Persenyawaan in vitro. Bagaimanakah cara inseminasi buatan berlaku? Kaedah inseminasi buatan. Persenyawaan in vitro

  • 6. Peralatan untuk inseminasi buatan lembu
  • 7. Organisasi kerja titik inseminasi buatan. Mengenal pasti lembu dalam keadaan panas
  • 8. Kelebihan inseminasi buatan haiwan
  • 9. Menternak jantan pembiakan untuk kegunaan dalam permanian. Ciri-ciri pemakanan dan penyelenggaraan
  • 10. Faraj tiruan. Ciri-ciri reka bentuk faraj untuk lelaki dari spesies yang berbeza
  • 11. Pembinaan dan penyediaan untuk penggunaan faraj tiruan
  • 12. Ciri-ciri pengumpulan sperma daripada lelaki dari spesies yang berbeza
  • 13. Mengambil sperma dari lembu jantan
  • 14. Mengambil sperma dari kuda jantan, babi
  • 16. Kelenjar seks aksesori, kepentingannya
  • 17. Sperma, komposisi kimianya, sifatnya
  • 18. Sperma. Struktur sperma
  • 19. Sperma. Sifat-sifat sperma
  • 20. Penggumpalan sperma, punca dan pencegahannya
  • 21. Pernafasan dan glikolisis sperma
  • 24. Pencairan sperma. Penipis. Faedah pencairan sperma
  • 25. Jenis pelarut sperma, komposisi kimia dan sifatnya
  • 26. Pengawetan sperma. Sejarah ringkas dan kepentingan kaedah
  • 27. Pengawetan sperma. Teknik cryopreservation
  • 28. Pengaruh faktor paratip terhadap fungsi pembiakan wanita
  • 29. Pengaruh faktor genetik terhadap fungsi pembiakan wanita
  • 30. Rangsangan fungsi seksual pada wanita
  • 31. Penyegerakan fungsi seksual wanita
  • 32. Persenyawaan telur di luar badan haiwan (in vitro)
  • 34. Persenyawaan telur di luar badan haiwan (in vitro). Kapasiti sperma
  • 36. Kaedah pembuahan lembu secara manoservikal. Kelebihan dan kekurangan
  • 37. Kaedah pembiakan vizoservikal lembu. Kelebihan dan kekurangan
  • 39. Spermatogenesis
  • 40. Inseminasi buatan biri-biri dan kambing
  • 41. Inseminasi buatan babi
  • 42. Bioteknologi sperma asli. Penilaian spermatozoa berdasarkan ciri morfologi
  • 43. Kaedah membekukan sperma dan menyimpannya dalam cecair nitrogen
  • 44. Inseminasi buatan burung
  • 45. Peralatan makmal untuk inseminasi buatan lebah. Mengambil sperma dari dron. Inseminasi rahim
  • 47. Oogenesis.
  • 48. Kaedah pembiakan rektoserviks lembu. Kelebihan dan kekurangan
  • 49. Inseminasi buatan rusa betina (yang matang)
  • 50. Mencairkan dan menilai kualiti sperma yang dicairkan
  • 51. Inseminasi semulajadi dalam lebah
  • 52. Inseminasi buatan ratu lebah
  • 53. Penilaian visual dan mikroskopik sperma. Metodologi penyelidikan
  • 54. Kesan suhu tinggi dan rendah, iodin pada sperma
  • 55. Jenis bentuk patologi sperma. Nisbah bentuk normal dan patologi
  • 56. Inseminasi buatan kuda betina
  • 57. Penilaian kepekatan dan aktiviti sperma (motilitas)
  • 58. Kesan tekanan osmotik pada spermatozoa (larutan hipotonik dan hipertonik). Metodologi penyelidikan
  • 59. Penganjuran inseminasi buatan
  • 32. Persenyawaan telur di luar badan haiwan (in vitro)

    Nilai positif - walaupun hasil oosit rendah, dengan setiap pengambilan haiwan itu boleh digunakan semula.

    33. Ciri-ciri persenyawaan in vitro telur pada wanita jenis yang berbeza pertanian haiwan

    Pembangunan sistem pembajaan dan sokongan peringkat awal Perkembangan embrio mamalia di luar badan haiwan (in vitro) adalah sangat penting dalam menyelesaikan beberapa masalah saintifik dan isu praktikal yang bertujuan untuk meningkatkan kecekapan pembiakan haiwan.

    Untuk tujuan ini, embrio diperlukan pada peringkat awal perkembangan, yang hanya boleh diekstrak melalui pembedahan daripada oviduk, yang memerlukan tenaga kerja dan tidak menyediakan bilangan embrio yang mencukupi untuk menjalankan kerja ini.

    Persenyawaan telur mamalia secara in vitro merangkumi peringkat utama berikut: pematangan oosit, kapasiti sperma, persenyawaan dan penyediaan peringkat awal perkembangan.

    Pematangan oosit secara in vitro. Sebilangan besar sel kuman dalam ovari mamalia, khususnya dalam besar lembu, biri-biri dan babi dengan potensi genetik yang tinggi, mewakili sumber potensi besar keupayaan pembiakan haiwan ini dalam mempercepatkan kemajuan genetik berbanding menggunakan keupayaan ovulasi biasa. Dalam spesies haiwan ini, seperti dalam mamalia lain, bilangan oosit yang berovulasi secara spontan semasa estrus hanyalah sebahagian kecil daripada beribu-ribu oosit yang terdapat dalam ovari semasa lahir. Baki oosit menjana semula di dalam ovari atau, seperti yang biasa mereka katakan, mengalami atresia. Sememangnya, persoalan timbul sama ada mungkin untuk mengasingkan oosit dari ovari melalui pemprosesan yang sesuai dan menjalankan persenyawaan selanjutnya di luar badan haiwan itu. Pada masa ini, kaedah untuk menggunakan keseluruhan bekalan oosit dalam ovari haiwan belum dibangunkan, tetapi sejumlah besar oosit boleh diperolehi daripada folikel rongga untuk pematangan dan persenyawaan selanjutnya di luar badan.

