Kryteriami działania przeciwdrobnoustrojowego leku są minimalne stężenie hamujące(MIC) i minimalne stężenie bakteriobójcze(MBK). MIC to najniższe stężenie antybiotyków, które całkowicie hamuje in vitro widoczny wzrost bakterii. Wyraża się ją w mg/l lub μg/ml. MBC to najniższe stężenie antybiotyku wywołujące działanie bakteriobójcze. Aby to określić, należy zaszczepić probówki, w których wizualnie nie widać wzrostu, na gęsty agar odżywczy niezawierający antybiotyku. Wskaźnik ten ma ogromne znaczenie kliniczne. W oparciu o metodę seryjnych rozcieńczeń stworzono mikrometody polegające na zastosowaniu mniejszej objętości pożywki. Obecnie do prowadzenia tego typu badań produkowane są liczne komercyjne zestawy, składające się z suszonych, stabilizowanych rozcieńczeń antybiotyków w pożywce, które rozcieńcza się zawiesiną badanego drobnoustroju. Zestawy te można przechowywać w normalnych warunkach, co eliminuje potrzebę przygotowywania rozcieńczeń pożywek i antybiotyków w laboratorium. Testy mikrorozcieńczeń mają także tę zaletę, że można je włączyć do zautomatyzowanego systemu.
Na podstawie uzyskanych danych (średnica strefy zahamowania wzrostu lub wartość MIC) mikroorganizmy dzieli się na wrażliwe, średnio oporne i oporne. Do rozróżnienia tych kategorii stosuje się tzw. stężenia graniczne antybiotyków, które nie są wartościami stałymi. Są one korygowane w miarę zmiany wrażliwości populacji drobnoustrojów. Opracowaniem i weryfikacją kryteriów interpretacji zajmują się czołowi specjaliści (chemioterapeuci, mikrobiolodzy) będący członkami specjalnych komisji. Jednym z nich jest Krajowy Komitet ds. Standardów Laboratoriów Klinicznych ( N krajowy C komisarz C liniowy L laboratorium S tandards – NCCLS), organizowanego w USA. Obecnie standardy NCCLS są stosowane jako międzynarodowe standardy oceny wyników badań wrażliwości bakterii w wieloośrodkowych badaniach mikrobiologicznych i klinicznych.
Oznaczanie wrażliwości bakterii na antybiotyki. Kryterium wrażliwości drobnoustrojów na antybiotyki jest minimalne stężenie hamujące (MIC) antybiotyku, które w standardowych warunkach doświadczalnych opóźnia wzrost patogenu.
W celu określenia lekooporności do zaszczepienia stosuje się codziennie czystą kulturę patogenu wyizolowanego z organizmu pacjenta oraz standardową pożywkę (AGV lub agar Mueller-Hinton).
Oznaczanie wrażliwości drobnoustrojów na antybiotyki przeprowadza się metodą dyfuzji krążkowej lub metodą seryjnych rozcieńczeń antybiotyku w pożywce płynnej lub stałej.
Metoda dyfuzyjna dyskowa. Oznaczanie wrażliwości na antybiotyki metodą krążka bibułowego opiera się na dyfuzji antybiotyku do pożywki. Stężenie antybiotyków w krążkach dobiera się tak, aby średnice stref zahamowania wzrostu standardowych mikroorganizmów testowych spełniały międzynarodowe standardy. Stężenie to odpowiada średniej dawce terapeutycznej dla standardowych szczepów mikroorganizmów.
Przygotowaną zawiesinę mikroorganizmów posiewa się na powierzchnię specjalnego podłoża (AGV lub agar Mueller-Hinton) na płytkach Petriego. Następnie za pomocą sterylnej pęsety na zaszczepioną powierzchnię umieszcza się standardowe krążki papierowe nasączone roztworami różnych antybiotyków, w równej odległości od siebie, od krawędzi i od środka kubka (można również zastosować specjalne urządzenia i dozowniki). Zaszczepione szalki trzymane są w termostacie w temperaturze optymalnej dla wzrostu badanych bakterii. Jeśli bakterie są wrażliwe na ten antybiotyk, wokół krążka utworzy się strefa zahamowania wzrostu. Średnica strefy zahamowania wzrostu odpowiada stopniowi wrażliwości badanego drobnoustroju na dany antybiotyk. Wynik końcowy ocenia się za pomocą specjalnych tabel, które wskazują średnice stref zahamowania wzrostu upraw standardowych, wrażliwych, odpornych i średnio odpornych.
Metoda krążkowa nie dostarcza wiarygodnych danych przy określaniu wrażliwości drobnoustrojów na antybiotyki polipeptydowe słabo dyfundujące do agaru (na przykład polimyksyna, rystomycyna). Metoda ta nie pozwala również na określenie minimalnego stężenia hamującego antybiotyku.
