Powyżej schematyczne przedstawienie komórki Itoh (HSC) sąsiadującej z pobliskimi hepatocytami (PC), poniżej sinusoidalnych komórek nabłonka wątroby (EC). S - sinusoida wątroby; KC – komórka Kupffera. Na dole po lewej - Komórki Ito w hodowli pod mikroskopem świetlnym. Na dole po prawej - mikroskopia elektronowa ujawnia liczne wakuole tłuszczowe (L) komórek Itoh (HSC), które przechowują retinoidy.
Komórki Ito(synonimy: komórka gwiaździsta wątroby, komórka magazynująca tłuszcz, lipocyt, Język angielski Komórka gwiaździsta wątroby, HSC, komórka Ito, komórka Ito) - perycyty zawarte w, zdolne do funkcjonowania w dwóch różnych stanach - spokój I aktywowany. Aktywowane komórki Ito odgrywają główną rolę w tworzeniu tkanki bliznowatej w przypadku uszkodzenia wątroby.
W nienaruszonej wątrobie znajdują się komórki gwiaździste spokojny stan. W tym stanie komórki mają kilka występów pokrywających sinusoidalną kapilarę. Inną charakterystyczną cechą komórek jest obecność w ich cytoplazmie rezerw witaminy A (retinoidów) w postaci kropelek tłuszczu. Ciche komórki Ito stanowią 5-8% wszystkich komórek wątroby.
Przerosty komórek Ito dzielą się na dwa typy: perysinusoidalny(podśródbłonkowy) i międzywątrobowokomórkowy. Pierwsze wychodzą z ciała komórki i rozciągają się wzdłuż powierzchni kapilary sinusoidalnej, pokrywając ją cienkimi, przypominającymi palce gałęziami. Występy okołozatokowe pokryte są krótkimi kosmkami i mają charakterystyczne długie mikropędy, które rozciągają się jeszcze dalej wzdłuż powierzchni rurki śródbłonka naczyń włosowatych. Występy międzykomórkowe, pokonując płytkę hepatocytów i docierając do sąsiedniej sinusoidy, dzielą się na kilka występów perisinusoidalnych. Zatem średnio komórka Ito pokrywa nieco więcej niż dwie sąsiednie sinusoidy.
Kiedy wątroba jest uszkodzona, powstają komórki Ito stan aktywowany. Aktywowany fenotyp charakteryzuje się proliferacją, chemotaksją, kurczliwością, utratą zapasów retinoidów i tworzeniem komórek podobnych do miofibroblastów. Aktywowane komórki gwiaździste wątroby wykazują również podwyższony poziom nowych genów, takich jak ICAM-1, chemokiny i cytokiny. Aktywacja wskazuje na początek wczesnego etapu fibrogenezy i poprzedza wzmożoną produkcję białek ECM. Końcowy etap gojenia wątroby charakteryzuje się zwiększoną apoptozą aktywowanych komórek Ito, w wyniku czego ich liczba gwałtownie spada.
Do wizualizacji komórek Ito pod mikroskopem stosuje się barwienie chlorkiem złota. Ustalono również, że niezawodnym markerem odróżniającym te komórki od innych miofibroblastów jest ekspresja białka Reelin.
Fabuła [ | ]
W 1876 roku Karl von Kupfer opisał komórki, które nazwał „Sternzellen” (komórki gwiaździste). Po zabarwieniu tlenkiem złota w cytoplazmie komórek widoczne były wtrącenia. Błędnie uznając je za fragmenty czerwonych krwinek wychwyconych w procesie fagocytozy, Kupfer w 1898 r. zrewidował swoje poglądy na temat „komórek gwiaździstych” jako odrębnego rodzaju komórek i sklasyfikował je jako fagocyty. Jednak w kolejnych latach regularnie pojawiały się opisy komórek podobnych do „komórek gwiaździstych” Kupffera. Nadano im różne nazwy: komórki śródmiąższowe, komórki parasinusoidalne, lipocyty, perycyty. Rola tych komórek pozostawała tajemnicą przez 75 lat, aż do czasu, gdy profesor (Toshio Ito) odkrył pewne komórki zawierające wtrącenia tłuszczu w przestrzeni okołozatokowej ludzkiej wątroby. Ito nazwał je „shibo-sesshu saibo” – komórkami pochłaniającymi tłuszcz. Zdając sobie sprawę, że inkluzje to tłuszcz wytwarzany przez komórki z glikogenu, zmienił nazwę na „shibo-chozo saibo” – komórki magazynujące tłuszcz. W
Komórki gwiaździste
Powyżej schematyczne przedstawienie komórki Itoh (HSC) sąsiadującej z pobliskimi hepatocytami (PC), poniżej sinusoidalnych komórek nabłonka wątroby (EC). S - sinusoida wątroby; KC – komórka Kupffera. Na dole po lewej - Komórki Ito w hodowli pod mikroskopem świetlnym. Na dole po prawej - mikroskopia elektronowa ujawnia liczne wakuole tłuszczowe (L) komórek Itoh (HSC), które przechowują retinoidy.
