경 사이의 역관계를 기억할 필요가 있습니다.
2. 매크로메트릭 나사를 사용하여 "40x" 렌즈를 2만큼 올립니다.–3 cm 유리막대로 검사할 부분에 침지 오일 한 방울을 바르십시오. 방울은 너무 크거나 작아서는 안됩니다. 리볼버를 사용하여 "40x" 렌즈를 "90x" 렌즈로 교체합니다.
3. 측면에서 볼 때 매크로메트릭 나사를 사용하여 "90x" 렌즈를 거의 커버 유리와 접촉할 때까지, 즉 초점 거리 아래에 닿을 때까지 오일 한 방울로 낮춥니다.
4. 접안렌즈를 통해 보면서 매크로메트릭 나사를 사용하여 이미지가 나타날 때까지 "90x" 렌즈를 부드럽게 들어 올립니다.
5. 마이크로미터 나사를 사용하여 물체의 선명한 이미지를 얻습니다. 연구를 시작하고 (필요한 경우) 앨범에 스케치하십시오.
6. 약물 연구를 완료한 후 매크로메트릭 나사를 사용하여 "90x" 렌즈를 최대로 올립니다.테이블 위 2-3cm. 준비물을 제거하고 여과지로 기름을 닦아낸 후 냅킨으로 닦아냅니다. 표본을 조직학 상자에 넣습니다. 또한 필터 종이 조각으로 "90x" 렌즈를 닦은 다음 냅킨으로 닦습니다. 오염이 심한 경우 오일이 마르면 휘발유를 묻힌 천으로 렌즈를 닦아내는 것이 좋습니다.
7. 리볼버를 사용하여 "90x" 렌즈를 "8x" 렌즈로 교체합니다. 표본 테이블 위에 냅킨을 놓습니다. 매크로메트릭 나사를 사용하여 "8x" 렌즈를 스테이지에서 0.5cm 거리까지 낮춥니다. 현미경을 덮개로 덮고 영구 보관 장소에 보관하십시오.
작성자: Logishinets I.A 부교수
문학:
1. Bekish O.-Ya.L., Nikulin Yu.T. 생물학 워크숍 (약학부 1학년 학생 대상) - Vitebsk, 1997. - 90 p.
2. http://wikipedia.ru