Ocena wyników badań bakteriologicznych. Znaczenie biologicznej metody badawczej. Zasady prowadzenia badań posiewów w kierunku mikroflory u kobiet

Badania bakteriologiczne to jedna z najpopularniejszych metod badania różnych bakterii płyny biologiczne. Jeśli chodzi o posiew krwi, to mówimy o teście, który pomaga wykryć infekcje bakteryjne Ludzkie ciało. Jeśli rutynowe badania krwi nie mogą wykazać obecności bakteriemii, wymagany jest zbiornik na posiew. Zbiornik do siewu polega na pobraniu materiału i umieszczeniu go w pożywce zawierającej składniki umożliwiające bardzo szybkie namnażanie się bakterii.

Sugeruje badanie bakteriologiczne krwi przed uprawą kultury w pożywce. Dlatego lekarze nazywają takie testy studiami kulturowymi. Kiedy po kilku dniach bakterie zaczną aktywnie rosnąć, powstałą próbkę wysyła się do badanie mikroskopowe. Gdy posiewy wyrosną dostatecznie, określenie bakteriurii nie będzie już trudne. To jednak nie wszystkie analizy. W tym przypadku podana jest jedynie wstępna ocena. Aby dokładniej zidentyfikować bakterie, wykonuje się następujący krok. Jest to zbiornik do zaszczepiania próbek płynnych kultur w gęstym podłożu na szalce Petriego. Test ten pomaga zidentyfikować rosnące kolonie bakteryjne. Na ich próbkach można teraz przeprowadzać badania chemiczne, co pozwoli na dokładniejsze określenie ostatecznego rodzaju mikroorganizmu.

Wszystkie te etapy mają charakter przygotowawczy do badania gatunków bakterii pod kątem wrażliwości na różne rodzaje antybiotyków. Jest to konieczne, aby znaleźć najodpowiedniejszy lek do walki z infekcją.

Wykonując analiza bakteriologiczna krew można wykryć:

  • gronkowce;
  • paciorkowce;
  • enterobakterie;
  • grzyby drożdżowe.

Badania krwi dla infekcja bakteryjna V obowiązkowy wykonywane u pacjentów z obniżoną odpornością. Na przykład bakterie gruźlicy często występują u osób zakażonych wirusem HIV. Takie badanie pomaga wyeliminować nieprawidłowe wyniki.

W chorobach zakaźnych bakterie i mikroorganizmy mają możliwość przedostania się do krwioobiegu i przedostania się do innych układów organizmu, które znajdują się w pobliżu samego źródła. Jeśli wynik posiewu krwi będzie pozytywny, oznacza to, że infekcja już się rozwinęła. Może temu towarzyszyć wzrost temperatury, wzrost liczby białych krwinek i zaburzenia pracy serca.

Cechy analizy

Metoda badań bakteriologicznych, jak każdy inny test, ma swoje zalety i wady. Wśród zalet można wymienić wysoką specyficzność metody. Pozwala to uniknąć reakcji krzyżowo-fałszywych. Do badań nadaje się każdy płyn biologiczny. Można wykonać posiew wymazu, badanie moczu, badanie krwi itp. Cel terapeutyczny polega na określeniu wrażliwości zidentyfikowanego drobnoustroju na konkretny środek terapeutyczny. Pozwala to na szybkie zniszczenie mikroorganizmów bez straty czasu na niepotrzebne zabiegi.

Oczywiście są pewne wady. Wśród nich można zauważyć, że zasiew bakterii wymaga czasu. Zazwyczaj badany materiał jest przechowywany w laboratorium przez co najmniej tydzień. Istnieją poważne wymagania dotyczące pobierania materiału; ważne jest przestrzeganie wszystkich zasad pobierania materiału do badań bakteriologicznych. Ponadto personel laboratorium musi posiadać specjalne kwalifikacje.

Zazwyczaj wyniki badania bakteriologicznego uzyskuje się z próbek dowolnych ludzkich płynów biologicznych: od śluzu z nosogardzieli po płyn mózgowo-rdzeniowy. Posiew krwi, jak każdy inny płyn, nie wymaga specjalnego przygotowania do analizy. Na dwa, trzy dni zaleca się rezygnację z tłustych i smażonych potraw oraz niepicie alkoholu. Jeśli oddajesz krew, ostatni posiłek musisz zjeść co najmniej 12 godzin wcześniej. Ta cecha dostawy nazywana jest wyłącznie na pusty żołądek. Zabrania się palenia na kilka godzin przed badaniem.

Krew na posiew, jeśli chodzi o sterylność, pobierana jest kilkukrotnie w określonym przedziale czasowym. Wynika to z faktu, że nie zawsze można osiągnąć infekcję pożywka pojedynczo, zatem pojedyncze pobranie próbki nie jest uważane za skuteczne. Można powiedzieć, że dany mikroorganizm był prowokatorem konkretnej infekcji dopiero po co najmniej dwukrotnym przeprowadzeniu badania seryjnego. W wyniku powtarzanych badań należy zidentyfikować podejrzane bakterie. Możliwe jest jednoczesne badanie nie tylko krwi, ale także innych płynów biologicznych.

Krew należy pobrać maksymalnie wysoka temperatura. Jednocześnie wstępne leczenie antybiotykami może zamazać wyniki. W jako ostateczność od przyjęcia ostatniej dawki antybiotyku muszą upłynąć co najmniej 24 godziny. Pobieranie krwi odbywa się rano.

Po pobraniu wysiewa się w pożywce sprzyjającej rozwojowi bakterii. Takie próbki przechowuje się w temperaturze 37-38 stopni przez kilka dni.

Obecnie wykonuje się dwa rodzaje siewów. To jest o na kulturę w celu określenia wrażliwości na główne spektrum antybiotyków i na kulturę w celu określenia wrażliwości na szeroki zasięg leki. Na pierwsze rezultaty trzeba zwykle czekać co najmniej trzy dni. Czasami badanie trwa do dwóch tygodni.

Infekcja wirusowa

Kiedy wirus dostanie się do organizmu, jego obecność lub nieobecność można zdiagnozować za pomocą ogólna analiza krew. Zwykle nawet sam pacjent może bez problemu określić obecność infekcji, po otrzymaniu wyników testu w swoich rękach. Nie oznacza to jednak, że należy wykluczyć konsultację ze specjalistą.