Komórki Ito(synonimy: komórka gwiaździsta wątroby, komórka magazynująca tłuszcz, lipocyt, Język angielski Komórka gwiaździsta wątroby, HSC, komórka Ito, komórka Ito ) - perycyty zawarte w przestrzeni okołozatokowej zrazika wątrobowego, zdolne do funkcjonowania w dwóch różnych stanach - spokój I aktywowany. Aktywowane komórki Ito odgrywają główną rolę w fibrogenezie – tworzeniu się tkanki bliznowatej w przypadku uszkodzenia wątroby.
W nienaruszonej wątrobie znajdują się komórki gwiaździste spokojny stan. W tym stanie komórki mają kilka występów pokrywających sinusoidalną kapilarę. Inną charakterystyczną cechą komórek jest obecność w ich cytoplazmie rezerw witaminy A (retinoidów) w postaci kropelek tłuszczu. Ciche komórki Ito stanowią 5-8% wszystkich komórek wątroby.
Przerosty komórek Ito dzielą się na dwa typy: perysinusoidalny(podśródbłonkowy) i międzywątrobowokomórkowy. Pierwsze wychodzą z ciała komórki i rozciągają się wzdłuż powierzchni kapilary sinusoidalnej, pokrywając ją cienkimi, przypominającymi palce gałęziami. Występy okołozatokowe pokryte są krótkimi kosmkami i mają charakterystyczne długie mikropędy, które rozciągają się jeszcze dalej wzdłuż powierzchni rurki śródbłonka naczyń włosowatych. Występy międzykomórkowe, pokonując płytkę hepatocytów i docierając do sąsiedniej sinusoidy, dzielą się na kilka występów perisinusoidalnych. Zatem średnio komórka Ito pokrywa nieco więcej niż dwie sąsiednie sinusoidy.
Kiedy wątroba jest uszkodzona, powstają komórki Ito stan aktywowany. Aktywowany fenotyp charakteryzuje się proliferacją, chemotaksją, kurczliwością, utratą zapasów retinoidów i tworzeniem komórek podobnych do miofibroblastów. Aktywowane komórki gwiaździste wątroby wykazują również podwyższony poziom nowych genów, takich jak α-SMA, chemokiny i cytokiny. Aktywacja wskazuje na początek wczesnego etapu fibrogenezy i poprzedza wzmożoną produkcję białek ECM. Końcowy etap gojenia wątroby charakteryzuje się zwiększoną apoptozą aktywowanych komórek Ito, w wyniku czego ich liczba gwałtownie spada.
Do wizualizacji komórek Ito pod mikroskopem stosuje się barwienie chlorkiem złota. Ustalono również, że niezawodnym markerem odróżniającym te komórki od innych miofibroblastów jest ekspresja białka Reelin.
Fabuła
Spinki do mankietów
- Young-O Queon, Zachary D. Goodman, Jules L. Dienstag, Eugene R. Schiff, Nathaniel A. Brown, Elmar Burkhardt, Robert Schoonhoven, David A. Brenner, Michael W. Fried (2001) Zmniejszona fibrogeneza: badanie immunohistochemiczne biopsje par komórek wątroby po leczeniu lamiwudyną u pacjentów z przewlekłym wirusowym zapaleniem wątroby typu B. Journal of Haepothology 35; 749-755. - tłumaczenie artykułu w czasopiśmie „Zakażenia i Terapia Antydrobnoustrojowa”, tom 04/N 3/2002, na stronie internetowej Consilium-Medicum.