Metoda seryjnych rozcieńczeń. Metoda ta określa minimalne stężenie antybiotyku, które hamuje wzrost badanej kultury bakteryjnej (MIC, MIC). Aby to zrobić, najpierw przygotuj roztwór podstawowy zawierający antybiotyk o określonym stężeniu (µg/ml lub jednostki/ml) w specjalnym rozpuszczalniku lub roztworze buforowym. Następnie z roztworu głównego przygotowuje się wszystkie kolejne rozcieńczenia w bulionie (w objętości 1 ml), po czym do każdego rozcieńczenia dodaje się 0,1 ml testowej zawiesiny bakteryjnej zawierającej 10 6 -10 7 komórek bakteryjnych w 1 ml. Do ostatniej probówki dodać 1 ml bulionu (bez antybiotyku) i 0,1 ml zawiesiny bakteryjnej (kontrola hodowli). Rośliny inkubuje się w temperaturze 37°C do następnego dnia, po czym wyniki doświadczenia stwierdza się na podstawie zmętnienia pożywki w porównaniu z kontrolą. Ostatnia probówka z przezroczystą pożywką wskazuje na opóźnienie wzrostu badanej kultury bakteryjnej, pod wpływem minimalnego stężenia hamującego (hamującego) (MIC, MIC) zawartego w niej antybiotyku. Aby ocenić minimalne stężenie bakteriobójcze (MBC), wysiew przeprowadza się na pożywce stałej bez antybiotyku z probówek, bez wzrostu. Za MBC przyjmuje się minimalne stężenie antybiotyku powodujące śmierć mikroorganizmu, która charakteryzuje się brakiem wzrostu na szalkach Petriego z pożywką.
Metoda seryjnego rozcieńczania antybiotyku w podłożu agarowym. W takim przypadku możliwe jest zbadanie w jednym doświadczeniu wrażliwości kilku kultur drobnoustrojów na różne stężenia danego antybiotyku. W sterylnym podłożu agarowym przygotowuje się różne rozcieńczenia antybiotyku. W tym celu należy dodać wymaganą ilość początkowego roztworu antybiotyku, dokładnie wymieszać i rozlać do sterylnych szalek Petriego. Po stwardnieniu agaru dno kubka dzieli się od zewnątrz markerem na sektory. Każdą badaną hodowlę nanosi się za pomocą pętli bakteriologicznej na określony sektor w naczyniach o różnym stężeniu antybiotyku. Wysiew badanych kultur na szalki o różnym stężeniu antybiotyku można przeprowadzić przy pomocy aplikatora umożliwiającego jednoczesne zaszczepienie 12-15 kultur na szalkę. Następnie naczynia umieszcza się w termostacie o temperaturze optymalnej dla wzrostu i rozwoju badanych bakterii. Wyniki uwzględnia się na podstawie obecności lub braku wzrostu bakterii w porównaniu ze wzrostem na pożywce na płytce kontrolnej. Bakterie uważa się za wrażliwe na antybiotyk w stężeniu, przy którym ich wzrost zostaje całkowicie zahamowany.
Metoda e-testu. Metoda ta łączy w sobie zalety metody seryjnych rozcieńczeń i metody krążkowej. Zamiast krążków stosuje się paski („linijki”) bibuły filtracyjnej nasączonej antybiotykiem, przy czym u podstawy paska stężenie antybiotyku będzie minimalne, a na „górnej” – maksymalne. Paski umieszcza się na powierzchni agaru odżywczego zaszczepionego badaną kulturą. Jeżeli bakterie są wrażliwe na działanie tego leku, wokół obszarów paska zawierających jego stężenia hamujące pojawia się elipsoidalna strefa zahamowania wzrostu. Liczbowa wartość stężenia antybiotyku u podstawy tej strefy wskazuje MIC tego antybiotyku dla danej uprawy.
DO wrażliwy Należą do nich szczepy mikroorganizmów, których wzrost zostaje zahamowany przy stężeniach leku występujących w surowicy krwi pacjenta podczas stosowania normalnych dawek antybiotyków.
DO umiarkowanie stabilny Należą do nich szczepy, których zahamowanie wzrostu wymaga stężeń powstałych w surowicy krwi po podaniu maksymalnych dawek leku.
Zrównoważony to mikroorganizmy, których wzrost nie jest hamowany przez lek w stężeniach powstałych w organizmie przy stosowaniu maksymalnych dopuszczalnych dawek.
Pytania kontrolne.
Zdefiniuj pojęcie „antybiotyki”. Główne grupy antybiotyków w zależności od sposobu przygotowania: naturalne, półsyntetyczne, syntetyczne. Wymień naukowca, który opracował teorię chemioterapii. Jakie właściwości decydują o wyborze leku do chemioterapii? Jaki jest wskaźnik chemioterapii, napisz jego wzór, jaki powinien być? Wymień pierwsze leki przeciwkrętkowe; pierwszy lek przeciwbakteryjny i nazwisko naukowca, który go otrzymał. Jak nazywają się rosyjscy naukowcy, którzy jako pierwsi odkryli antybakteryjne właściwości zielonej pleśni? Wymień naukowca, który badał właściwości antybakteryjne pleśni Penicillium i podjął próbę wyizolowania penicyliny. Naukowcy, którzy jako pierwsi otrzymali preparaty penicyliny. Producenci antybiotyków – podaj przykłady. Klasyfikacja antybiotyków ze względu na pochodzenie, skład chemiczny, spektrum działania. Mechanizm działania antybiotyków: cele (punkty zastosowania antybiotyków różnych grup). Rodzaje działania - bakteriobójcze i bakteriostatyczne; jak je oznaczyć w eksperymencie in vitro? Antybiotyki przeciwwirusowe, mechanizmy ich działania. W jakich jednostkach mierzy się aktywność antybiotyków? Warunki przechowywania antybiotyków.