Aby ustalić, czy przyczyną infekcji był wirus czy bakteria, należy dokładnie zapoznać się z uzyskanymi danymi. Faktem jest, że skład strukturalny krwi zmienia się w różny sposób w zależności od tego, czy przyczyną zakażenia jest wirus czy bakteria.

Jeśli powód Czuję się niedobrze stał się wirusem, wówczas liczba leukocytów będzie normalna lub nawet nieco niższa, w najrzadszych przypadkach następuje niewielki wzrost. Limfocyty są reprezentowane powyżej normy, podobnie jak monocyty. Wirus działa depresyjnie na neutrofile, więc ich liczba maleje. ESR zwykle pozostaje w normie lub nieznacznie wzrasta.

Nawet jeśli wszystko, co opisano, pokrywa się z twoją analizą, ważne jest, aby wziąć pod uwagę objawy, które rozwinąłeś. Dla Infekcja wirusowa charakteryzuje się mniejszymi okres wylęgania. Zwykle nie przekracza pięciu dni. Jednocześnie należy wykluczyć samodzielne postawienie diagnozy, gdyż czasami manifestacja bakterii następuje na tle rozwoju wirusa i tylko specjalista będzie miał problem z określeniem tej etiologii.

Różne próbki

Przy pobraniu moczu do badania bakteriologicznego przyjmuje się, że pobierany jest mocz poranny, czyli jego średnia porcja. W pierwszej kolejności wykonywana jest toaleta zewnętrznych narządów płciowych. Pobieranie odbywa się w sterylnym pojemniku o pojemności 10-15 ml. Test należy dostarczyć do laboratorium w terminie nie dłuższym niż dwie godziny.

Jeśli musisz pobrać wymaz z gardła i nosa, to rano zabrania się mycia zębów, płukania ust i nosa roztwory dezynfekcyjne. Zabrania się spożywania jedzenia i wody. W przypadku konieczności wykonania posiewu bakteryjnego kału należy pobrać kał z porannego stolca za pomocą sterylnej szpatułki do sterylnego pojemnika; objętość analizy powinna wynosić 15-30 gramów. Ważne jest, aby do próbki nie dostał się mocz.

Test musi zostać dostarczony w ciągu pięciu godzin. Zabronione jest przechowywanie testu przez noc lub jego zamrażanie. Należy również wykluczyć zbieranie stolca za pomocą lewatywy i środka przeczyszczającego.

Jeśli chcesz zbadać plwocinę, pobranie odbywa się rano na pusty żołądek w sterylnym pojemniku podczas ataku kaszlu wraz ze śluzem. Przed pobraniem można myć zęby, należy jednak stosować jedynie płukankę gotowana woda. Analiza dostarczana jest do laboratorium w ciągu godziny.

Kolekcja mleko matki wykonane po wstępnym procedury higieniczne. Obszar w pobliżu sutków należy potraktować wacikiem zwilżonym 70%. alkohol etylowy. Pierwsze 15 ml nie może zostać przeznaczone na darowiznę. Ze średniej porcji zlewa się 5 ml. Dostarczenie analizy musi nastąpić w ciągu dwóch godzin.

Jeśli zostanie przeprowadzona analiza wydzieliny z narządów płciowych, wówczas w przypadku kobiet obowiązuje zakaz wykonywania badań podczas miesiączki, po niej musi upłynąć co najmniej tydzień; Jeżeli wcześniej stosowano kurację antybiotykową, po jej zakończeniu powinien upłynąć miesiąc. W pierwszej kolejności wykonywana jest toaleta zewnętrznych narządów płciowych. Wskazane jest, aby nie oddawać moczu przez dwie godziny. Mężczyznom zaleca się wydłużenie czasu, w którym nie korzystają z toalety, do pięciu godzin.

Kultura bakteriologiczna– metoda badania materiału biologicznego (krew, mocz, kał itp.) pobranego od pacjenta i umieszczonego na sztucznej pożywce, która sprzyja wzrostowi i reprodukcji patogenu. Badanie może ujawnić nie tylko obecność patogenu, ale także jego stężenie. W ten sposób oprócz tego, co już zostało wymienione, można zbadać płyn mózgowo-rdzeniowy (CSF), plwocinę, żółć, wydzielinę z gardła, nosa, oczu, drogi oddechowe, genitalia, rany. Oznacza to, że mikroorganizmy można zaszczepić z niemal dowolnej części ciała. Techniki takie są wygodne do wyszukiwania i identyfikacji bakterii i grzybów; wykrywanie wirusów w ten sposób jest znacznie trudniejsze, co wynika ze specyfiki biologii wirusów.

Kultury bakteriologiczne pozwalają nie tylko określić rodzaje drobnoustrojów wywołujących określoną chorobę, ale także wybrać skuteczne antybiotyki(określ wrażliwość drobnoustrojów na nie), co pomoże w powrocie do zdrowia. Przed rozpoczęciem antybiotykoterapii należy jedynie pobrać próbkę materiału. Posiew bakteriologiczny można zlecić zarówno w klinice (na przykład dobrze znane badanie kału na dysbakteriozę), jak i w szpitalu (na przykład w przypadku infekcji jelitowych, a także w przypadku trudno dostępnego materiału biologicznego, takiego jak płyn mózgowo-rdzeniowy). Po pobraniu materiału od pacjenta umieszcza się go na specjalnych pożywkach, a wyniki ocenia się po 3-10 dniach. Specjaliści z jego laboratorium mikrobiologicznego potrafią rozpoznać (zidentyfikować) drobnoustroje na podstawie cech morfologicznych, kulturowych i biochemicznych. Morfologię (strukturę) „szkoda” bada się pod mikroskopem; właściwości kulturowe charakteryzują się potrzebami, warunkami i rodzajem wzrostu mikroorganizmów na pożywkach. Charakterystyka biochemiczna określany jest przez zestaw enzymów syntetyzowanych przez drobnoustrój w procesie życiowym. Zwracają także uwagę na pigmenty barwiące kolonie mikroorganizmów i pożywki, na przykład złoty pigment tworzy Staphylococcus aureus.