    Pada masa ini, pematangan in vitro hanya oosit lembu telah menemui aplikasi praktikal. Oosit diperolehi daripada ovari lembu selepas penyembelihan haiwan dan melalui pengekstrakan intravital, 1-2 kali seminggu. Dalam kes pertama, ovari diambil dari haiwan selepas penyembelihan dan dihantar ke makmal dalam bekas termostat selama 1.5-2.0 jam Di makmal, ovari dibasuh dua kali dengan penimbal fosfat segar. Oosit dikeluarkan dari folikel, yang berdiameter 2-6 mm, dengan menyedut atau memotong ovari ke dalam plat. Oosit dikumpul dalam medium TCM 199 dengan penambahan 10% serum darah daripada lembu dalam haba, kemudian dibasuh dua kali dan hanya oosit dengan kumulus padat dan sitoplasma homogen dipilih untuk pematangan selanjutnya secara in vitro.

    Baru-baru ini, kaedah telah dibangunkan untuk pengekstrakan intravital oosit dari ovari lembu menggunakan alat ultrasound atau laparoskop. Dalam kes ini, oosit disedut dari folikel dengan diameter sekurang-kurangnya 2 mm, 1-2 kali seminggu dari haiwan yang sama. Secara purata, 5-6 oosit setiap haiwan diperolehi sekali. Kurang daripada 50% oosit sesuai untuk pematangan in vitro.

    Nilai positif - walaupun hasil oosit rendah, dengan setiap pengambilan haiwan itu boleh digunakan semula.

    Kapasiti sperma. Peringkat penting dalam pembangunan kaedah persenyawaan dalam mamalia adalah penemuan fenomena kapasiti sperma. Pada tahun 1951 M.K. Chang dan pada masa yang sama G.R. Austin mendapati bahawa persenyawaan dalam mamalia berlaku hanya jika sperma terdapat dalam oviduk haiwan selama beberapa jam sebelum ovulasi. Berdasarkan pemerhatian terhadap penembusan sperma ke dalam telur tikus pada pelbagai masa selepas mengawan, Austin memperkenalkan istilah kapasiti. Ini bermakna bahawa beberapa perubahan fisiologi mesti berlaku pada sperma sebelum sperma memperoleh keupayaan untuk menyuburkan.

    Walau bagaimanapun, kaedah pemuatan sperma menggunakan heparin telah mendapat pengiktirafan yang paling tinggi (J. Parrish et al., 1985). Pielets dengan air mani lembu jantan beku dicairkan dalam mandi air pada suhu 39°C selama 30-40 s. Kira-kira 250 µl benih yang dicairkan dilapisi di bawah 1 ml medium pemuatan. Medium pemuatan terdiri daripada medium Tiroid yang diubah suai, tanpa ion kalsium. Selepas pengeraman selama satu jam lapisan atas medium dengan isipadu 0.5-0.8 ml, mengandungi majoriti sperma motil, dikeluarkan dari tiub dan dibasuh dua kali dengan sentrifugasi pada 500 g selama 7-10 minit. Selepas 15 minit pengeraman dengan heparin (200 µg/ml), penggantungan dicairkan kepada kepekatan 50 juta sperma per ml.

    Persenyawaan in vitro dan memastikan peringkat awal perkembangan embrio. Persenyawaan telur dalam mamalia berlaku di saluran oviduk. Ini menyukarkan seseorang penyelidik untuk mengakses kajian keadaan persekitaran di mana proses persenyawaan berlaku. Oleh itu, sistem persenyawaan in vitro akan menjadi alat analisis yang berharga untuk mengkaji faktor biokimia dan fisiologi yang terlibat dalam proses penyatuan gamet yang berjaya.

    Skim berikut digunakan untuk persenyawaan in vitro dan penanaman embrio lembu awal. Persenyawaan in vitro dijalankan dalam titisan medium Tiroid yang diubah suai. Selepas pematangan in vitro, oosit dibersihkan sebahagian daripada sel kumulus yang mengembang di sekeliling dan dipindahkan ke dalam titisan mikro lima oosit setiap satu. Suspensi sperma sebanyak 2-5 µl ditambahkan pada medium oosit untuk mencapai kepekatan titisan sperma 1-1.5 juta/ml. 44-48 jam selepas inseminasi, kehadiran pemecahan oosit ditentukan. Embrio kemudiannya diletakkan pada satu lapisan sel epitelium untuk perkembangan selanjutnya dalam masa 5 hari.

    Persenyawaan in vitro (dari lat. tambahan- luar, luar dan lat. korpus- badan, iaitu persenyawaan di luar badan, abbr. IVF ialah teknologi perubatan yang digunakan untuk merawat kemandulan. Sinonim: "persenyawaan in vitro", "persenyawaan in vitro", "persenyataan buatan".

    Kaedah (IVF) pertama kali digunakan dalam amalan perubatan pada tahun 1978. Intipati prosedur adalah untuk mendapatkan telur matang dari ovari wanita, menyuburkannya dengan sperma suaminya (penderma), membesarkan embrio yang terhasil dalam persekitaran khas di luar badan wanita (inkubator) dan memindahkan embrio ke rahim. Kanak-kanak yang dilahirkan terima kasih kepada penggunaan kaedah ini sering dipanggil "tiub ujian" kanak-kanak dalam kehidupan seharian, kerana peringkat perkembangan telur dan embrio, yang biasanya berlaku di dalam tiub dalam 2-3 hari pertama selepas persenyawaan, dengan IVF berlaku dalam keadaan buatan- “in vitro.”

    Kaedah IVF merujuk kepada kaedah teknologi pembiakan dibantu (ART), yang digunakan dalam kes-kes di mana rawatan kemandulan dijalankan menggunakan cara "baris pertama" (induksi ovulasi, inseminasi intrauterin, rawatan pembedahan) tidak membawa hasil.

    Kontraindikasi untuk IVF adalah keadaan wanita di mana kehamilan dan melahirkan anak mengancam kesihatan ibu atau anak, iaitu:

    • somatik dan penyakit mental, yang merupakan kontraindikasi untuk kehamilan dan bersalin;
    • kecacatan kongenital atau ubah bentuk yang diperolehi rongga rahim, di mana implantasi embrio atau kehamilan adalah mustahil;
    • tumor ovari;
    • tumor jinak rahim yang memerlukan rawatan pembedahan;
    • pedas penyakit radang sebarang penyetempatan;
    • neoplasma malignan di mana-mana lokasi, termasuk sejarah.