Wymień i scharakteryzuj możliwe skutki uboczne antybiotykoterapii. Zdefiniuj pojęcie „lekooporności drobnoustrojów”. Rodzaje lekooporności. Naturalne i nabyte (pierwotne i wtórne). Genetyczne mechanizmy lekooporności: chromosomalne i plazmidowe. Fenotypowe mechanizmy lekooporności – nazwać i scharakteryzować. Racjonalne stosowanie antybiotyków – podaj metody. Wymień leki będące inhibitorami enzymów niszczących antybiotyki. Opisać metody określania wrażliwości drobnoustrojów na antybiotyki.
(MAK)to pęcherzykowe stężenie wziewnego środka znieczulającego, które uniemożliwia ruch u 50% pacjentów w odpowiedzi na standaryzowany bodziec (np. nacięcie skóry). MAC jest przydatną miarą, ponieważ odzwierciedla ciśnienie parcjalne środka znieczulającego w mózgu, umożliwia porównanie siły działania różnych środków znieczulających i zapewnia standard w badaniach eksperymentalnych (Tabela 7-3). Należy jednak pamiętać, że MAC jest wartością statystycznie uśrednioną i jej wartość w anestezjologii praktycznej jest ograniczona, zwłaszcza na etapach, którym towarzyszy szybka zmiana stężenia pęcherzyków płucnych (np. podczas indukcji). Wartości MAC różnych środków znieczulających są sumowane. Na przykład mieszanina podtlenku azotu o stężeniu 0,5 MAC (53%) I 0,5 MAC halotanu (0,37%) powoduje depresję OUN w przybliżeniu porównywalną z depresją, która występuje po działaniu 1 MAC enfluranu (1,7%). W przeciwieństwie do depresji OUN, stopnie depresji mięśnia sercowego w przypadku różnych środków znieczulających o tym samym MAC nie są równoważne: 0,5 MAC halotanu powoduje wyraźniejsze hamowanie funkcji pompowania serca niż 0,5 MAC podtlenku azotu.
Ryż. 7-4. Istnieje bezpośrednia, choć nie ściśle liniowa, zależność pomiędzy mocą środka znieczulającego a jego rozpuszczalnością w tłuszczach. (Od: Lowe H. J., Hagler K. Gas Chromatography in Biology and Medicine. Churchill, 1969. Powielane ze zmianami, za zgodą.)
MAC reprezentuje tylko jeden punkt na krzywej dawka-odpowiedź, a mianowicie ED 50 (ED 50%, czyli 50% dawki skutecznej, to dawka leku, która powoduje oczekiwany efekt u 50% pacjentów.- Notatka uliczka). MAK ma wartość kliniczną, jeśli znany jest kształt krzywej dawka-odpowiedź dla środka znieczulającego. Z grubsza możemy założyć, że 1,3 MAC dowolnego znieczulenia wziewnego (np. dla halotanu 1,3 x 0,74% = 0,96%) zapobiega ruchom podczas stymulacji chirurgicznej u 95% pacjentów (tj. 1,3 MAC - przybliżony odpowiednik ED 95%)); przy 0,3-0,4 MAC następuje przebudzenie (MAC czuwania).
MAC zmienia się pod wpływem czynników fizjologicznych i farmakologicznych (tab. 7-4.). MAC jest praktycznie niezależny od rodzaju żywej istoty, jej rodzaju i czasu trwania znieczulenia.
Podtlenek azotu
Właściwości fizyczne
Podtlenek azotu (N 2 O, „gaz rozweselający”) jest jedynym nieorganicznym związkiem wziewnych środków znieczulających stosowanym w praktyce klinicznej (Tabela 7-3). Podtlenek azotu jest bezbarwny, praktycznie bezwonny, nie zapala się i nie eksploduje, ale podtrzymuje spalanie jak tlen. W przeciwieństwie do wszystkich innych wziewnych środków znieczulających, w temperaturze pokojowej i pod ciśnieniem atmosferycznym, podtlenek azotu jest gazem (wszystkie ciekłe wziewne środki znieczulające przekształcają się w parę za pomocą parowników, dlatego czasami nazywane są środkami znieczulającymi tworzącymi parę. Notatka uliczka). Pod ciśnieniem podtlenek azotu można przechowywać w postaci ciekłej, ponieważ jego temperatura krytyczna jest wyższa niż temperatura pokojowa (patrz rozdział 2). Podtlenek azotu jest stosunkowo niedrogim wziewnym środkiem znieczulającym.
Wpływ na organizm
A. Układ sercowo-naczyniowy. Podtlenek azotu pobudza współczulny układ nerwowy, co wyjaśnia jego wpływ na krążenie krwi. Chociaż in vitrośrodek znieczulający powoduje depresję mięśnia sercowego; w praktyce ciśnienie krwi, pojemność minutowa serca i częstość akcji serca nie zmieniają się lub nieznacznie wzrastają ze względu na wzrost stężenia katecholamin (tab. 7-5).
TABELA 7-3. Właściwości nowoczesnych anestetyków wziewnych
1 Przedstawione wartości MAC obliczono dla osób w wieku 30-55 lat i wyrażono w procentach jednej atmosfery. W przypadku stosowania na dużych wysokościach należy zastosować większe stężenie środka znieczulającego w wdychanej mieszaninie, aby uzyskać to samo ciśnienie cząstkowe. *Jeśli MAC > 100%, do osiągnięcia 1,0 MAC wymagane są warunki hiperbaryczne.