- Popper H: Rozkład witaminy A w tkance ujawniony za pomocą mikroskopii fluorescencyjnej. Physiol Rev 1944, 24:205-224.
Notatki
Fundacja Wikimedia. 2010.
Zobacz, co „komórki gwiaździste” znajdują się w innych słownikach:
Cells - odbierz działający kupon rabatowy w Akademika Gallery Cosmetics lub kup opłacalne ogniwa z darmową dostawą w promocji w Gallery Cosmetics
Powyżej schematyczne przedstawienie komórki Itoh (HSC) sąsiadującej z pobliskimi hepatocytami (PC), poniżej sinusoidalnych komórek nabłonka wątroby (EC). S sinusoidy wątroby; Komórka KC Kupffera. Na dole po lewej Komórki Ito w hodowli pod mikroskopem świetlnym... Wikipedia
KOMÓRKI NERWOWE- KOMÓRKI NERWOWE, główne elementy tkanki nerwowej. Odkryty przez N. K. Ehrenberga i po raz pierwszy opisany przez niego w 1833 roku. Bardziej szczegółowe dane o N. do. ze wskazaniem ich kształtu i istnienia procesu osiowo-cylindrycznego, a także ... ... Wielka encyklopedia medyczna
Duże neurony kory móżdżku (patrz móżdżek) (M), których aksony wystają poza jego granice; opisany w 1837 roku przez Ya. E. Purkina. Poprzez P. k. realizowany jest wpływ poleceń kory M na podległe jej ośrodki motoryczne (jądra M i jądra przedsionkowe). Ty... ... Wielka encyklopedia radziecka
Lub klasa Gephyrei z podtypu Vermiformes lub Vermidea, rodzaj robaków lub Vermes. Zwierzęta należące do tej klasy to wyłącznie formy morskie żyjące w błocie i piasku ciepłych i zimnych mórz. Klasę gwiazd gwiaździstych Ch. ustanowił Quatrphage... ...
Nie mylić z neutronem. Komórki piramidalne neuronów w korze mózgowej myszy Neuron (komórka nerwowa) jest strukturalnie funkcjonalną jednostką układu nerwowego. Komórka ta ma złożoną strukturę, wysoce wyspecjalizowaną i ma strukturę... ... Wikipedia
Nazwa ta odnosi się zarówno do niektórych komórek pigmentowych, jak i do części komórek (zarówno zwierzęcych, jak i roślinnych) zawierających pigment. X. częściej występują w roślinach (patrz poprzedni artykuł N. Gaidukova), ale opisywane są także u pierwotniaków... Słownik encyklopedyczny F.A. Brockhausa i I.A. Efron
- (cellulae flammeae), komórki z wiązką rzęsek i długim procesem, zamykające proksymalną część kanalika protonefrydowego. Centrum, część „P. k., posiadający liczne. procesy gwiaździste, przechodzi do jamy, kępka długich rzęsek schodzi do jamy... ...
Gwiaździste komórki śródbłonka (reticuloendoteliocyti stellatum), komórki układu siateczkowo-śródbłonkowego, zlokalizowane od wewnątrz. powierzchnia naczyń włosowatych (sinusoid) wątroby u płazów, gadów, ptaków i ssaków. Studiował przez K.... ... Biologiczny słownik encyklopedyczny
KOMÓRKI PŁOMIENIOWE (cellulae flammeae), komórki z wiązką rzęsek i długim wyrostkiem, zamykające proksymalną część kanalika protonefrydowego. Centrum. część P. do., posiadająca liczne. procesy gwiaździste, przechodzi do wnęki, wiązka schodzi do wnęki... ... Biologiczny słownik encyklopedyczny
- (S. Golgi) neurony gwiaździste warstwy ziarnistej kory móżdżku ... Duży słownik medyczny
Przeprowadzono analizę ultrastrukturalną, immunohistochemiczną i morfometryczną populacji komórek gwiaździstych wątroby w zakresie dynamiki rozwoju zwłóknienia i marskości wątroby o zakaźnym pochodzeniu wirusowym. Stwierdzono fibrogenną aktywację komórek gwiaździstych wątroby, która charakteryzuje się redukcją kropelek lipidów i synchroniczną ekspresją cech fibroblastopodobnych - pozytywną reakcją immunohistochemiczną na α-aktynę mięśni gładkich, rozrostem ziarnistej siateczki cytoplazmatycznej i okołokomórkowym tworzeniem licznych kolagenów włókienka. Wykazano, że pomimo postępującego spadku gęstości liczbowej komórek gwiaździstych zawierających lipidy w trakcie rozwoju zwłóknienia, potrzeba utrzymania funkcji odkładania retinoidów pozostaje: w marskości wątroby stwierdzono obecność komórek gwiaździstych zawierających lipidy w komórkach włóknistych przegrody i wewnątrz zrazików. Stwierdzono, że komórki gwiaździste wątroby stanowią polimorficzną heterogenną populację o szerokim zakresie aktywności funkcjonalnej.