    Tiada kontraindikasi untuk IVF di pihak lelaki.

    Keperluan utama untuk IVF di Singapura adalah seperti berikut:

    • pasangan itu mesti berkahwin secara sah;
    • Umur wanita tidak boleh melebihi 45 tahun.

    Peringkat program IVF

    Teknologi IVF dijalankan secara khusus institusi perubatan dalam keadaan rawatan pesakit luar. Untuk menjalankan prosedur persenyawaan in vitro, perlu mendapatkan telur, mendapatkan sperma, melakukan persenyawaan in vitro, membesarkan embrio, dan memasukkan embrio ke dalam rongga rahim wanita.

    Matlamat rawatan IVF adalah untuk mendapatkan bilangan yang besar telur untuk persenyawaan in vitro (persenyawaan di luar badan wanita, dalam keadaan buatan) dengan sperma suaminya (atau penderma) dan pemindahan embrio yang diperoleh dengan cara ini ke dalam rongga rahim wanita. Kitaran rawatan IVF berlangsung 15-30 hari (bergantung kepada jenis protokol) dan terdiri daripada 4 peringkat berturut-turut:

    Menerima telur

    Sebagai peraturan, untuk persenyawaan in vitro, mereka cuba mendapatkan beberapa telur, kerana ini meningkatkan keberkesanan rawatan kemandulan dengan kaedah ini. Memandangkan adalah perkara biasa bagi seorang wanita untuk memilikinya kitaran haid Sekiranya satu telur matang, maka untuk mendapatkan beberapa telur, prosedur yang dipanggil "stimulasi superovulasi" dilakukan. Untuk tujuan ini, pesakit ditetapkan suntikan hormon
    dadah. Untuk rangsangan, suntikan hormon perangsang folikel (FSH), hormon luteinizing (LH), gonadotropin korionik manusia(CG), serta penyekat hormon pelepas gonadotropin (GnRH). Gabungan jenis dan jumlah ubat hormon yang diberikan dipanggil "rejimen rangsangan." Terdapat beberapa skim untuk merangsang superovulasi, tetapi jumlah akhir, jenis dan tempoh pentadbiran dadah dipilih secara individu untuk setiap wanita. Bergantung pada skema, rangsangan superovulasi mengambil masa dari 7 hingga 50 hari dan memerlukan pentadbiran subkutan ubat-ubatan (suntikan harian atau kapsul subkutan).

    Kematangan oosit tidak dapat ditentukan secara langsung kaedah bukan invasif. Oleh itu, kematangan telur dinilai secara tidak langsung oleh pertumbuhan folikel ovari. Pertumbuhan folikel diperhatikan menggunakan peranti pemeriksaan ultrasound. Apabila folikel dominan mencapai saiz tertentu (16-20 mm), prosedur pengambilan telur ditetapkan - tusukan folikel ovari. Tusukan folikel dilakukan di bawah anestesia umum (lebih kerap) atau tempatan (kurang kerap), jarum disalurkan secara transvaginal, perjalanan jarum dipantau dengan mesin ultrasound. Tujuan tusukan adalah aspirasi (sedutan) kandungan folikel (cecair folikel). Cecair yang terhasil diperiksa menggunakan mikroskop untuk mengesan telur. Telur yang dikesan dicuci dari cecair folikel dan dipindahkan ke bekas makmal dengan medium kultur. Hidangan yang mengandungi telur diletakkan di dalam inkubator, di mana ia disimpan sehingga persenyawaan.

    Biasanya, penggunaan ubat hormon dan tusukan folikel tidak menyebabkan tindak balas negatif pesakit, tetapi kadangkala komplikasi mungkin berlaku. Komplikasi rangsangan superovulasi ialah sindrom hiperstimulasi ovari (OHSS), yang boleh berkembang beberapa hari selepas tamat rangsangan. OHSS berlaku apabila sejumlah besar folikel matang, yang, berubah menjadi badan kuning, merembeskan bilangan yang besar estrogen. Pada kursus yang teruk OHSS mungkin memerlukan kemasukan pesakit ke hospital. Komplikasi tusukan folikel mungkin hematoma ovari.

    Menerima sperma

    Pesakit memperoleh sperma secara bebas melalui onani. Anda boleh menggunakan hubungan seksual yang terganggu atau kondom perubatan tanpa pelincir. Jika mustahil untuk mendapatkan sperma melalui ejakulasi, gunakan kaedah pembedahan: aspirasi kandungan epididimis, biopsi testis, dll. Sperma diperoleh pada hari tusukan folikel pasangan. Sekiranya mustahil untuk mendapatkan sperma pada hari tusukan, maka gunakan pengumpulan sperma awal diikuti dengan pembekuan dan penyimpanan dalam nitrogen cecair(cryopreservation). Sebelum persenyawaan telur, sperma dipisahkan daripada cecair mani. Untuk melakukan ini, sperma berulang kali disentrifugasi dalam medium kultur.

    Persenyawaan in vitro

    IVF terus dijalankan oleh pakar embriologi di makmal embriologi. Persenyawaan itu sendiri dijalankan dalam salah satu daripada dua cara: 1) in vitro insemination; 2) suntikan sperma intracytoplasmic (ICSI, ICSI). Pada mulanya, lebih dengan cara yang mudah kepada telur yang ada medium nutrien, tambahkan penggantungan sperma. Spermatozoa ditambah pada kadar 100-200 ribu setiap telur. Dalam masa 2-3 jam, salah satu sperma menembusi telur dan dengan itu menyuburkannya. Dalam kaedah kedua (ICSI), sperma dimasukkan ke dalam telur "secara manual" menggunakan instrumen microsurgical. ICSI digunakan untuk sangat kualiti kurang baik sperma apabila persenyawaan tidak boleh diperolehi walaupun dalam cawan. Sebaik sahaja sperma menembusi, telur dianggap sebagai embrio. Kebarangkalian persenyawaan yang berjaya ialah 60-70%. Embrio disimpan dalam keadaan buatan selama 2 hingga 5 hari.