Rodzaje analiz

Bakteriologiczne badanie krwi

Wskazania: podejrzenie zatrucia krwi; przez długi czas podniesiona temperatura, którego przyczyny nie można ustalić; podejrzenie niektórych chorób zakaźnych (na przykład infekcji jelitowych, epidemicznego zapalenia opon mózgowo-rdzeniowych, gronkowców i zakażenia paciorkowcami). Krew pobiera się w momencie maksymalnego wzrostu temperatury (w tym okresie jest szczególnie duże stężenie mikroorganizmów we krwi), przed przyjęciem antybiotyków (jeśli nie postawiono jeszcze diagnozy) lub po 10–14 dniach od przyjęcia antybiotyków (w celu monitorować wyniki leczenia). Krew pobierana jest przy łóżku pacjenta lub w garderobie i natychmiast posiewana na pożywkę. Jednorazowe badanie krwi jest nieskuteczne, jeśli zostanie wykryte warunkowo patogeny, żyjące na ludzkiej skórze i kiedy określone warunki(ze spadkiem siły ochronne organizm), które mogą wywołać chorobę, bez powtarzanych badań trudno jest zrozumieć prawdziwość wyników. Dlatego w pewnym okresie czasu można przeprowadzić serię 3 lub więcej badań. Aby to stwierdzić w w tym przypadku czynnikiem sprawczym jest dowolny drobnoustrój, pozwala na szybkie (w ciągu 48 godzin) wykrycie drobnoustroju, wielokrotną izolację z krwi lub jednoczesną izolację z innego rodzaju materiału badawczego (krew i mocz, krew i plwocina itp.), ponadto jego jednoczesne wykrywanie na różnych pożywkach.

Wydzielina, wymazy z górnych dróg oddechowych

Wskazania: choroby zapalne górne drogi oddechowe i zapalenie płuc bez plwociny, rozpoznanie choroba zakaźna dróg oddechowych (błonica, krztusiec, szkarlatyna), diagnostyka nosicielstwa bakterii u meningokoków, błonicy i zakażenia gronkowcowe. Materiał pobiera się z przewodów nosowych suchym sterylnym wacikiem, a z gardła za pomocą zwilżonego sterylnego wacika. Wymazy z nosa i gardła pobiera się różnymi wymazami. Materiał z gardła i migdałków pobiera się na czczo przed wykonaniem zabiegów higienicznych lub nie wcześniej niż 3–4 godziny po jedzeniu. Podczas pobierania wymazu z tylnej części gardła i migdałków nie należy dotykać wymazem języka, błony śluzowej policzków ani zębów, dlatego rodzice muszą stworzyć warunki, aby pielęgniarka wygodnie było pracować z dzieckiem - lepiej powiedzieć z wyprzedzeniem, że procedura będzie bardzo krótka, ale możliwe będzie złapanie drobnoustroju żyjącego w ustach dziecka, ale w tym celu musi otworzyć usta i nie ruszać się kilka sekund (kilka odliczeń).

Badanie bakteriologiczne moczu

Wskazania: choroby zapalne nerek i pęcherza moczowego oraz kontrola po leczeniu, diagnostyka chorób zakaźnych (dur brzuszny, leptospiroza). Przed rozpoczęciem antybiotykoterapii przeprowadza się badanie flory moczu. Do sterylnego pojemnika zbiera się przeciętną porcję swobodnie uwolnionego moczu (3–5 ml). Środkowa część moczu jest najmniej zanieczyszczona drobnoustrojami, jakie mogą znajdować się na zewnętrznych narządach płciowych; jej badanie daje bardziej obiektywny obraz stanu nerek, dróg moczowych. Najlepiej używać poranny mocz zawierający największa liczba bakteria. Przed pobraniem materiału konieczna jest dokładna toaleta zewnętrznych narządów płciowych. Chłopcy powinni odsłonić główkę penisa (chyba, że ​​są obrzezani) i wypuścić niewielką ilość moczu; następnie oddaj porcję moczu do sterylnego pojemnika (nie zbieraj ostatniej części), zamknij pojemnik i przenieś do laboratorium. W przypadku dziewcząt umyj genitalia ciepłą wodą. woda mydlana, w kierunku od przodu do tyłu; ponownie przepłucz genitalia ciepła woda i wytrzeć sterylną szmatką. Zbierz średnią próbkę moczu do sterylnego pojemnika (należy go pobrać z laboratorium). Mocz przed badaniem można przechowywać nie dłużej niż 1–2 godziny w temperaturze pokojowej i nie dłużej niż jedną dobę w lodówce, gdyż istnieje ryzyko rozwoju bakterii i zniekształcenia wyników badania.

Wydzielina z rany

Wskazania: oznaki procesu ropno-zapalnego w ranie. Materiał pobiera lekarz. Skórę wokół rany traktuje się środkiem antyseptycznym, a ropę usuwa się sterylną serwetką. Materiał pobiera się sterylnym wacikiem. Jeżeli w ranie znajdują się dreny (rurki, którymi przepływa zawartość rany), wydzielinę z nich zasysa się strzykawką w ilości 1–2 ml i umieszcza w sterylnej rurce.

Badanie bakteriologiczne kału

Wskazania: diagnostyka infekcji jelitowych, kontrola przy wypisie pacjentów z ostrym zapaleniem jelit infekcje jelitowe(czerwonka, salmonelloza itp.) ze szpitala, diagnostyka przewlekłe dysfunkcje jelita, diagnostyka dysbiozy jelitowej, identyfikacja nosicieli bakterii. Materiałem do badania może być kał uzyskany podczas naturalnego wypróżniania lub przy użyciu specjalnych tamponów (pętli). Do pobrania materiału poprzez naturalną defekację należy używać dokładnie umytego i pozbawionego śladów. środki dezynfekcyjne naczynia lub garnki. Na dnie naczynia można położyć arkusz czystego papieru, aby zabezpieczyć materiał przed śladami środka dezynfekcyjnego. Próbkę kału pobiera się bezpośrednio po wypróżnieniu za pomocą sterylnego pręta szklanego, pętli drucianej, drewnianej szpatułki lub specjalnej łyżki umieszczonej w pokrywie sterylnego pojemnika, którą można uzyskać w laboratorium. Jeśli występuje śluz, ropa lub inne wtrącenia, należy wybrać obszary zawierające te zanieczyszczenia, ale wolne od krwi. Pobieranie materiału z odbytnicy za pomocą tamponów (pętli) doodbytniczych przeprowadza pielęgniarka. Dziecko proszone jest o położenie się na boku z biodrami przyciągniętymi do brzucha i rozłożonymi pośladkami dłońmi. Włożona jest pętla (tampon). odbyt na głębokość 5–6 cm Materiał zbiera się do pustych sterylnych pojemników lub probówek z dodatkiem środka konserwującego. Jeżeli nie stosuje się środka konserwującego, czas do rozpoczęcia badania bakteriologicznego w żadnym wypadku nie powinien przekraczać 2 godzin. Wykrycie nawet patogennych mikroorganizmów w kale nie zawsze wskazuje na obecność choroby, ale może wynikać z nosicielstwa bakterii. Dlatego ocenę wyników należy przeprowadzić z uwzględnieniem objawów choroby. Aby prawidłowo ocenić wyniki, zaleca się przeprowadzenie 2-3 badań w odstępie 1-2 dni. Rozpoznanie dysbiozy jelitowej przeprowadza się na podstawie oceny jakościowych i ilościowych zmian w składzie mikroflory jelita grubego. Należy pamiętać, że ważny jest nie tylko stan flory bakteryjnej jelit w danym momencie, ale także zmiany zachodzące w jelicie. Dlatego dla dokładniejszej oceny stanu mikroflora jelitowa badanie również należy powtórzyć kilka razy. Na wiarygodność uzyskanych wyników duży wpływ ma przestrzeganie terminów transportu materiału. W niektórych przypadkach, gdy dotrzymanie tych terminów jest nierealne, należy albo odmówić określenia liczby bakterii, albo ostrożnie podchodzić do informacji o zmniejszaniu ich liczby.