Depresja mięśnia sercowego może mieć znaczenie kliniczne w chorobie wieńcowej i hipowolemii: wynikające z tego niedociśnienie tętnicze zwiększa ryzyko rozwoju niedokrwienia mięśnia sercowego.
Podtlenek azotu powoduje zwężenie tętnicy płucnej, co zwiększa opór naczyniowy płuc (PVR) i prowadzi do wzrostu ciśnienia w prawym przedsionku. Pomimo zwężenia naczyń skórnych, całkowity obwodowy opór naczyniowy (TPVR) nieznacznie się zmienia.
TABELA 7-4.Czynniki wpływające na MAC
| Czynniki | Wpływ na MAC | Notatki |
| Temperatura | ||
| Hipotermia | ↓ | |
| Hipertermia | ↓ | , jeżeli >42°С |
| Wiek | ||
| Młody | ||
| Starczy | ↓ | |
| Alkohol | ||
| Ostre zatrucie | ↓ | |
| Chroniczna konsumpcja | ||
| Niedokrwistość | ||
| Liczba hematokrytu< 10 % | ↓ | |
| PaO2 | ||
| < 40 мм рт. ст. | ↓ | |
| PaCO2 | ||
| > 95 mmHg Sztuka. | ↓ | Spowodowane spadkiem pH w płynie mózgowo-rdzeniowym |
| Funkcja tarczycy | ||
| Nadczynność tarczycy | Nie ma wpływu | |
| Niedoczynność tarczycy | Nie ma wpływu | |
| Ciśnienie tętnicze | ||
| Średnie ciśnienie krwi< 40 мм рт. ст. | ↓ | |
| Elektrolity | ||
| Hiperkalcemia | ↓ | |
| Hipernatremia | Spowodowane zmianami w składzie płynu mózgowo-rdzeniowego | |
| Hiponatremia | ↓ | |
| Ciąża | ↓ | |
| Leki | ||
| Miejscowe środki znieczulające | ↓ | Oprócz kokainy |
| Opioidy | ↓ | |
| Ketamina | ↓ | |
| Barbiturany | ↓ | |
| Benzodiazepiny | ↓ | |
| Werapamil | ↓ | |
| Preparaty litowe | ↓ | |
| Sympatykolityki | ||
| Metylodopa | ↓ | |
| Rezerpina | ↓ | |
| Klonidyna | ↓ | |
| Sympatykomimetyki | ||
| Amfetamina | ||
| Chroniczne używanie | ↓ | |
| Ostre zatrucie | ||
| Kokaina | ||
| Efedryna |
Ponieważ podtlenek azotu zwiększa stężenie endogennych katecholamin, jego stosowanie zwiększa ryzyko wystąpienia arytmii.
B. Układ oddechowy. Podtlenek azotu zwiększa częstość oddechów (tj. powoduje przyspieszony oddech) i zmniejsza objętość oddechową w wyniku stymulacji ośrodkowego układu nerwowego i prawdopodobnie aktywacji receptorów rozciągania płuc. Ogólnym efektem jest niewielka zmiana minimalnej objętości oddechowej i PaCO 2 w spoczynku. Napęd hipoksyczny, czyli wzrost wentylacji w odpowiedzi na hipoksemię tętniczą, za pośrednictwem obwodowych chemoreceptorów w ciałach szyjnych, jest znacząco hamowany, gdy podtlenek azotu stosuje się nawet w niskich stężeniach. Może to prowadzić do poważnych powikłań, które występują u pacjenta na sali pooperacyjnej, gdzie nie zawsze możliwe jest szybkie rozpoznanie hipoksemii.
B. Centralny układ nerwowy. Podtlenek azotu zwiększa mózgowy przepływ krwi, powodując niewielki wzrost ciśnienia wewnątrzczaszkowego. Podtlenek azotu zwiększa również zużycie tlenu w mózgu (CMRO 2). Podtlenek azotu w stężeniu mniejszym niż 1 MAC zapewnia odpowiednią ulgę w bólu w stomatologii i podczas drobnych zabiegów chirurgicznych.
D. Przewodnictwo nerwowo-mięśniowe. W przeciwieństwie do innych wziewnych środków znieczulających, podtlenek azotu nie powoduje zauważalnego rozluźnienia mięśni. Przeciwnie, w wysokich stężeniach (stosowany w komorach hiperbarycznych) powoduje sztywność mięśni szkieletowych. Podtlenek azotu prawdopodobnie nie powoduje hipertermii złośliwej.
D. Nerki. Podtlenek azotu zmniejsza przepływ krwi przez nerki z powodu zwiększonego oporu naczyń nerkowych. Zmniejsza to szybkość filtracji kłębuszkowej i diurezę.