    Pemindahan embrio ke rahim

    Embrio dipindahkan ke rahim 2-5 hari selepas persenyawaan telur. Prosedur ini tidak memerlukan anestesia (pelepasan sakit) dan dilakukan pada kerusi ginekologi dalam masa beberapa minit. Embrio dipindahkan ke rahim dengan melepasi kateter elastik khas melalui serviks. Amalan semasa IVF adalah sedemikian yang biasanya 2 embrio dipindahkan.

    Langkah tambahan semasa memupuk embrio

    Semasa penanaman embrio adalah mungkin untuk menjalankan tambahan aktiviti makmal. Embrio cryopreservation—embrio yang berdaya maju dibekukan dan disimpan pada suhu nitrogen cecair. Embrio kemudiannya boleh dicairkan dan dipindahkan semula ke dalam rahim untuk mencapai kehamilan. praimplantasi diagnostik genetik(PGD) - kajian tentang kehadiran beberapa kromosom atau beberapa patologi genetik dalam embrio sebelum implantasi. Ia juga mungkin untuk menentukan jantina embrio menggunakan kaedah ini.

    Kehamilan dengan IVF berlaku dalam 30-40% kes. Oleh itu, prosedur itu sendiri dipanggil percubaan. Terdapat beberapa faktor yang menyebabkan kegagalan program IVF:

    • apabila ovulasi dirangsang, tiada pertumbuhan telur;
    • ovulasi pramatang;
    • kemustahilan untuk mendapatkan telur semasa tusukan;
    • kualiti rendah telur yang diterima;
    • kekurangan persenyawaan disebabkan oleh patologi sperma dan/atau kualiti telur yang lemah;
    • keupayaan beberapa sperma untuk menembusi telur;
    • kekurangan pembahagian sel embrio atau pembentukan embrio yang tidak berkualiti;
    • masalah implantasi (pelekatan) embrio dalam rongga rahim.

    Daripada 20 kehamilan yang berlaku, purata 18 berakhir dengan kelahiran Selepas embrio diperkenalkan, tahap hormon dalam darah mesti dipantau setiap 3 hari sekali. Selepas 12 hari, ujian kehamilan dilakukan. Dalam kes kehamilan berganda Atas permintaan wanita, pengurangan dilakukan - penyingkiran embrio yang tidak perlu.

    Bersalin semasa mengandung selepas IVF tidak berbeza dengan normal. Dalam kes di mana punca ketidaksuburan adalah penyakit wanita, bersalin dijalankan dengan mengambil kira penyakit tertentu dan ini tidak lagi mempunyai kaitan dengan kaedah persenyawaan.

    Menurut doktor, kanak-kanak yang dikandung dalam tabung uji tidak berbeza dengan orang lain. Walau bagaimanapun, terdapat pendapat bahawa kanak-kanak seperti itu belajar dengan lebih baik, tetapi lebih kerap jatuh sakit. Doktor percaya bahawa ini mungkin disebabkan oleh penjagaan kanak-kanak yang diingini yang berlebihan.

    IVF terus dijalankan oleh pakar embriologi di makmal embriologi. Pembajaan itu sendiri dilakukan dalam salah satu daripada dua cara:

    1) inseminasi in vitro;

    2) suntikan sperma intracytoplasmic (ICSI, ICSI).

    Dalam kaedah pertama yang lebih mudah, penggantungan sperma ditambah kepada telur yang berada dalam medium nutrien. Spermatozoa ditambah pada kadar 100-200 ribu setiap telur. Dalam masa 2-3 jam, salah satu sperma menembusi telur dan dengan itu menyuburkannya. Dalam kaedah kedua (ICSI), sperma dimasukkan ke dalam telur "secara manual" menggunakan instrumen microsurgical. ICSI digunakan apabila kualiti sperma sangat lemah, apabila persenyawaan tidak dapat diperolehi walaupun dalam hidangan.

    Sebaik sahaja sperma menembusi, telur dianggap sebagai embrio. Kebarangkalian persenyawaan yang berjaya ialah 60-70%. Embrio disimpan dalam keadaan buatan selama 2 hingga 6 hari. Untuk tujuan ini, inkubator yang dipanggil CO 2 digunakan - kabinet di mana suhu dikekalkan pada 37°C dan kandungan CO 2 di atmosfera ialah 5-6%. Embrio (dan sebelum itu telur) dalam inkubator terus disimpan dalam pinggan plastik (hidangan Petri, hidangan Nunk, pinggan, dll.) dengan medium kultur. Medium kultur untuk embrio termasuk ion fisiologi utama (Na +, K +, Ca 2+, Mg 2+, Cl-, CO 3-, dll.), Substrat tenaga (glukosa, piruvat, laktat), asid amino, selalunya vitamin dan protein serum. Semasa pengeraman, embrio manusia secara praktikal tidak meningkat dalam saiz (4 hari pertama saiznya ialah 0.1 mm, pada hari ke-5 adalah 0.15-0.2 mm), tetapi bilangan sel yang membentuknya meningkat berkali-kali (1 hari). - 1 sel; 2 hari - 4 sel; 3 hari - 8 sel; Embrio dipindahkan ke rahim 2-5 hari selepas persenyawaan telur. Prosedur ini tidak memerlukan anestesia (pelepasan sakit) dan dilakukan di atas kerusi ginekologi dalam masa beberapa minit. Embrio dipindahkan ke rahim dengan melepasi kateter elastik khas melalui serviks. Menurut Perintah No. 67 Kementerian Kesihatan Persekutuan Rusia, tidak disyorkan untuk memindahkan lebih daripada 4 embrio ke dalam rongga rahim untuk mengelakkan kehamilan berganda. Amalan IVF moden di Rusia adalah sedemikian rupa sehingga 2 embrio biasanya dipindahkan. Sekiranya mustahil untuk melahirkan janin, pesakit boleh menggunakan ibu tumpang.

    Kesimpulan

    Hari ini, klinik membekukan (cryopreserve) sel kuman manusia (sperma, oosit), dan embrio untuk pelbagai peringkat perkembangan yang diperolehi hasil daripada program IVF. Baki embrio selepas pemindahan dalam kitaran "segar" (iaitu, dirangsang) dibekukan sahaja kualiti yang baik, kerana seterusnya mereka akan selamat bertahan daripada penyahbekuan.