Trunek

Wskazania: podejrzenie zapalenia opon mózgowo-rdzeniowych (zapalenie tkanek miękkich). opony mózgowe). CSF (płyn mózgowo-rdzeniowy) uzyskuje się poprzez nakłucie lędźwiowe(pobranie płynu mózgowo-rdzeniowego z kanału rdzeń kręgowy), rzadziej z nakłuciem bocznych komór mózgu (w tym przypadku płyn mózgowo-rdzeniowy uzyskuje się z tak zwanych komór mózgu, wykonując nakłucie za zewnętrzną kanał uszny). Płyn mózgowo-rdzeniowy pobiera lekarz; zabieg ten zawsze przeprowadza się wyłącznie w szpitalu. Alkohol jest zwykle sterylny, więc fakt znalezienia jakiegokolwiek mikroorganizmu może być znaczący. U dzieci zapaleniu opon mózgowo-rdzeniowych często towarzyszy bakteriemia - obecność patogenu we krwi, dlatego przeprowadza się jednoczesne badanie krwi i płynu mózgowo-rdzeniowego.

Wyniki badań bakteriologicznych

Tylko lekarz może prawidłowo odczytać wynik testu. W niektórych przypadkach nie liczy się sam fakt wykrycia określonych mikroorganizmów, ale ich ilość. Często ilość odgrywa również rolę w rokowaniu choroby i charakterze leczenia. I tak na przykład w pęcherz moczowy Zwykle mocz jest sterylny, ale podczas przejścia przez dolną jedną trzecią cewki moczowej wchodzi w kontakt normalna mikroflora i dostępność proces patologiczny mówią tylko wtedy, gdy miano patogenu (jego ilość) przekracza 10 4 CFU/ml. Ocena liczby mikroorganizmów w wydzielinie z rany jest istotna dla przewidywania przebiegu procesu. Ustalono, że gdy poziom skażenia mikrobiologicznego rany przekracza 105 komórek ( komórki drobnoustrojów) na 1 g tkanki (na 1 ml wydzieliny) ropienie rozwija się nawet w żywych tkankach. Jeśli w ranie znajduje się martwa tkanka, krwiaki, ciała obce rozwój proces ropny możliwe z większą ilością niskie poziomy zanieczyszczenie. Ponadto, przy stężeniu skażenia rany większym niż 105 komórek na 1 g wydzieliny z rany, ryzyko rozwoju sepsy gwałtownie wzrasta. Na podstawie wyników badania schematy leczenia są zmieniane w taki czy inny sposób. Podsumowując, zauważamy, że wynik jakiejkolwiek analizy, w tym bakteriologicznej, może być błędny, dlatego lekarz może przepisać badania potwierdzające lub wyjaśniające, na przykład reakcję łańcuchową polimerazy (PCR) w celu ustalenia DNA patogenu itp.

Klasyczne badanie bakteriologiczne jest „złotym” standardem diagnostyki mikrobiologicznej.

Celem badań bakteriologicznych jest wyizolowanie czystej kultury patogenu i jego identyfikacja.

Algorytm badań bakteriologicznych:

Mikroskopia pierwotna badanego materiału (etap opcjonalny, w zależności od charakteru materiału);

Siew pierwotny w celu wyizolowania czystej kultury;

Akumulacja czystej kultury;

Badanie kompleksu właściwości biologiczne wybrana kultura;

Ostateczna identyfikacja patogenu.

Pierwszy dzień studiów

1. Pierwotna mikroskopia

Wynik pierwotnej mikroskopii daje przybliżone wyobrażenie o obecności różnych formy morfologiczne mikroorganizmów, a także pozwala na ich pierwotną identyfikację na podstawie właściwości morfologicznych i barwiących oraz dobór pożywek do pierwotnego zaszczepienia.

Ropna wydzielina - wymagana jest pierwotna mikroskopia.

Płyn mózgowo-rdzeniowy- wymagana jest pierwotna mikroskopia osadu.

Plwocina - pierwotną mikroskopię przeprowadza się z rozcieńczeń 10 4 -10 5.

Wymazy z gardła i nosa – nie wykonuje się pierwotnej mikroskopii.

Krew - nie wykonuje się mikroskopii pierwotnej.

Kał - nie wykonuje się pierwotnej mikroskopii.

2. Siew pierwotny

Materiał do badań po mikroskopii pierwotnej lub bez niej (kał, mocz, wymazy z nosa i gardła, krew) posiewa się na odpowiednie podłoża w celu wyizolowania czystej kultury:

Bulion cukrowy, agar z krwią - dla paciorkowców;

Agar żółtkowo-solny, agar z krwią - dla gronkowców;

Podłoże Endo – dla bakterii z rodziny Enterobacteriaceae;

MPA (agar z peptonem mięsnym) - dla bakterie Gram-ujemne;

MPA (wysiew metodą Shukevicha) - do izolacji Proteusa;

Podłoże Kitta-Tarozzi – do izolacji beztlenowców;

Pożywka Sabourauda - do izolacji grzybów.

Wysiew jest pierwszym etapem badania bakteriologicznego (w przypadku niewykonania pierwotnej mikroskopii).