fibrogeneza
komórki gwiaździste wątroby
ultrastruktura
immunohistochemia
1. Balabaud C., Bioulac-Sage P., Desmouliere A. Rola komórek gwiaździstych wątroby w regeneracji wątroby // J. Hepatol. – 2004. – Cz. 40. – s. 1023–1026.
2. Brandao D.F., Ramalho L.N.Z., Ramalho F.S. Marskość wątroby i komórki gwiaździste wątroby // Acta Cirúrgica Brasileira. – 2006. – Cz. 21. – s. 54–57.
3. Desmet V.J., Gerber M., Hoofnagle J.H. Klasyfikacja przewlekłego zapalenia wątroby: diagnostyka, ocena i stopień zaawansowania // Hepatologia. – 1994. – Cz. 19. – s. 1523–1520.
4. Gabele E., Brenner D.A., Rippe R.A. Zwłóknienie wątroby: sygnały prowadzące do amplifikacji fibrogenicznych komórek gwiaździstych wątroby // Przód. Biosc. – 2003. – Cz. 8. – s. 69–77.
5. Geerts A. O pochodzeniu komórek gwiaździstych: mezodermalnych, endodermalnych czy neuroektodermalnych? // J. Hepatol. – 2004. – Cz. 40. – s. 331–334.
6. Gutierrez-Ruiz M.C., Gomez-Quiroz L.E. Zwłóknienie wątroby: poszukiwanie odpowiedzi na modele komórkowe // Liver Intern. – 2007. – Cz. 10. – s. 434–439.
7. Kisseleva T., Brenner D.A. Rola komórek gwiaździstych wątroby w fibrogenezie i odwróceniu zwłóknienia // J. Gastroenterol. Hepatol. – 2007. – Cz. 22. – Str. S73 – S78.
8. Ryder S.D. Progresja zwłóknienia wątroby u pacjentów z wirusowym zapaleniem wątroby typu C: prospektywne badanie z powtórną biopsją wątroby // Gut. – 2004. – Cz. 53. – s. 451–455.
9. Schuppan D., Afdhal N.H. Marskość wątroby // Lancet. – 2008. – Cz. 371. – s. 838–851.
10. Senoo H. Struktura i funkcja komórek gwiaździstych wątroby // Med. Elektron. Mikrosc. – 2004. – Cz. 37. – s. 3–15.
Komórki gwiaździste wątroby (lipocyty, komórki Ito, komórki wątroby gromadzące tłuszcz) zlokalizowane są w przestrzeniach Dissego pomiędzy hepatocytami a śródbłonkową wyściółką sinusoid i odgrywają wiodącą rolę w regulacji homeostazy retinoidów, odkładając do 80% witaminy A. Przestrzeń Dissego jest obszarem o największej odpowiedzialności funkcjonalnej, zapewniającym wymianę transsinusoidalną. W modelach eksperymentalnych i w hodowli komórkowej wykazano, że komórki gwiaździste wątroby różnicują się w duże cytoplazmatyczne kropelki lipidów zawierające witaminę A; ten fenotyp jest interpretowany jako „spoczynkowy”.