TABELA 7-5.Farmakologia kliniczna wziewnych środków znieczulających
| Podtlenek azotu | Halotan | Metoksyfluran | Enfluran | Isoflu-ran | Desflu-run | Sewofluran | |
| Układ sercowo-naczyniowy | |||||||
| Ciśnienie tętnicze | ± | ↓↓ | ↓↓ | ↓↓ | ↓↓ | ↓↓ | ↓ |
| Tętno | ± | ↓ | ± lub | ||||
| OPSS | ± | ± | ± | ↓ | ↓↓ | ↓↓ | ↓ |
| Pojemność minutowa serca 1 | ± | ↓ | ↓ | ↓↓ | ± | ± lub ↓ | ↓ |
| Układ oddechowy | |||||||
| Objętość oddechowa | ↓ | ↓↓ | ↓↓ | ↓↓ | ↓↓ | ↓ | ↓ |
| Częstość oddechów | |||||||
| PaCO2 w spoczynku | ± | ||||||
| PaCO 2 pod obciążeniem | |||||||
| OUN | |||||||
| Mózgowy przepływ krwi | |||||||
| Ciśnienie śródczaszkowe | |||||||
| Potrzeby metaboliczne mózgu 2 | ↓ | ↓ | ↓ | ↓↓ | ↓↓ | ↓↓ | |
| Konwulsje | ↓ | ↓ | ↓ | ↓ | ↓ | ↓ | |
| Przewodnictwo nerwowo-mięśniowe | |||||||
| Blok niedepolaryzacyjny 3 | |||||||
| Nerki | |||||||
| Przepływ krwi w nerkach | ↓↓ | ↓↓ | ↓↓ | ↓↓ | ↓↓ | ↓ | ↓ |
| Współczynnik filtracji kłębuszkowej | ↓↓ | ↓↓ | ↓↓ | ↓↓ | ↓↓ | ? | ? |
| Diureza | ↓↓ | ↓↓ | ↓↓ | ↓↓ | ↓↓ | ? | ? |
| Wątroba | |||||||
| Przepływ krwi w wątrobie | ↓ | ↓↓ | ↓↓ | ↓↓ | ↓ | ↓ | ↓ |
| Metabolizm 4 O | ,004 % | 15-20% | 50% | 2-5 % | 0,2 % | < 0, 1 % | 2-3 % |
Notatka:
Zwiększyć;
↓ - spadek; ± - brak zmian; ? - nieznany. 1 Na tle wentylacji mechanicznej.
2 Zapotrzebowanie metaboliczne mózgu wzrasta, jeśli enfluran powoduje drgawki.
Leki znieczulające prawdopodobnie wydłużają blok depolaryzacyjny, ale efekt ten nie jest istotny klinicznie.
4 Część środka znieczulającego, która dostaje się do krwiobiegu i jest metabolizowana.
E. Wątroba. Podtlenek azotu zmniejsza przepływ krwi w wątrobie, ale w mniejszym stopniu niż inne wziewne środki znieczulające.
G. Przewód pokarmowy. Niektóre badania wykazały, że podtlenek azotu powoduje nudności i wymioty w okresie pooperacyjnym w wyniku aktywacji strefy wyzwalającej chemoreceptory i ośrodka wymiotów w rdzeniu przedłużonym. Natomiast badania innych naukowców nie wykazały związku między podtlenkiem azotu a wymiotami.
|
Nazwa substancji |
Poziom progowy |
|---|---|
|
Grupa amfetaminowa |
|
|
Amfetamina |
|
|
Metamfetamina |
|
|
Metylenodioksyamfetamina (MDA) |
|
|
Inne substancje z grupy amfetaminy |
|
|
Grupa opiatowa |
|
|
Morfina |
|
|
Kodeina |
|
|
6-monoacetylomorfina |
|
|
Grupa benzodiazepin |
|
|
Oksazepam |
|
|
Diazepam |
|
|
Nordiazepam |
|
|
Midazolam |
|
|
Fenazepam |
|
|
Inne substancje benzodiazepinowe |
|
|
Grupa barbituranów |
|
|
Barbamil |
|
|
Etanal sodu |
|
|
Chemikalia innych grup |
|
|
Kwas 11-nor-Δ 9-tetrahydrokannabinolowy (główny metabolit Δ 9-tetrahydrokannabinolu) |
|
|
Kokaina i jej metabolity |
|
|
Metadon i jego metabolity |
|
|
Propoksyfen i jego metabolity |
|
|
Buprenorfina i jej metabolity |
|
|
d-Lysergid (LSD, LSD-25) |
|
|
Fentanyl i jego metabolity |
|
|
Metakwalon |
|
|
Fencyklidyna |
|
Tabela 2 załącznika do Procedury przeprowadzania badania lekarskiego pod kątem zatrucia (alkoholem, narkotykami lub innymi substancjami toksycznymi), zatwierdzonego zarządzeniem Ministerstwa Zdrowia Federacji Rosyjskiej (projekt), „Poziomy wartości progowych dla zawartości środków odurzających, substancji psychotropowych, innych substancji chemicznych i ich metabolitów, określonych metodami analizy potwierdzającej.”
Notatka: Poziom progowy to minimalne stężenie substancji (jej metabolitu) w obiekcie biologicznym, określone metodami analizy wstępnej lub konfirmacyjnej, po wykryciu którego wynik badania uważa się za pozytywny.