Siew jest przeprowadzany w następujący sposób:

Siew smugą i wypalaniem pętli. Materiał pobiera się za pomocą kalcynowanej ezy bakteriologicznej i górne pole kubka gęsto zaszczepia się smugą. Następnie pętlę ponownie kalcynuje się i wprowadza do gęsto posianego sektora, a na całej misce rysuje się 2-3 pionowe linie. Następnie kubek zostaje odwrócony, gęsto obsadzony sektor pozostaje na dolnym polu kubka. Pętlę ponownie podgrzewa się, a siew rozprowadza się po kubku 2-3 poziomymi pociągnięciami.

Siew szpatułką. Materiał nanosi się na powierzchnię podłoża za pomocą szpatułki lub pipety, a następnie rozprowadza szpatułką po całej powierzchni.

Siew za pomocą wacika. W celu posiewu wacik z materiałem badawczym umieszcza się w kubku i jego zawartość wciera się okrężnymi ruchami w pożywkę.

Siew według sektorów. Podczas tego siewu spód kubka jest wciągany w sektory, siew odbywa się przerywanymi ruchami od krawędzi kubka do środka i wzdłuż sektorów.

Dzień 2 badania

1. Zarejestrować wzrost na pożywce jako jednorodny lub niejednorodny.

2. Przeprowadzić opis dóbr kultury.

Algorytm opisu kolonii

W wyniku wzrostu na pożywce powstają kolonie (potomkowie jednej komórki). Wyizolowane kolonie są wybierane i badane – rozpoczyna się drugi etap badań, mający na celu zbadanie właściwości kulturowych bakterii. Znajomość tych właściwości jest konieczna do identyfikacji powstałej czystej kultury, ponieważ każdy rodzaj mikroorganizmu rosnący na określonej pożywce odpowiada określonym właściwościom kulturowym.

Badanie kolonii:

Makroskopowo: gołym okiem w świetle przechodzącym i odbitym;

Mikroskopowo: przy małym powiększeniu systemu suchego mikroskopu.

W świetle przechodzącym badają:

Wielkość kolonii (duża, średnia, mała, karłowata);

Kształt kolonii (regularny, nieregularny, okrągły);

Przezroczystość kolonii (przezroczysta, nieprzezroczysta).

W świetle odbitym określ:

Kolor (bezbarwny lub kolorowy);

Charakter powierzchni (gładka, wyboista, błyszcząca, szorstka);

Wysokość kolonii nad powierzchnią podłoża (obniżona, płaska, podwyższona).

Ocenić mikroskopowo:

Krawędź (gładka, nierówna);

Struktura (jednorodna, niejednorodna).

Badanie kolonii kończy się wykonaniem rozmazu, barwieniem metodą Grama i mikroskopią.

Pobierając materiał z rodziny do przygotowania rozmazu ocenia się jego konsystencję (miękka, śluzowata, sucha).

Jeśli pod mikroskopem kultura okaże się czysta, wówczas przenosi się ją na skośny agar w celu akumulacji.

Dzień 3 badania

1. Opis wzorca wzrostu na skosie agarowym:

Jednorodny, niejednorodny;

Wzdłuż skoku, ciągły, ciągły.

2. Sprawdzenie czystości zgromadzonej kultury. Przygotowuje się rozmazy, barwi je metodą Grama i bada pod mikroskopem. Jeśli zgromadzono czystą kulturę, podlega ona dalszej identyfikacji. Identyfikacja bakterii do rodzaju i gatunku opiera się na badaniu cech metabolicznych – identyfikacji biochemicznej i struktury antygenowej – identyfikacji serologicznej.

3. Badanie właściwości biochemicznych. Właściwości biochemiczne – zdolność bakterii do rozkładania określonych substratów poprzez produkcję odpowiednich enzymów. Do badania właściwości biochemicznych stosuje się zróżnicowane podłoża diagnostyczne zawierające różne substraty (różne serie). Należą do nich pożywki Hiss z węglowodanami, mleko lakmusowe, żelatyna, pożywki z aminokwasami, MPB (bulion mięsno-peptonowy) ze wskaźnikami siarkowodoru i indolu.

Właściwości sacharylityczne bada się na podłożu Hiss. Zawierają wodę peptonową, substrat węglowodanowy (różne mono- i polisacharydy), alkohole wielowodorotlenowe oraz wskaźnik.

Jeśli bakterie mają enzymy rozkładające substrat węglowodanowy, uwalniają produkty przemiany materii (kwas lub kwas i gaz). Gdy tworzy się kwas, wskaźnik zmienia kolor ośrodka; gdy tworzy się gaz, rejestrowane są pęknięcia w ośrodku.

Właściwości proteolityczne bada się poprzez hodowlę na żelatynie i mleku lakmusowym. Jeśli bakterie mają proteazy, żelatyna upłynnia się. W mleku pojawia się kremowy skrzep, a nad nim ciecz - peptonizacja mleka (ze względu na to, że proteazy bakteryjne rozkładają kazeinę mleczną na pepton).

Właściwości peptydolityczne. Częściej bakterie potrafią rozkładać pośrednie produkty rozkładu białek – peptony. Produkty tego procesu: aminy (skatol, indol), aminokwasy, gazy (siarkowodór, amoniak, dwutlenek węgla). Można je wykryć za pomocą papierka wskaźnikowego:

Test lakmusowy - w celu wykrycia amoniaku;

Zwilżony kwasem szczawiooctowym – w celu wykrycia indolu;

Zwilżony octanem ołowiu - w celu wykrycia siarkowodoru. Produkty deaminacji i dekarboksylacji aminokwasów wykrywa się za pomocą pasków testowych, które zmieniają kolor pod wpływem zmiany pH podłoża.

Dzień 4 badania

1. Zapisz wyniki badań biochemicznych. Po zidentyfikowaniu kultury do gatunku bada się szereg dodatkowych cech, takich jak wrażliwość na antybiotyki, toksyczność, obecność czynników zjadliwości, profil plazmidowy i różnicowanie wewnątrzgatunkowe.

2. Wyniki identyfikacji biochemicznej stanowią podstawę identyfikacji serologicznej. Identyfikację serologiczną wyizolowanej hodowli przeprowadza się w reakcji aglutynacji szkła przy użyciu odpowiednich surowic immunoadsorbowanych, których wybór zależy od wyników identyfikacji biochemicznej.