    Pembekuan sperma digunakan dalam kes berikut: penyakit kanser pada lelaki untuk memastikan rizab sperma sebelum kemoterapi dan penggunaan seterusnya sampel beku untuk mendapatkan zuriat yang sihat, ketidakpastian mempunyai pasangan semasa pengumpulan sperma untuk IVF - situasi yang biasa untuk pesakit luar bandar, derma, dan dalam kes paterniti tertunda yang dirancang. Mungkin, disebabkan penurunan ketara dalam kesuburan lelaki, menyimpan sperma daripada lelaki muda untuk kegunaan masa depan akan dipopularkan.

    Pembekuan telur digunakan dalam kes di mana rangsangan tidak disyorkan atau kontraindikasi (contohnya, kanser dan penyakit lain) atau adalah mustahil untuk menyuburkan sel dalam tempoh ini. oosit matang ( sangkar betina) sangat rapuh disebabkan oleh saiz besar, kandungan cecair dan susunan kromosom serta mudah rosak semasa prosedur pembekuan/pencairan. Kekerapan kelahiran selepas persenyawaan dan inseminasi oosit beku-cair adalah 3-4%. Dengan bantuan cryopreservation, masalah konsepsi dan ketidaksuburan diselesaikan. Selain merawat pelbagai bentuk lelaki dan perempuan ketidaksuburan wanita ART juga digunakan untuk menyelesaikan masalah biologi asas dan perubatan. Menggunakan embrio yang tidak diminta untuk implantasi, mereka mengkaji mekanisme persenyawaan dan perkembangan embrio, peraturan genetik embriogenesis, dan kemungkinan diagnostik praimplantasi penyakit keturunan dan masalah lain. Pesakit memperoleh sperma secara bebas melalui onani. Anda boleh menggunakan hubungan seksual yang terganggu atau kondom perubatan tanpa pelincir. Sekiranya mustahil untuk mendapatkan sperma melalui ejakulasi, kaedah pembedahan digunakan: aspirasi kandungan epididimis, biopsi testis, dll. Sperma diperoleh pada hari tusukan folikel pasangan. Sekiranya mustahil untuk mendapatkan sperma pada hari tusukan, maka pengumpulan sperma awal digunakan, diikuti dengan pembekuan dan penyimpanan dalam nitrogen cecair. Sebelum persenyawaan telur, sperma dibasuh dari cecair mani dan digunakan kaedah khas menyerlahkan yang berkualiti tinggi.

    Sekiranya mustahil untuk menggunakan sperma suami atau jika pesakit tidak mempunyai pasangan seksual, boleh menggunakan sperma penderma. Penggunaan sperma penderma adalah tertakluk kepada persetujuan bertulis mandatori pasangan dan dikawal oleh Perintah N107N Kementerian Kesihatan Persekutuan Rusia. Mengikut perintah ini, sperma penderma digunakan selepas kuarantin 6 bulan, i.e. selepas 6 bulan penyimpanan beku dan pemeriksaan semula penderma, mengesahkan ketiadaan penyakit berjangkit.

    Inseminasi buatan adalah peluang sebenar pasangan yang tidak subur untuk mencapai kebahagiaan ibu bapa atau prosedur yang tidak wajar, peluang untuk berjaya adalah kecil?

    Keibuan adalah kebahagiaan dan kegembiraan terbesar bagi seorang wanita, panggilannya dan keadaan yang paling semula jadi. Apabila, atas sebab tertentu, seorang wanita tidak boleh menjadi seorang ibu, maka inseminasi buatan datang untuk menyelamatkan. Apakah itu, apakah kaedah inseminasi buatan yang wujud, apakah ciri-ciri prosedur, serta isu-isu lain yang membimbangkan wanita akan dibincangkan dalam artikel ini.

    Kepentingan inseminasi buatan

    Inseminasi buatan ialah kaedah moden menyelesaikan masalah kemandulan, apabila mengandung anak tidak boleh berlaku secara semula jadi. Prosedur inseminasi buatan boleh dilakukan atas beberapa sebab, di mana kedua-dua satu atau kedua-dua pasangan tidak subur.

    Petunjuk utama untuk inseminasi buatan ialah:

    • sindrom ovari polikistik
    • endometriosis
    • kualiti rendah sperma pasangan, yang boleh menampakkan dirinya dalam motilitas sperma yang rendah, kepekatan rendah dan sejumlah besar unit patologi
    • ketidaksuburan hormon
    • ketidaksuburan tiub
    • ketidaksuburan, punca-puncanya tidak ditubuhkan


    Berkat kemajuan dalam bidang perubatan, ratusan ribu pasangan yang tidak subur akhirnya dapat mengalami kegembiraan keibuan dan keibubapaan, kerana inseminasi buatan memungkinkan untuk mempunyai anak dengan bentuk ketidaksuburan yang pada masa lalu menghentikan fungsi pembiakan.

    Video: Konsep in vitro

    Kaedah inseminasi buatan

    Apabila bercakap tentang permanian inseminasi, ramai orang berfikir tentang prosedur IVF yang biasa dan popular. Malah, terdapat beberapa kaedah untuk menyelesaikan masalah kemandulan secara buatan:

    • ISM adalah kaedah di mana sperma suaminya dipindahkan ke dalam rahim wanita. Teknik ini terpakai dalam kes di mana fungsi pembiakan wanita tidak cacat dan dia tidak boleh menjadi seorang ibu atas sebab tertentu kualiti rendah sperma suami atau apabila lendir dalam faraj wanita adalah persekitaran yang agresif untuk kewujudan sperma dan mereka mati sebelum sampai ke telur.