Właściwie podobna tabela o nazwie „ Poziomy progowe dla potwierdzających metod analizy moczu” wydawany jest w Centralnym Laboratorium Chemiczno-Toksykologicznym na Wydziale Toksykologii Analitycznej i Sądowej Państwowej Instytucji Edukacyjnej Wyższego Kształcenia Zawodowego Pierwszego Moskiewskiego Państwowego Uniwersytetu Medycznego im. I. M. Sechenowa (TsKhTL GOU VPO Pierwszy Moskiewski Państwowy Uniwersytet Medyczny im. I. M. Sechenowa) Ministra Zdrowia Federacji Rosyjskiej z dnia 30 sierpnia 2011 r. nr 179-25/12I, gdzie natomiast podano m.in. stężenia fenobarbitalu (1000 ng/ml), innych substancji z grupy barbituranów ( 100 ng/ml) i kotynina (100 ng/ml). Według tego TsHTL GOU VPO Pierwszy Moskiewski Państwowy Uniwersytet Medyczny nazwany imieniem. I. M. Sechenov, zgodnie z paragrafem 2 zarządzenia Ministerstwa Zdrowia i Rozwoju Społecznego Federacji Rosyjskiej z dnia 27 stycznia 2006 r. Nr 40 „W sprawie organizacji badań chemiczno-toksykologicznych w diagnostyce analitycznej obecności alkoholu, środki odurzające, psychotropowe i inne substancje toksyczne w organizmie człowieka”, opracowała i zatwierdziła wymagania dotyczące prowadzenia badań chemiczno-toksykologicznych w celu analitycznej diagnostyki obecności środków odurzających, psychotropowych i innych substancji toksycznych w organizmie człowieka.
W szczególności, zgodnie z paragrafem 12 pisma informacyjnego, przy przeprowadzaniu badań lekarskich kierowców pojazdów, testowaniu studentów, przeprowadzaniu badań chemicznych i toksykologicznych na wniosek obywateli oraz w innych przypadkach przewidzianych przez prawo, badanie płynu ustnego (śliny) jest niedopuszczalne, ponieważ nie pozwala na wiarygodne ustalenie faktu obecności w organizmie człowieka środków odurzających, psychotropowych i innych substancji toksycznych. Substancje kontrolowane można wykryć w płynie ustnym (ślinie) w czasie nie przekraczającym kilku godzin od momentu spożycia.
Wymagania dotyczące środków technicznych stosowanych do wykrywania środków odurzających, substancji psychotropowych i innych substancji toksycznych (ich metabolitów) w próbkach moczu przy przeprowadzaniu wstępnych badań chemiczno-toksykologicznych (Załącznik nr 1 do Zaleceń Metodycznych: Zasady prowadzenia badań chemiczno-toksykologicznych w celu ustalenia obecności badania ogółu studentów w organizacjach oświatowych i zawodowych, a także w organizacjach oświatowych szkół wyższych w celu wczesnego wykrywania nielegalnego zażywania środków odurzających i substancji psychotropowych, środków odurzających, substancji psychotropowych i innych substancji toksycznych (ich metabolitów) / Twórca: Stowarzyszenie Specjalistów i Organizacji Usług Laboratoryjnych „Federacja” Medycyna Laboratoryjna” pod redakcją głównego niezależnego specjalisty w dziedzinie toksykologii analitycznej i sądowej Ministerstwa Zdrowia Rosji, doktora nauk chemicznych, profesora B.N. Izotowa i głównego niezależnego specjalisty ds. klinicznych diagnostyka laboratoryjna Ministerstwa Zdrowia Rosji, doktor nauk medycznych, profesor A. G. Kochetova // Moskwa, 2015)
|
Nazwa grup substancji |
Stężenie (ng/ml) |
|---|---|
|
Opiaty (6 monoacetylomorfina, morfina, kodeina, dezomorfina itp.) |
|
|
Kannabinoidy |
|
|
Fenyloalkiloaminy (amfetamina, metamfetamina, mefedron itp.) |
|
|
Metadon |
|
|
Benzodiazepiny |
|
|
MDMA |
|
|
Kokaina |
|
|
Barbiturany |
|
|
Kotinin |
|
|
Syntetyczne kannabinoidy |
|
|
Katynony |
|
|
Glukuronid etylu |
Wymagania dotyczące środków technicznych stosowanych do wykrywania środków odurzających, substancji psychotropowych i innych substancji toksycznych (ich metabolitów) w próbkach moczu podczas prowadzenia potwierdzających badań chemiczno-toksykologicznych (Załącznik nr 2 do ww. źródła)
|
Nazwa grup substancji |
Stężenie (ng/ml) |
|---|---|
|
Grupa amfetaminowa |
|
|
Amfetamina |
|
|
Metamfetamina |
|
|
Metylenodioksyamfetamina (MDA) |
|
|
Metylenodioksymetamfetamina (MDMA) |
|
|
Inne substancje z grupy amfetaminy |
|
|
Grupa opiatowa |
|
|
Morfina |
|
|
Kodeina |
|
|
6-monoacetylomorfina |
|
|
Inne substancje opiatowe |
|
|
Grupa benzodiazepin |
|
|
Oksazepam |
|
|
Diazepam |
|
|
Nordiazepam |
|
|
Midazolam |
|
|
Fenazepam |
|
|
Inne substancje benzodiazepinowe |
|
|
Grupa barbituranów |
|
|
Fenobarbital |
1000 |
|
Barbamil |
|
|
Etanal sodu |
|
|
Inne substancje z grupy barbituranów |
|
|
Substancje innych grup |
|
|
Kwas 11-nor-Δ9-tetrahydrokannabinolowy (główny metabolit Δ9-tetrahydrokannabinolu) |
|
|
Benzoiloekgonina (metabolit kokainy) |
|
|
Metadon |
|
|
Propoksyfen |
|
|
Buprenorfina |
|
|
LSD |
|
|
Fentanyl |
|
|
Metakwalon |
|
|
Fencyklidyna |
|
|
Kotinin |
|
|
Syntetyczne kannabinoidy |
|
|
Katynony |
|
|
Glukuronid etylu |
|
Jednocześnie, zapewniając obronę w sprawach o wykroczenia administracyjne na podstawie art. 12.8 i 12.27 część 3 Kodeksu wykroczeń administracyjnych Federacji Rosyjskiej, a także w sprawach przewidujących odpowiedzialność karną za prowadzenie pojazdu pod wpływem alkoholu (art. 264 i 264.1 Kodeks karny Federacji Rosyjskiej), nie należy zapominać, że odpowiedzialność administracyjna powstaje w przypadku obecności w organizmie człowieka środków odurzających lub substancji psychotropowych, niezależnie od ich stężenia w organizmie człowieka, we krwi i w moczu .