Różnicowanie wewnątrzgatunkowe - określenie, czy szczep należy do konkretnego fagowara, bakteriocynogenowara, bakteriocynowara, biowaru, rezystowaru itp. Pozwala na identyfikację powiązań epidemiologicznych pomiędzy szczepami tego samego gatunku.

Identyfikacja wyizolowanej kultury pozwala wyciągnąć wniosek, który mikroorganizm służy czynnik etiologiczny choroby. Podczas izolowania warunkowego bakterie chorobotwórcze konieczne jest spełnienie kryteriów znaczenia etiologicznego:

Obecność bakterii w materiale z ogniska patologicznego w ilości co najmniej 10 5 CFU ml/g;

Powtarzająca się izolacja od materiału tej samej kultury;

Wzrost miana przeciwciał w surowicy krwi pacjenta przeciwko autoszczepowi 4-krotnie lub więcej.

Oznaczanie fagów bakteryjnych (typowanie fagów)

Identyfikację fagowarów przeprowadza się według wskazań epidemiologicznych w celu ustalenia powiązań epidemiologicznych pomiędzy chorymi. Aby przeprowadzić badanie, należy wziąć szalki Petriego z MPA, osuszyć powierzchnię, narysować spód w kwadraty i zaznaczyć je. Następnie 3-4-godzinną hodowlę w bulionie zaszczepia się trawnikiem, suszy i na każdy kwadrat nanosi się kroplę odpowiedniego standardowego faga w rozcieńczeniu roboczym. Uprawy umieszcza się w termostacie na jeden dzień. Po 24 godzinach uwzględnia się spektrum wrażliwości hodowli na określone fagi w wyniku działania litycznego.

oznaczanie bakteriocynovara

Aby określić bakteriocynovar, określa się wrażliwość badanych szczepów na bakteriocynovar referencyjny. Podobnie jak typowanie fagowe, przeprowadza się je według wskazań epidemiologicznych.

W celu przeprowadzenia badania na pożywce wysiewa się odpowiednie standardowe kultury produkujące typowe bakteriocyny. Uprawy umieszcza się w termostacie w temperaturze 37°C na 48 godzin.

Wyrosłe kolonie kultur wskaźnikowych inaktywuje się chloroformem, po czym na powierzchnię wylewa się 2-4 ml stopionego agaru, do którego najpierw dodaje się 0,2 ml badanej 4-godzinnej hodowli bulionowej. Po stwardnieniu agaru plony ponownie umieszcza się w termostacie na 18-24 godziny. Po upływie określonego czasu uwzględnia się obecność stref zahamowania wzrostu wokół kultur wskaźnikowych, określając w ten sposób bakteriocynotyp badanych bakterii.


©2015-2019 strona
Wszelkie prawa należą do ich autorów. Ta witryna nie rości sobie praw do autorstwa, ale zapewnia bezpłatne korzystanie.
Data utworzenia strony: 27.04.2016

Za zdobycie wiarygodny wynik analizę należy przeprowadzić co najmniej 2 tygodnie po przyjęciu ostatniej dawki antybiotyków i (lub) leków przeciwbakteryjnych.

  • Zeskrobywanie z cewka moczowa Zaleca się wykonanie testu 2 godziny po ostatnim oddaniu moczu, od gardło i nosogardło – na czczo (4-5 godzin po ostatnim posiłku, w tym przypadku należy wykluczyć mycie zębów i płukanie jamy ustnej), w pozostałych lokalizacjach specjalny trening nie wymagane.
  • Mocz. Badaniom poddawana jest średnia porcja swobodnie uwolnionego moczu w ilości 3-5 ml w sterylnym plastikowym pojemniku jednorazowym (pojemnik można otrzymać w recepcji) po dokładnej toalecie zewnętrznych narządów płciowych bez użycia środków antyseptycznych . Czas dostawy do laboratorium w temperaturze pokojowej wynosi 1-2 godziny, w temperaturze 2-8°C – 5-6 godzin.
  • Sperma do badań bakteriologicznych pobiera się ją do sterylnego plastikowego pojemnika jednorazowego użytku z szeroką szyjką poprzez masturbację (pojemnik można otrzymać w recepcji). Czas dostarczenia materiału do laboratorium w temperaturze pokojowej wynosi 1-2 godziny.
  • Plwocina Zaleca się pobierać rano, na czczo, po oczyszczeniu Jama ustna do sterylnego plastikowego pojemnika. Czas dostarczenia materiału do laboratorium w temperaturze pokojowej wynosi 1-2 godziny, w temperaturze 2-8°C - 5-6 godzin.
  • Ogrodzenie sekret prostata wykonywany przez urologa po wstępnym masażu prostaty (manipulacja ta wykonywana jest wyłącznie w Centrali). Zaleca się przed pobraniem wydzieliny prostaty abstynencja seksualna przez co najmniej 2 dni.
  • Badania bakteriologiczne mleko matki . Mleko matki pobiera się dopiero przed karmieniem dziecka lub dwie godziny po karmieniu. Badana pacjentka myje swoją lewą i prawą stronę sutek ciepłą wodą z mydłem i wytrzeć do sucha czystym ręcznikiem. Powierzchnię sutków i opuszków palców potraktuj wacikiem umiarkowanie zwilżonym 70% alkoholem etylowym. Pierwszą porcję mleka matki, około 0,5 ml, należy wyrzucić. Następnie, nie dotykając brodawki rękami, kobieta odciąga 0,5 – 1 ml mleka z każdego gruczołu do osobnego sterylnego pojemnika (pojemniki można otrzymać w recepcji). Czas dostawy do laboratorium w temperaturze pokojowej wynosi 1-2 godziny, w temperaturze 2-8°C – 5-6 godzin.
  • Ogrodzenie z nowy płyn badanie bakteriologiczne przeprowadzane jest przez lekarza w sterylnym, plastikowym pojemniku (pojemnik można otrzymać w recepcji). Procedura ta nie jest wykonywana w warunkach laboratoryjnych. Czas dostarczenia materiału do laboratorium w temperaturze pokojowej wynosi 1-2 godziny, w temperaturze 2-8°C - 5-6 godzin.
  • Ogrodzenie wydzielina z rany badanie bakteriologiczne przeprowadza lekarz, w jednorazowym pojemniku z pożywką Amesa (pojemnik można otrzymać w recepcji). Czas dostarczenia materiału do laboratorium w temperaturze pokojowej wynosi 6 godzin, w temperaturze 2-8°C – do 2 dni.
  • Żółć do badań bakteriologicznych pobiera się go podczas sondowania oddzielnie w porcjach A, B i C do trzech sterylnych probówek lub podczas zabiegu operacyjnego za pomocą strzykawki do jednej probówki, zachowując zasady aseptyki (procedura ta nie jest wykonywana w laboratorium). Czas dostarczenia materiału do laboratorium w temperaturze pokojowej wynosi 1-2 godziny, w temperaturze 2-8°C - 5-6 godzin.