Coraz większą wagę przywiązuje się do roli komórek gwiaździstych w rozwoju zwłóknienia i marskości wątroby. Po otrzymaniu bodźców fibrogenicznych „spoczynkowe” komórki gwiaździste „transróżnicują się” do fenotypu podobnego do miofibroblastów i zaczynają wytwarzać kolagen, proteoglikany i inne składniki macierzy zewnątrzkomórkowej. Zwłóknienie na poziomie żył centralnych, zatok lub naczyń wrotnych ogranicza prawidłową hemodynamikę wątroby, co prowadzi do zmniejszenia metabolicznie efektywnego miąższu, a w konsekwencji do nadciśnienia wrotnego i przeciekania wrotno-systemowego. Nagromadzenie tkanki łącznej w przestrzeniach Dissego zakłóca normalny ruch metaboliczny między krwią a hepatocytami, zakłócając usuwanie krążących makrocząsteczek, zmieniając interakcje komórka-komórka i prowadząc do dysfunkcji komórek wątroby.
Istnieją sprzeczne opinie na temat tego, czy aktywowane komórki gwiaździste są zdolne do powrotu do spokojnego fenotypu. Uzyskano dowody, że fibrogenne komórki gwiaździste wątroby mogą częściowo neutralizować proces aktywacji, np. pod wpływem retinoidów lub podczas interakcji ze składnikami macierzy zewnątrzkomórkowej, w tym z kolagenem włóknistym typu I czy składnikami błony podstawnej. Rozwiązanie tego problemu leży u podstaw problemu odwracalności zwłóknienia i rozwoju podejść terapeutycznych w leczeniu marskości wątroby.
Cel badania- przeprowadzić kompleksowe badania cech strukturalnych i funkcjonalnych komórek gwiaździstych wątroby w dynamice zmian zwłóknieniowych w modelu przewlekłego zakażenia HCV.
Materiał i metody badawcze
Przeprowadzono kompleksowe badania światłooptyczne, mikroskopu elektronowego i morfometrii próbek biopsyjnych wątroby pochodzących z przewlekłego zakażenia HCV w różnych stadiach zmian zwłóknieniowych (100 próbek podzielono na 4 równe grupy w zależności od nasilenia zwłóknienia). Należy zauważyć, że komórki gwiaździste zawierające lipidy najlepiej uwidocznić na półcienkich skrawkach, podczas gdy fibrogeniczne komórki gwiaździste najlepiej uwidocznić tylko na ultracienkich skrawkach lub za pomocą obrazowania immunohistochemicznego.
Próbki wątroby utrwalono w 4% roztworze paraformaldehydu schłodzonym do 4°C, przygotowanym w buforze fosforanowym Milloniga (pH 7,2-7,4); Skrawki parafinowe barwiono hematoksyliną i eozyną w połączeniu z reakcją Perlsa według Van Giesona z dodatkowym barwieniem włókien elastycznych fuksyną rezorcynolową Weigerta i przeprowadzono reakcję CHIC. Półcienkie skrawki barwiono odczynnikiem Schiffa i Azure II. Badania przeprowadzono przy użyciu mikroskopu uniwersalnego Leica DM 4000B (Niemcy). Mikrofotografie wykonano aparatem cyfrowym Leica DFC 320 i programem komputerowym Leica QWin. Ultracienkie skrawki, kontrastujące z octanem uranylu i cytrynianem ołowiu, badano w mikroskopie elektronowym JEM 1010 przy napięciu przyspieszającym 80 kW.
Stopień zwłóknienia wątroby określano w 4-punktowej skali, począwszy od zwłóknienia wrotnego (stopień I) do marskości wątroby z utworzeniem wrotno-centralnej przegrody unaczynionej i guzowatą transformacją miąższu. Komórki gwiaździste wątroby i inne elementy komórkowe wytwarzające macierz zidentyfikowano na podstawie dynamiki rozwoju zwłóknienia poprzez ekspresję α-aktyny mięśni gładkich.