    • ISD - jika sperma suami tidak sesuai untuk pembuahan atau dia benar-benar tidak subur, maka pasangan ditawarkan kaedah inseminasi buatan dengan sperma penderma. Prosedur itu sendiri untuk kaedah ini praktikalnya tidak berbeza dari yang sebelumnya: wanita itu juga disuntik dengan sperma ke dalam rahim, tetapi penderma sperma bukan suaminya


    • HADIAH - apabila punca ketidaksuburan terletak pada fakta bahawa telur wanita tidak keluar ke tiub fallopio untuk persenyawaan, maka kaedah pemindahan gamet intratubal adalah berkesan. Ia terdiri daripada memindahkan ke dalam tiub fallopio telur yang sebelum ini diambil dari seorang wanita, yang disambungkan secara buatan dengan sperma lelaki. Sel pembiakan lelaki boleh menjadi milik kedua-dua pasangan dan penderma


    • ZIFT adalah kaedah di mana telur yang disenyawakan dimasukkan ke dalam rahim yang disediakan oleh hormon. Pertama, telur yang sihat yang sesuai untuk pembuahan diambil daripada wanita melalui tusukan ovari dan disenyawakan secara luaran. badan perempuan spermatozoa. Embrio kemudiannya dimasukkan melalui serviks


    • ICSI - kaedah yang berkesan inseminasi buatan, yang melibatkan persenyawaan telur dengan sperma menggunakan jarum yang sangat nipis. Melalui tusukan pada buah zakar, sperma yang paling aktif dikeluarkan dan ditanam ke dalam telur


    • IVF adalah jenis persenyawaan tiruan yang paling biasa bagi telur di luar badan wanita, selepas itu embrio ditanamkan ke dalam rahim.


    Kaedah persenyawaan IVF

    Persenyawaan in vitro - moden teknologi pembiakan, yang paling kerap digunakan bukan sahaja di negara kita, tetapi di seluruh dunia. Apakah yang menjelaskan populariti kaedah tersebut? Pertama, teknik ini memberikan yang paling banyak keputusan yang baik; kedua, dengan bantuan IVF anda boleh mencapai kehamilan walaupun dalam sangat kes yang sukar ketidaksuburan apabila kedua-dua pasangan mempunyai masalah yang serius fungsi pembiakan.


    Prosedur inseminasi buatan

    IVF memerlukan beberapa telur. Tetapi kerana hanya satu telur boleh dibentuk dalam badan wanita semasa satu kitaran, jumlah pengeluaran telur dirangsang oleh hormon.

    Apabila ultrasound menentukan bahawa ovari membesar dan telur telah terbentuk di dalamnya, ia dikeluarkan. Selepas ini, oosit dibasuh dari cecair folikel dan diletakkan di dalam inkubator, di mana telur disimpan sehingga inseminasi buatan.

    Sekiranya tidak mungkin untuk mendapatkan telur daripada seorang wanita, maka telur penderma digunakan.


    Pada hari yang sama, sperma dikumpulkan, yang diperoleh dengan melancap atau hubungan seksual yang terganggu. Spermatozoa diasingkan daripada sperma yang terhasil dan yang paling aktif dipilih. Selepas ini, bilangan sperma aktif yang diperlukan ditambah ke dalam tabung uji dengan telur, pada kadar 100-200 ribu setiap telur. Ia juga mungkin menggunakan sperma penderma.


    Dalam masa 2-3 jam, sperma menyuburkan telur. Seterusnya, embrio yang terhasil diletakkan dalam persekitaran yang baik, di mana ia kekal selama 2 hingga 6 hari. Selama ini, mereka dimasukkan ke dalam tabung uji vitamin penting, ion fisiologi, substrat dan asid amino. Selepas ini, embrio dipindahkan terus ke dalam rahim, yang dijalankan dalam beberapa minit di atas kerusi ginekologi.

    Sekiranya seorang wanita tidak boleh hamil sendiri, maka mereka menggunakan ibu tumpang.

    Video: Persenyawaan in vitro. Komarovsky

    Persenyawaan in vitro kebaikan dan keburukan

    Walaupun IVF membuka kemungkinan mempunyai anak untuk orang yang mengalami kemandulan, prosedur ini juga boleh dilakukan akibat negatif, yang kadangkala menjadi menyedihkan:

    • ketidakseimbangan hormon
    • hiperstimulasi ovari
    • kecacatan janin
    • kehamilan berganda, di mana ia perlu untuk membunuh embrio "tambahan" untuk kelangsungan hidup sekurang-kurangnya satu atau dua


    Di samping itu, prosedur IVF adalah usaha yang mahal yang tidak semua orang mampu dan, kadang-kadang, pasangan tanpa anak mereka perlu melepaskan sebarang harapan untuk menjadi ibu bapa, kerana jumlah itu tidak mampu dimiliki oleh mereka.

    Sebaliknya, dalam masyarakat terdapat sikap prejudis terhadap prosedur inseminasi buatan - "kanak-kanak tabung uji" tersilap disalah anggap sebagai inferior dan lambat perkembangannya.


    Hari ini, prosedur IVF sedang diperbaiki dalam banyak cara. Teknologi baru digunakan, dos hormon yang tepat ditetapkan, yang memastikan proses yang diperlukan dan pada masa yang sama menyampaikan paling tidak mudarat tubuh seorang wanita.

    Ia juga penting bahawa adalah sangat jarang bahawa sejumlah besar embrio diletakkan ke dalam rongga rahim, biasanya hanya dua, yang menghalang keperluan untuk menghapuskan embrio tambahan. Dan kegembiraan keibuan itu sendiri melebihi segala-galanya risiko yang mungkin Dan akibat yang tidak diingini bahawa prosedur IVF boleh menyebabkan.

    Berapakah kos inseminasi buatan?

    Harga isu bergantung kepada kaedah permanian inseminasi. Ia mungkin berbeza dalam pelbagai klinik, tetapi secara purata senarai harga kelihatan seperti ini:

    • IGO dari 28 hingga 40 ribu rubel
    • IVF dari 40 hingga 100 ribu rubel
    • ICSI dari 100 hingga 150 ribu rubel


    Kaedah inseminasi buatan lain tidak biasa di Rusia kerana kecekapan yang lebih rendah.

    Inseminasi buatan wanita bujang

    Wanita yang tidak mempunyai pasangan untuk mengandung anak, tetapi sangat ingin mempunyai anak, akan mendapat manfaat daripada prosedur inseminasi buatan. Semasa prosedur ini, sperma penderma aktif diletakkan ke dalam rahim wanita, selepas itu telur disenyawakan.

    Sejurus sebelum prosedur, wanita itu menjalani peperiksaan dan ujian, dan, jika perlu, rangsangan hormon dilakukan.