Badania bakteriologiczne to badania mające na celu wyizolowanie i zbadanie ich właściwości w celu postawienia diagnozy mikrobiologicznej.

Materiał do badań należy pobrać w warunkach aseptycznych do sterylnych pojemników i jak najszybciej dostarczyć do laboratorium. Jeśli to konieczne, próbki należy przechowywać w lodówce. Technika pobierania próbek zależy od obiektu, charakteru choroby i właściwości mikroorganizmu. Jedną z powszechnych metod badań bakteriologicznych jest bakterioskopia.

Do badania nieutrwalonych bakterii stosuje się dwie metody: rozdrobnioną kroplę (między szkiełkiem nakrywkowym a szkiełkiem nakrywkowym) i . Należy pamiętać, że preparaty nieutrwalonych bakterii są zakaźne.

Do bakterioskopii preparatów utrwalonych stosuje się rozmazy. Aby je przygotować, kroplę cieczy testowej rozprowadza się po powierzchni szkiełka, a następnie suszy. Najczęstszą metodą utrwalania leku jest przepuszczenie go przez płomień palnika gazowego. W niektórych przypadkach stosuje się środki utrwalające. Preparaty utrwalone są zazwyczaj barwione (patrz Barwienie mikroorganizmów). Do numeru niezbędne elementy Badania bakteriologiczne obejmują inokulacje i subhodowle wykonywane za pomocą ezy bakteryjnej lub pipety Pasteura. Pętlę sterylizuje się poprzez wyżarzanie w płomieniu, następnie schładza poprzez dotknięcie powierzchni niezaszczepionego agaru lub płukanie sterylny płyn. Używając pipety Pasteura, należy odłamać końcówkę pęsetą, kilka razy przepuścić pipetę przez płomień palnika i poczekać, aż ostygnie. Podczas siewu stosuje się płynne i stałe pożywki. Po wysianiu na skośnym agarze kulturę bakteryjną pociera się pętelką po powierzchni agaru. Podczas wysiewu na grubość kolumny agarowej lub żelatynowej pożywkę wbija się w dno probówki za pomocą pętli lub specjalnej igły. Przy wysiewie w podłożu płynnym należy uważać, aby płyn nie rozlał się i nie zamoczył brzegów tub i zatyczek. Szczepienia i podhodowle należy wykonywać w pobliżu płomienia palnika gazowego, probówki nie powinny długo pozostawać otwarte, pętla lub pipeta Pasteura z kulturą nie powinny niczego dotykać; Przed zamknięciem probówki krawędzie należy wypalić. Zaszczepione probówki należy natychmiast oznaczyć.

Najważniejszym etapem badań bakteriologicznych jest identyfikacja – określenie gatunku lub rodzaju bakterii uzyskanych w postaci czystej kultury. Podczas identyfikacji bakterii bada się ich właściwości fizjologiczne i biochemiczne oraz powstawanie toksyn. Serologiczne metody identyfikacji bakterii (reakcji i) są szeroko stosowane. W wielu przypadkach skuteczna jest biologiczna metoda identyfikacji drobnoustrojów, polegająca na zakażaniu zwierząt laboratoryjnych badanym materiałem lub powstałą hodowlą bakteryjną i identyfikacji charakterystycznych zmian patologicznych u zwierząt.

Do izolacji czystych kultur stosuje się metody mechaniczne i biologiczne. Przykład metody mechanicznej: kroplę badanego materiału rozciera się tą samą sterylną szpatułką lub pętlą bakteryjną na powierzchni gęstej pożywki, kolejno w pierwszej, drugiej i trzeciej fazie. Izolacja czystej kultury przeprowadzana jest z wyhodowanych pojedynczych kolonii i polega na ich badaniu i przesiewaniu na świeżej pożywce. Biologiczne metody izolacji czystych kultur opierają się na uwzględnieniu tej lub innej właściwości izolowanego drobnoustroju, która odróżnia go od innych drobnoustrojów występujących w badanym materiale.

W metodzie biologicznej wykorzystuje się takie pożywki, w których tworzone są warunki sprzyjające rozwojowi. pewien typ mikroby Do metod biologicznych zalicza się także infekcję zwierząt laboratoryjnych wrażliwych na izolowane gatunki bakterii.

Badania bakteriologiczne – zestaw metod identyfikacyjnych mikroorganizmy chorobotwórcze u pacjenta, w nosidełku lub na przedmiotach otoczenie zewnętrzne. Badania bakteriologiczne służą również do wykrywania drobnoustrojów oportunistycznych i sanitarno-indykacyjnych, które charakteryzują stopień zanieczyszczenia środowiska zewnętrznego, do badania krajobrazu mikrobiologicznego określonego środowiska (obiektu). Badania bakteriologiczne mogą być wykorzystywane do diagnostyki, zapobiegania chorobom zakaźnym, do badania cech sanitarno-higienicznych środowiska człowieka, do badań naukowych.

Materiał i metoda badań bakteriologicznych zależą od celu analizy, warunków środowiskowych, patogenezy i przebiegu choroby. Jeżeli występuje bakteriemia, drobnoustroje wykrywa się na podstawie posiewu krwi. W przypadku wyraźnych zmian miejscowych patogenu należy szukać w wydzielinie lub wydzielinie zajętego narządu (błonica, czerwonka, rzeżączka itp.). Wreszcie w chorobach o złożonym przebiegu, gdy (jak na przykład w przypadku duru brzusznego) bakteriemię zastępuje się zmianami chorobowymi jelita cienkie na każdym etapie stosuje się odpowiednią metodę badawczą: w pierwszym tygodniu choroby wykonuje się posiew krwi, w drugim, najbardziej wiarygodnie badanie serologiczne począwszy od trzeciego tygodnia uzyskuje się wynik pozytywny poprzez posiew kału; Ta ostatnia metoda stosowana jest również jako badanie kontrolne w celu wykrycia nosicieli bakterii wśród rekonwalescentów i ich monitorowania.