Ekspresję α-aktyny w mięśniach gładkich w komórkach wytwarzających macierz wątroby badano dwuetapową metodą pośredniej immunoperoksydazy z systemem obrazowania produktu stanowiącego kontrolę ujemną streptawidyna-biotyna. Jako przeciwciała pierwszorzędowe zastosowano mysie przeciwciała monoklonalne przeciwko α-aktynie mięśni gładkich (NovoCastra Lab. Ltd, Wielka Brytania) w rozcieńczeniu 1:25; jako przeciwciała wtórne - uniwersalne przeciwciała biotynylowane. Produkty reakcji immunohistochemicznej wizualizowano przy użyciu diaminobenzydyny, następnie skrawki barwiono kontrastowo hematoksyliną Mayera. Gęstość liczbową komórek gwiaździstych zawierających lipidy oceniano na półcienkich skrawkach na jednostkę pola widzenia równą 38 000 μm2. Do statystycznego przetwarzania danych wykorzystano test Studenta; różnice w porównywanych parametrach uznawano za istotne, jeśli prawdopodobieństwo błędu P było mniejsze niż 0,05.
Wyniki badań i dyskusja
Przy minimalnych zmianach włóknistych w wątrobie pacjentów z przewlekłym wirusowym zapaleniem wątroby typu C z reguły stwierdza się dość dużą liczbę komórek gwiaździstych, które są wyraźnie widoczne tylko w przekrojach półcienkich i ultracienkich i są zróżnicowane w przestrzeniach Dissego przez obecność dużych kropelek lipidów w cytoplazmie. Transformacji komórek gwiaździstych z komórek „spoczynkowych” zawierających retinoidy do komórek fibrogennych towarzyszy stopniowy spadek liczby kropelek lipidów. Pod tym względem prawdziwą liczbę komórek gwiaździstych można określić za pomocą kompleksowego badania mikroskopu elektronowego i immunohistochemicznego.
W początkowych stadiach zwłóknienia (0, I) w przewlekłym wirusowym zapaleniu wątroby typu C, podczas badania półcienkich skrawków, populacja komórek gwiaździstych wątroby wyróżniała się wyraźnym polimorfizmem - wielkość, kształt, liczba kropelek lipidów i ich właściwości barwiące różniły się znacznie : różnice w osmiofilowości materiału zawierającego lipidy w różnych komórkach. Gęstość liczbowa komórek gwiaździstych wątroby, wizualizowana w preparatach na podstawie obecności cytoplazmatycznych kropelek lipidów, wynosiła 5,01 ± 0,18 na jednostkę pola widzenia.
Cechy ultrastruktury komórek gwiaździstych są związane z niejednorodnością gęstości elektronowej kropelek lipidów nie tylko w obrębie jednej komórki, ale także pomiędzy różnymi lipocytami: na tle przezroczystego dla elektronów substratu lipidowego wyróżniała się bardziej osmiofilna krawędź brzeżna; Ponadto jądra były ostro polimorficzne, a długość procesów cytoplazmatycznych była zróżnicowana. Wśród ultrastrukturalnych cech komórek gwiaździstych zawierających lipidy, wraz z obecnością kropelek lipidów, można zauważyć bardzo małą ilość macierzy cytoplazmatycznej, ubogiej w organelle błonowe, w tym mitochondria, i dlatego najwyraźniej ten fenotyp lipocytów nazywa się „ spoczynkowe” lub „bierne”.
Na etapach zwłóknienia II i III ultrastruktura większości komórek gwiaździstych nabrała tak zwanego fenotypu mieszanego lub przejściowego - jednoczesnej obecności cech morfologicznych zarówno komórek zawierających lipidy, jak i komórek podobnych do fibroblastów. W takich lipocytach jądra miały głębokie wgłębienia jąderka, większe jąderko i zwiększoną objętość cytoplazmy, która zatrzymywała kropelki lipidów. Jednocześnie gwałtownie wzrosła liczba mitochondriów, wolnych rybosomów, polisomów i kanalików ziarnistej siateczki cytoplazmatycznej. Z reguły miał miejsce kontakt błonowy pomiędzy kropelkami lipidów a mitochondriami, co wskazuje na „wykorzystanie” lipidów. W wielu komórkach kropelki lipidów ulegają degradacji poprzez utworzenie autofagosomów, które są następnie eliminowane w drodze egzocytozy. W niektórych przypadkach zaobserwowano proliferację komórek gwiaździstych o mieszanym fenotypie.