Mając na uwadze powyższe, identyfikacja w ramach badań narkotykowych, badań chemiczno-toksykologicznych, kryminalistycznych badań chemicznych środków odurzających narkotyki, substancje psychotropowe i toksyczne oraz substancje powodujące odurzenie już na poziomie, że tak powiem, „granicy wykrywalności zastosowanej metody” jest podstawą pociągnięcia kierowcy pojazdu do odpowiedzialności administracyjnej lub karnej na podstawie właściwych przepisów prawa artykuły Kodeksu Federacji Rosyjskiej dotyczącego wykroczeń administracyjnych i/lub Kodeksu karnego Federacji Rosyjskiej.
Dla informacji - " "
Analiza zdolności bakterii do namnażania i wzrostu na podłożach zawierających malejące stężenia leku pozwala określić minimalne stężenie hamujące antybiotyku (MIC), hamującą rolę bakterii in vitro (Tabela 3(vet7)). Wielkość tej dawki determinuje wybór leku, który może osiągnąć podobne stężenia in vivo i jest podstawą do porównania względnej wrażliwości organizmu na inne leki. Uważa się, że aby zapewnić skuteczność, stężenie leku w miejscu zakażenia musi być co najmniej równe wartości minimalnego stężenia hamującego antybiotyku. Z drugiej strony, stężenia leku w osoczu na ogół muszą być wyższe, aby zapewnić odpowiednie stężenia w tkance. Jednakże nieuzasadnione zwiększanie dawek leków przeciwdrobnoustrojowych w celu uzyskania dawki minimalnej antybiotyku hamującej rozwój określonego rodzaju bakterii in vitro może prowadzić do kumulacji leku w organizmie biorcy w dawkach toksycznych.
„Krytyczny MIC” dla konkretnej substancji leczniczej to najwyższe racjonalnie bezpieczne stężenie leku, które można osiągnąć przy zastosowaniu klinicznie akceptowalnej dawki i drogi podania leku (Tabela 3(vet7)). Wartość MIC zależy od konkretnego rodzaju hodowli bakteryjnej i konkretnego rodzaju substancji leczniczej. Jednocześnie krytyczny MIC jest specyficzny dla konkretnego biorcy i konkretnej substancji leczniczej. Zatem krytyczny MIC będzie taki sam dla każdego organizmu (Tabela 3 (vet7)). Wartość stężenia krytycznego dla konkretnego organizmu może się różnić w zależności od gatunku zwierzęcia (ze względu na różnice w czułości lub wzorcach dystrybucji leku) i konkretnego laboratorium. Należy skontaktować się z laboratorium dostarczającym dane dotyczące metod hodowli i wrażliwości na antybiotyki w celu uzyskania wartości krytycznych stosowanych w ich badaniach.
Na podstawie danych dotyczących rozcieńczeń in vitro bakterie klasyfikuje się jako wrażliwe (S) na dany lek, jeśli wartość MIC jest znacznie niższa od wartości krytycznej tego wskaźnika. Wzrost mikroorganizmów chorobotwórczych o pośrednich (MS) lub pośrednich (IS) wartościach wrażliwości zostaje zahamowany, gdy stężenie leku zbliża się do krytycznej wartości MIC. Bakterie takie mogą powodować negatywne reakcje w organizmie pacjenta lub nie mieć na niego żadnego wpływu. Wartość MIC dla bakterii opornych (R) przekracza krytyczną dawkę minimalną. Jest mało prawdopodobne, aby osiągnięto skuteczne stężenie w organizmie pacjenta takiego leku, który działa na konkretny mikroorganizm. W takich przypadkach ryzyko kumulacji leku w dawkach toksycznych może również przeważyć nad potencjalnymi korzyściami z terapii. Krytyczna minimalna dawka antybiotyków przeciwbakteryjnych nowej generacji jest w niektórych przypadkach trudniejsza do ustalenia ze względu na przejście na profesjonalne, elastyczne etykietowanie zakresów dawek.
Leki należy dobierać w taki sposób, aby przy stosowaniu schematu uniemożliwiającego kumulację leku w dawkach toksycznych możliwe było osiągnięcie maksymalnego stężenia leku w osoczu znacznie przekraczającego MIC. Wiele bakterii będzie wrażliwych na działanie konkretnego leku w stężeniach znacznie poniżej krytycznej dawki minimalnej. Różnicę między wartością krytyczną a wewnętrzną wartością MIC można wykorzystać do porównania względnej skuteczności różnych środków przeciwdrobnoustrojowych. Na przykład dla amikacyny wartość krytyczna wynosi 32 µg/ml, zatem E. coli z MIC wynoszącym 2 µg/ml jest stosunkowo bardziej wrażliwa na amikacynę niż E. coli z MIC wynoszącym 16 µg/ml. Obydwa gatunki należy uznać za wrażliwe (choć drugi gatunek można uznać za gatunek średnio wrażliwy), jednak wzrost bakterii pierwszego gatunku wydaje się być w większym stopniu zahamowany. Jeżeli ten sam gatunek E. coli o wartości MIC wynoszącej 2 µg/ml w porównaniu z amoksycyliną ma wartość MIC wynoszącą 16 µg/ml (przy wartości krytycznej wynoszącej 32 µg/ml), wówczas wzrost tego mikroorganizmu prawdopodobnie byłby łatwiej jest zapobiegać, stosując amikacynę zamiast amoksycyliny, ponieważ wartość MIC amikacyny jest bardziej odległa od jej krytycznej wartości MIC niż wartość MIC amoksycyliny.