    Inseminasi buatan di rumah

    Prosedur inseminasi buatan juga boleh dilakukan di rumah. Intipatinya terletak pada fakta bahawa dos sperma yang diperoleh semasa ejakulasi disuntik ke dalam rahim wanita menggunakan picagari dan kateter. Terima kasih kepada manipulasi ini, peluang persenyawaan meningkat dengan ketara, kerana semua sperma dihantar ke telur, sedangkan semasa persenyawaan semula jadi, sebahagian daripada benih dicurahkan dan dineutralkan oleh lendir faraj, tanpa memasuki rahim.


    Untuk melakukan inseminasi buatan di rumah, anda memerlukan steril:

    • picagari
    • kateter
    • spekulum ginekologi
    • pipet
    • pembasmi kuman
    • tampon
    • tuala
    • sarung tangan ginekologi


    Adalah penting untuk menjalankan prosedur semasa ovulasi, yang boleh ditentukan menggunakan ujian khas.

    Masalah inseminasi buatan

    Arahan terperinci tentang bagaimana inseminasi buatan dijalankan di rumah boleh diperolehi daripada pakar sakit puan, tetapi adalah penting untuk memahami bahawa pelaksanaan proses penting di rumah mungkin membawa risiko kemasukan ke dalam rongga rahim pelbagai jangkitan, disebabkan oleh kemungkinan ketidaksterilan peranti yang digunakan.

    Inseminasi buatan: ulasan

    Setelah menganalisis ulasan wanita yang memutuskan untuk menjalani inseminasi buatan, beberapa aspek utama prosedur boleh dikenal pasti:

    • kehamilan tidak selalu berlaku. Terdapat pasangan yang memutuskan untuk menjalani IVF lima atau enam kali berturut-turut, tetapi tidak pernah mencapai matlamat yang diinginkan.
    • Ramai wanita mandul mementingkan aspek moral, kerana masalah permanian bermanis masih menimbulkan perdebatan dalam pelbagai kalangan, terutamanya dari pihak gereja, yang menganggap kejadian seperti itu tidak wajar, dan mengutuk keluarga yang tidak mempunyai anak, kerana mereka mesti memikul salib mereka dan tidak melawan kehendak Tuhan.


    • inseminasi buatan adalah beban yang sangat besar pada tubuh wanita, baik dari segi moral dan fizikal
    • di sebalik masalah yang dihadapi oleh pasangan suami isteri yang masih membuat keputusan untuk menjalani inseminasi buatan, hasil positif dan kegembiraan mempunyai anak melebihi segala risiko dan titik negatif dan ramai yang dihentikan hanya oleh kos prosedur daripada mempunyai anak buatan semula

    Video: Jenis-jenis inseminasi buatan

    Inseminasi buatan

    Inseminasi buatan

    Inseminasi buatan adalah proses persenyawaan yang dilakukan dengan memasukkan sperma terus ke dalam rahim (inseminasi buatan) atau dengan kaedah in vitro (di luar badan, "in vitro"), i.e. secara extracorporeal (IVF).

    Jenis-jenis inseminasi buatan:

    1. inseminasi buatan dengan sperma suami atau penderma (AISM/AISD);
    2. persenyawaan in vitro(ECO).

    Bergantung pada tanda-tanda, program inseminasi buatan dipilih untuk wanita itu.

    1. Inseminasi intrauterin ialah pengenalan sperma yang disediakan khas menggunakan kateter khas terus ke dalam rongga rahim.

      Oleh itu, sperma tidak melalui halangan persekitaran berasid faraj dan lendir pelindung padat serviks, dan segera memasuki persekitaran neutral rongga rahim.

      Selepas ini, sperma bergerak secara bebas ke tiub fallopio dan persenyawaan telur berlaku dengan cara yang sama seperti semasa hubungan seksual semula jadi.

      Menurut literatur, inseminasi buatan wanita sebagai rawatan untuk kemandulan telah digunakan selama lebih dari 100 tahun. Prosedur ini dijalankan hanya dalam khusus klinik perubatan memandangkan itu peperiksaan penuh lelaki dan perempuan.

      Wajib memeriksa keadaan rahim dan tiub fallopio– histerosalpingografi ( Pemeriksaan X-ray menggunakan agen kontras) atau laparoskopi (pemeriksaan rahim menggunakan peranti optik– laparoskop) untuk memastikan patensi saluran pembiakan.

      Untuk permanian, kedua-dua sperma asli ("hidup") dan kriopeliharaan (sebelum ini dicairkan) boleh digunakan. Sperma dibersihkan dan dipekatkan sebelum pembuahan buatan.

      Inseminasi buatan disyorkan untuk wanita yang mempunyai kelikatan yang tinggi lendir serviks atau keasidan persekitaran faraj. Di pihak pasangan, mungkin terdapat tanda-tanda seperti disfungsi erektil, penurunan bilangan sperma yang bergerak, atau peningkatan kelikatan sperma dsb.

      Prosedur ini dijalankan di bilik operasi klinik, di atas kerusi ginekologi, dengan picagari khas dengan kateter, dengan bantuan sperma yang disuntik ke dalam rongga rahim. Selepas prosedur ini, anda perlu berbaring selama 15-20 minit. Prosedur ini tidak memerlukan pelepasan sakit.

    2. IVF - persenyawaan in vitro - adalah kaedah permanian inseminasi di mana sperma lelaki Dan telur betina(sebelum ini diekstrak daripada ovari) digabungkan di luar badan, secara in vitro (dalam "kaca", iaitu dalam tabung uji makmal).

      Di sana, persenyawaan spontan berlaku, dan embrio yang terhasil (1 atau 2) beberapa hari kemudian dipindahkan ke rahim wanita, di mana satu atau kedua-duanya ditanamkan ke dalam endometrium (membran mukus rongga rahim) dan berkembang selama 9 bulan.

      Untuk mendapatkan telur, rangsangan ovulasi dijalankan selama 2-3 minggu. ubat hormon. Selepas beberapa telur matang sekaligus, pakar reproduktif mengeluarkannya dari ovari (melakukan tusukan pada folikel) dan memindahkannya ke makmal embriologi.

      Inseminasi buatan menggunakan kaedah ICSI- Ini adalah salah satu jenis IVF. Dalam kes ini, pakar embriologi, menggunakan instrumen khas di bawah mikroskop yang sangat diperbesarkan, menyuntik sperma yang paling subur ke dalam telur.