Komórki gwiaździste wytwarzające macierz, najliczniejsze w stadium marskości wątroby, charakteryzowały się całkowitym brakiem ziarnistości lipidowych, formą przypominającą fibroblasty, rozwiniętym przedziałem syntetyzującym białka i tworzeniem kurczliwych struktur włóknistych w cytoplazmie; Okołokomórkowo w przestrzeniach Dissego zlokalizowano liczne pęczki włókienek kolagenowych o specyficznych prążkach poprzecznych.
Ogólnie rzecz biorąc, wraz z postępem przewlekłego wirusowego zapalenia wątroby typu C, któremu towarzyszy wewnątrzzrazikowa fibrogeneza okołozatokowa, występują morfologiczne oznaki aktywacji komórek gwiaździstych wątroby, ich przemiany z tzw. „biernych”, gromadzących witaminę A, w komórki fibrogenne i proliferujące.
Na etapie transformacji w marskość wątroby nastąpił znaczny spadek gęstości liczbowej komórek gwiaździstych zawierających lipidy, co wskazuje na ich transformację fibrogenną. Jednakże w przypadku ustalonej marskości wątroby w pojedynczych przypadkach występowały obszary miąższu wątroby z okołozatokowym komórkami gwiaździstymi zawierającymi lipidy. Ponadto w jednej próbce stwierdzono liczne lipocyty w tkance włóknistej okołowrotnej, co prawdopodobnie wskazuje na ważną rolę komórek gwiaździstych w metabolizmie retinoidów w organizmie, nawet w stadium marskości narządu. Ponadto wydaje się, że komórki gwiaździste pełnią szereg innych funkcji. Można je również znaleźć w narządach pozawątrobowych, takich jak trzustka, płuca, nerki i jelita, i uważa się, że wątrobowe i pozawątrobowe komórki gwiaździste tworzą rozsiany układ komórek gwiaździstych korpus, podobny do systemu APUD. Przykładowo, pomimo związku fibrogenicznych komórek gwiaździstych z marskością wątroby, ich aktywacja może odegrać korzystną rolę w przypadku ostrego urazu, gdyż skutkuje utworzeniem odpowiedniego obwodu zrębowego do regeneracji komórek miąższowych.
Nasilenie zwłóknienia okołowątrobowokomórkowego w przewlekłym zakażeniu HCV, według analizy morfometrycznej, wykazywało istotną odwrotną korelację z gęstością liczbową komórek gwiaździstych zawierających lipidy – w III stadium zwłóknienia oraz w marskości narządu wynosiło 0,20 ± 0,03 na jednostkę wzroku pole, które jest znacznie mniej istotne (s< 0,05), чем на стадиях фиброза 0 - I (5,01 ± 0,18) и II (2,02 ± 0,04).
Przetestowaliśmy aktywność fibrogenną komórek wątroby wytwarzających macierz, stosując badanie immunohistochemiczne ekspresji alfa aktyny mięśni gładkich. W cytoplazmie aktywowanych komórek gwiaździstych zlokalizowanych wewnątrz zrazików wątrobowych znaleziono produkty reakcji immunohistochemicznej o różnym natężeniu. Szczególnie istotną ekspresję α-aktyny mięśni gładkich zaobserwowano w cytoplazmie fibroblastów i miofibroblastów stref wrotnych, komórkach mięśni gładkich naczyń i miofibroblastach wokół żył centralnych.
Większość danych na temat komórkowych mechanizmów fibrogenezy pochodzi z badań przeprowadzonych na komórkach gwiaździstych wątroby, ale jasne jest, że różne komórki wytwarzające macierz (każda o innej lokalizacji, fenotypie immunohistochemicznym i ultrastrukturalnym) przyczyniają się do rozwoju zwłóknienia wątroby. Należą do nich fibroblasty i miofibroblasty dróg wrotnych, komórki mięśni gładkich naczyń i miofibroblasty wokół żył centralnych, które ulegają aktywacji w stanach przewlekłego uszkodzenia wątroby.