Każde z tych zadań realizowane jest przy wykorzystaniu metod przeznaczonych do izolacji i oznaczania mikroorganizmów. W zależności od charakterystyki drobnoustroju stosuje się cały zestaw metod lub ich części.

Najbardziej dostępną techniką, polegającą na badaniu mikroskopowym materiału, jest bakterioskopia. Podczas mikroskopii świeżych preparatów można zastosować pewne reakcje mikrochemiczne (na przykład barwienie bakterii jodofilnych roztworem Lugola) lub selektywne barwienie różnych części strukturalnych bakterii.

Bakterie można łatwiej zidentyfikować w kolorowym preparacie. Na materiał testowy nakłada się slajd cienką i możliwie równą warstwą. Pozostawić preparat do wyschnięcia na powietrzu i utrwalić jedną z ogólnie przyjętych metod, ale najczęściej poprzez opalanie, czyli szybkie dwu-, trzykrotne przesunięcie preparatu nad płomieniem palnika, tak aby szkło było ciepłe, ale nie gorące. Preparat schłodzony po utrwaleniu barwi się barwnikiem prostym lub różnicowym (patrz Barwienie mikroorganizmów). Do mikroskopii fluorescencyjnej stosuje się zarówno preparaty natywne, jak i suche. W tym przypadku obróbka określonymi barwnikami powoduje, że struktury organizmu drobnoustroju lub całego drobnoustroju świecą w ultrafiolecie lub krótkich promieniach niebieskich. W innej modyfikacji drobnoustroje traktuje się specyficznymi surowicami znakowanymi środkami fluorescencyjnymi (barwnikami). Bakterie pasujące do surowicy będą świecić, gdy osadzi się na nich oznakowane serum. Bakterie heterologiczne nie będą świecić.

Metoda bakterioskopowa znajduje szerokie zastosowanie w diagnostyce bakteriologicznej niektórych chorób zakaźnych (rzeżączka, gruźlica, nawracająca gorączka), a także podczas badania całego kompleksu mikroflory narządu (migdałki, pochwa), produktu lub innego przedmiotu.

Metoda wysiewu, czyli wyizolowanie czystej kultury pożądanego drobnoustroju, jest dokładniejszą i bardziej wiarygodną metodą diagnostyki bakteriologicznej niż bakterioskopia. Świeży materiał rozprowadza się na powierzchni gęstej pożywki wlewanej do szalek Petriego. Posiew pierwotny przeprowadza się na podłożach zwykłych, korzystnych dla danego drobnoustroju, na podłożach różnicujących lub selektywnych. Wybór pożywki (patrz), a także sposób przygotowania świeżego materiału do siewu, zależy od stopnia jego zanieczyszczenia towarzyszącą obcą mikroflorą. Za 24-48 godzin. trzymane w termostacie w temperaturze optymalnej dla danego drobnoustroju, kubki są badane, a podejrzane kolonie hodowane są na podłożach sprzyjających namnażaniu się tego patogenu. W ten sposób uzyskuje się hodowlę jednorodnych bakterii, które należy zidentyfikować.

Identyfikacja drobnoustroju rozpoczyna się od zbadania jego morfologii w kolorowym preparacie i pokruszonej kropli (patrz), aby określić kształt drobnoustrojów i ich ruchliwość. Następny krok to badanie enzymatycznej zdolności bakterii do rozkładania węglowodanów, aminokwasów i mocznika w kombinacjach specyficznych dla każdego typu. U bakterii najczęściej badane są cukry i enzymy proteolityczne.

Identyfikację drobnoustroju należy uzupełnić badaniem innych właściwości charakterystycznych dla każdego rodzaju i typu mikroorganizmów. Właściwości te obejmują zdolność do selektywnego rozpuszczania czerwonych krwinek różnych zwierząt (hemoliza), krzepnięcia osocza krwi (koagulacja plazmy), rozpuszczania skrzepu fibrynowego (fibrynoliza) itp. Wszystkie te cechy bakterii można wykorzystać do ich oznaczania jako cechy różnicowe .

Ostateczna identyfikacja niektórych gatunków drobnoustrojów, głównie chorobotwórczych bakterii z grupy coli, obejmuje identyfikację serologiczną (patrz Identyfikacja drobnoustrojów). Zwykle w tym celu przeprowadza się reakcję aglutynacji, czyli wykrywa się stłoczenie bakterii pod wpływem surowicy odpornościowej o tej samej nazwie. Aglutynacja drobnoustrojów w surowicy przeciwko konkretnemu gatunkowi wskazuje na przynależność do tego gatunku. Zwykle reakcję aglutynacji przeprowadza się w przybliżeniu na szkle, a do ostatecznego oznaczenia w probówkach z rozcieńczeniami surowicy.

W opisany sposób nie można w pełni zidentyfikować wielu drobnoustrojów. Wówczas identyfikację należy uzupełnić zakażeniem zwierząt laboratoryjnych, gdyż niektóre bakterie charakteryzują się patogenicznością lub toksycznością, która ujawnia się w przypadku zakażenia zwierząt. W niektórych przypadkach infekcja zwierząt służy również jako metoda gromadzenia się drobnoustrojów chorobotwórczych.

Podstawą identyfikacji może być jedynie porównanie wszystkich cech kultury zebranych podczas badania jej morfologii, właściwości biochemicznych, serologicznych i, jeśli to konieczne, biologicznych. Odpowiedz kiedy wynik pozytywny badania nie są trudne, jeśli wyizolowany drobnoustrój jest typowy. W takim przypadku należy wskazać rodzaj, gatunek i, jeśli zostało to określone, rodzaj bakterii. W przypadku wyizolowania drobnoustroju, który odbiega pod pewnymi właściwościami od typowej cechy, udzielana jest odpowiedź wskazująca na odbiegającą od niej cechę. W takim przypadku celowe jest powtórzenie badania, jeśli pozwala na to przebieg choroby lub warunki pobrania materiału. Przydatne jest także poddanie hodowli drobnoustrojów atypowych dodatkowym badaniom z wykorzystaniem innych, bardziej złożonych metod.

Ujemne wyniki badania bakteriologicznego mają znaczenie względne i pokazują jedynie, że badana porcja materiału nie zawierała wymaganych drobnoustrojów lub była nieżywotna. Mogą jednak występować w innej części. Dlatego na przykład podczas badania na obecność prątków ( dur brzuszny, czerwonka, błonica) wymagane są powtarzalne badania.