      Embrio yang diperoleh selepas persenyawaan tersebut tidak berbeza dengan embrio yang dikandung secara semula jadi, dan juga, selepas beberapa hari, ia dipindahkan ke rahim wanita dan berkembang selama 9 bulan. Kaedah ini berjaya digunakan pada pesakit dengan faktor lelaki ketidaksuburan apabila terdapat penyimpangan daripada penunjuk biasa sperma atau selepas biopsi TESA untuk azoospermia.

    Program penderma untuk inseminasi buatan

    Jika salah seorang daripada pasangan tidak mempunyai sel pembiakan yang sihat, IVF juga boleh dijalankan dengan sperma penderma atau telur penderma. Sebelum menderma sel kumannya, penderma menjalani pemeriksaan perubatan dan genetik yang menyeluruh. Inseminasi buatan dengan sperma penderma dijalankan hanya selepas dua kali pemeriksaan dengan selang 3 bulan.

    Dalam pasangan di mana wanita itu dikontraindikasikan untuk melahirkan anak (contohnya, apabila penyakit yang serius jantung) atau secara fizikalnya mustahil (kerana ketiadaan rahim), IVF dengan ibu tumpang digunakan.

    Satu lagi kelebihan besar IVF ialah semasa penanaman embrio di makmal embriologi, adalah mungkin untuk menjalankan diagnostik genetik praimplantasi embrio. Kaedah ini membolehkan anda mengenal pasti (jika ada) penyakit genetik, keabnormalan kromosom, keabnormalan perkembangan (kecacatan). Tidak seperti kebanyakan klinik lain, VitroClinic melakukan PGD pada keseluruhan set kromosom manusia (iaitu, pada semua 46 kromosom). Selepas analisis ini, hanya embrio yang sihat akan dipindahkan ke dalam rahim.

    Sebelum sebarang program inseminasi buatan, pasangan itu menjalani pemeriksaan menyeluruh pemeriksaan perubatan untuk mengenal pasti kemungkinan kontraindikasi. Senarai pemeriksaan sedemikian dikawal oleh Perintah Kementerian Kesihatan dan dipatuhi dengan ketat di klinik kami.

    Di manakah saya boleh mendapatkan inseminasi buatan?

    Sebelum berunding dengan doktor tentang mengatasi ketidaksuburan, mana-mana pasangan suami isteri bertanya soalan: "Di manakah permanian beradas boleh dilakukan pada tahap profesional yang tinggi?"

    Sebelum memilih klinik sedemikian, patuhi cadangan berikut:

    • Klinik mesti berfungsi pakar sempit khusus untuk rawatan kemandulan: pakar sakit puan-reprodukologi, pakar urologi-andrologi, pakar embriologi dan pakar genetik.
    • Pusat inseminasi buatan mesti menggunakan hanya produk berkualiti tinggi dan asli dalam kerjanya. ubat-ubatan dan bahan habis pakai untuk IVF.
    • Profesional reproduktif sebenar bekerja dengan setiap pasangan secara individu, i.e. pemilihan kaedah, skim rangsangan dan sokongan tarikh awal kehamilan dipilih oleh pakar hanya selepas kajian menyeluruh tentang sejarah perubatan pasangan, pengalaman IVF yang lalu (jika ada), umur, status kesihatan di pada masa ini dan lain-lain lagi
    • Pakar kesuburan yang berpengalaman menggunakan rejimen lembut rangsangan hormon, menjaga kesihatan pesakit mereka dan mengelakkan hiperstimulasi.
    • Untuk mengecualikan kehamilan berganda, pakar reproduktif harus memindahkan hanya satu atau dua embrio (mengikut petunjuk). Tiga atau lebih tidak boleh diterima.
    • Pakar klinik yang anda pilih mesti memiliki semua teknik paling moden perubatan reproduktif: ICSI, PIXI, penetasan berbantu, diagnosis genetik embrio, dsb.
    • Ujian sperma harus dilakukan di makmal klinik sendiri oleh pakar embriologi yang menilai bukan sahaja morfologi sperma, tetapi juga kesuburan mereka.
    • Pilih klinik yang bekerjasama dengan makmal diagnostik klinikal yang diperakui oleh piawaian antarabangsa ISO. Kualiti analisis yang dilakukan adalah penting peranan penting sebagai persediaan untuk IVF.
    • Pastikan terlebih dahulu bahawa dari perundingan awal hingga akhir keseluruhan program IVF atau inseminasi buatan anda akan dijaga oleh pakar reproduktif yang sama (kecuali dalam situasi force majeure). Ini menunjukkan tanggungjawab dan tumpuan doktor dan klinik terhadap keputusan yang positif.
    • Beri keutamaan kepada klinik di mana doktor meninggalkan maklumat hubungan mereka untuk pesakit. Anda akan berpeluang untuk menelefon atau menulis kepada emel doktor anda jika anda memerlukan sebarang penjelasan atau mempunyai soalan.
    • Adalah baik jika klinik yang sama di mana anda akan melakukan IVF mempunyai peluang untuk tinggal untuk memantau kehamilan anda. Doktor, mengetahui semua nuansa kehamilan anda dan mempunyai kesinambungan di antara mereka sendiri, akan melakukan segala-galanya untuk membawanya ke penghujung - kelahiran anak yang sihat.
    • Harga di Moscow untuk program inseminasi buatan di klinik yang berbeza boleh berbeza dengan ketara. Pastikan anda menyemak dengan pengurus berapa banyak kos inseminasi buatan dan apa sebenarnya yang disertakan dalam setiap program yang anda minati, sama ada mungkin untuk menambah sebarang perkhidmatan tambahan, contohnya, ICSI atau penetasan, sama ada terdapat pilihan dengan sel penderma dan embrio. Julat yang luas pelbagai program adalah kelebihan besar untuk klinik. Ini bermakna di pusat permanian ini, doktor tahu semua teknik ART moden dan boleh memilih mana-mana program untuk setiap pasangan.

    Inseminasi buatan bukanlah kaedah merawat kemandulan, tetapi kaedah mengatasi kemandulan. Oleh itu, ia mengatasi halangan untuk mencapai kehamilan. Pada masa ini, inseminasi buatan digunakan untuk mengatasi hampir semua punca ketidaksuburan dan mengelakkan banyak masalah dengan konsepsi.