Choć różnice pomiędzy wartościami MIC dla konkretnego gatunku bakterii i konkretnego leku (16 lub 32) mogą wydawać się dość duże (szczególnie w kontekście granicznego stężenia leku w osoczu), to taka różnica odpowiada tylko jednemu roztworowi w probówka. Jest to przykład niebezpieczeństwa przeszacowania danych wrażliwych. Jeżeli wartość MIC danego organizmu jest wystarczająco bliska wartości krytycznej, to ze względu na możliwe różnice w interpretacji, temu drobnoustrojowi można w jednym laboratorium przypisać stopień wrażliwości „S” lub „MS”, a w jednym laboratorium „R” inny, ze względu na możliwe różnice w interpretacji. Takie możliwe rozbieżności w ocenie są jednym z powodów, dla których należy unikać stosowania leków, na które dany organizm ma wrażliwość na stwardnienie rozsiane (lub wartość MIC jest bliska krytyczna), chyba że stężenie leku w miejscu zakażenia może znacznie wyższa niż wartość MIC określona w teście in vitro. Ilustrującym przykładem może być zastosowanie leków wydalanych przez nerki w leczeniu infekcji dróg moczowych lub stosowanie leków działających na żółć w leczeniu infekcji dróg żółciowych. Kumulacja niektórych leków przez leukocyty (fluorochinolony, makrolidy) może również skutkować powstaniem stężeń leków w tkankach znacznie przekraczających wartość MIC (lub krytyczną wartość MIC), pomimo niższych stężeń w osoczu.
Wartość MIC bakterii może zmieniać się podczas kolejnych infekcji wywołanych bakteriami tego samego gatunku, ale może także zmieniać się w trakcie przebiegu choroby zakaźnej. Wzrost MIC może po prostu odzwierciedlać odmienne podejście do oceny testu (szczególnie jeśli różnice są wykrywane jedynie poprzez rozcieńczenie in vitro), ale może również wynikać z rozwoju oporności na konkretny lek. W takich przypadkach można zmienić przebieg terapii przeciwdrobnoustrojowej poprzez zastosowanie dodatkowego leku lub przejście na nowy, skuteczniejszy lek. W zakażeniach wielobakteryjnych wartość MIC konkretnego leku będzie prawdopodobnie różna dla każdej zakażającej bakterii. Uważa się, że łatwiej jest zapobiec rozwojowi bakterii o niskiej wartości MIC dla danej substancji leczniczej, niż rozwojowi mikroorganizmu o wyższej wartości MIC dla tej samej substancji leczniczej.
Spis treści tematu „Metody określania wrażliwości na środki przeciwdrobnoustrojowe. Skutki uboczne antybiotykoterapii.”:Metody określania wrażliwości na środki przeciwdrobnoustrojowe. Minimalne stężenie hamujące (MIC). Metoda seryjnych rozcieńczeń w mediach płynnych.
Kryteriami działania konkretnego leku są minimalne stężenie hamujące (MIKROF) - najniższe stężenie leku hamujące wzrost kultury testowej i minimalne stężenie bakteriobójcze (MBK) - najniższe stężenie leku wywołujące działanie bakteriobójcze.
Metoda seryjnych rozcieńczeń w mediach płynnych
Metoda seryjnych rozcieńczeń w mediach płynnych pozwala na instalację minimalne stężenie hamujące (MIKROF) I minimalne stężenie bakteriobójcze (MBK) lek na izolowany patogen. Badania można wykonywać w różnych objętościach pożywki (1-10 ml). Stosować płynne pożywki, które odpowiadają potrzebom żywieniowym patogenu. W probówkach (zwykle osiem) przygotowuje się serię podwójnych rozcieńczeń leku w pożywce. Stężenie zmniejsza się odpowiednio ze 128 do 0,06 µg/ml (stężenie zasady może się zmieniać w zależności od aktywności leku). Końcowa objętość pożywki w każdej probówce wynosi 1 ml. Kontrolę stanowi probówka zawierająca czystą pożywkę. Do każdej probówki dodaje się 0,05 ml roztworu fizjologicznego zawierającego 106/ml komórek drobnoustrojów. Probówki inkubuje się przez 10–18 godzin w temperaturze 37°C (lub do momentu pojawienia się wzrostu bakterii w probówce kontrolnej). Po upływie określonego czasu wyniki uwzględnia się wizualnie lub nefelometrycznie na podstawie zmian gęstości optycznej ośrodka. Można także zastosować metodę zmodyfikowaną, wykorzystując pożywkę uzupełnioną glukozą i wskaźnikiem. Rozwojowi mikroorganizmów towarzyszy zmiana pH pożywki i, co za tym idzie, barwa wskaźnika.