Wniosek
Wykazano rolę komórek gwiaździstych wątroby w rozwoju zwłóknienia narządów w przewlekłym wirusowym zapaleniu wątroby typu C. W miarę postępu zwłóknienia gęstość liczbowa komórek gwiaździstych zawierających lipidy znacząco maleje, przy czym część populacji zachowuje tzw. fenotyp „spoczynkowy”. do pełnienia funkcji metabolicznych. Komórki gwiaździste wątroby „miofibroblastopodobne” w stanie aktywacji fibrogenicznej charakteryzują się następującymi cechami strukturalnymi i funkcjonalnymi: zmniejszeniem liczby i późniejszym zanikiem kropelek lipidów, rozrostem ziarnistej siateczki cytoplazmatycznej i mitochondriów, ogniskową proliferacją, ekspresją immunohistochemiczną o cechach fibroblastopodobnych, w tym α-aktyny mięśni gładkich i tworzeniu okołokomórkowych włókienek kolagenowych w przestrzeniach Dissego.
Zatem komórki gwiaździste wątroby nie są statyczną, ale dynamiczną populacją, która jest bezpośrednio zaangażowana w przebudowę wewnątrzzrazikowej macierzy okołokomórkowej.
Recenzenci:
Vavilin V.A., doktor nauk medycznych, profesor, kierownik. Laboratorium Metabolizmu Leków, Instytut Biologii Molekularnej i Biofizyki, Syberyjski Oddział Rosyjskiej Akademii Nauk Medycznych, Nowosybirsk;
Kliver E.E., doktor nauk medycznych, wiodący pracownik naukowy w Laboratorium Patomorfologii i Mikroskopii Elektronowej Nowosybirskiego Instytutu Badawczego Patologii Krążenia im. Akademika E.N. Meshalkin Ministerstwo Zdrowia i Rozwoju Społecznego Federacji Rosyjskiej, Nowosybirsk.
Pracę wpłynęło do redakcji 15 sierpnia 2011 roku.
Link bibliograficzny
Postnikova O.A., Nepomnyashchikh D.L., Aidagulova S.V., Vinogradova E.V., Kapustina V.I., Nokhrina Zh.V. CHARAKTERYSTYKA STRUKTURALNA I FUNKCJONALNA KOMÓREK GWIAZDKOWYCH WĄTROBY W DYNAMICE ZWIĘKSZENIA // Badania Podstawowe. – 2011 r. – nr 10-2. – s. 359-362;Adres URL: http://fundamental-research.ru/ru/article/view?id=28817 (data dostępu: 30.01.2020). Zwracamy uwagę na czasopisma wydawane przez wydawnictwo „Akademia Nauk Przyrodniczych”
Główne źródło endotoksyn w organizmiejest Gram-ujemną florą jelitową. Obecnie nie ma wątpliwości, że głównym narządem jest wątroba przeprowadzanie usuwania endotoksyn. Endotoksyna jest wychwytywana głównie przez komórki kami Kupffera (KK), oddziałując z receptorem błonowym płyta CD 14. Może wiązać się z samym receptorem lipopolisacharyd(LPS), i jego kompleks z białkiem wiążącym lipid A plazma kom. Interakcja LPS z makrofagami wątroby wyzwala kaskadę reakcji polegających na wytwarzaniu i uwalnianiu redukcja cytokin i innych biologicznie aktywnych mediatorzy.
Istnieje wiele publikacji na temat roli makrofagov wątroby (LC) w wychwytywaniu i usuwaniu bakteryjnego LPS, ale interakcja śródbłonka z innymi mezenchymalny w szczególności komórki perysinusoidalny Komórki Ito praktycznie nie były badane.
METODOLOGIA BADAŃ
Białym samcom szczurów o masie 200 g wstrzyknięto dootrzewnowo 1 ml sterylnego roztworu soli fizjologicznej wysoce oczyszczony liofilizowany LPS MI. coli szczep 0111 w dawkach 0,5,2,5, 10, 25 i 50 mg/kg. Po 0,5, 1, 3, 6, 12, 24, 72 godzinach i 1 tygodniu narządy wewnętrzne usuwano w znieczuleniu i umieszczano w buforowanej 10% formalinie. Materiał wlano do bloków parafinowych. Barwiono skrawki o grubości 5 µm immunohistochemicznystreptawidyna-biotyna metoda z przeciwciałami przeciwko desminie, α - gładki- aktyna mięśniowa (A-GMA) i antygen jądrowy dobrze proliferujące komórki ( PCNA, „ Dako"). Desmin użyto jako markera perysinusoidalnyKomórki Ito, A-GMA - as ve znacznik miofibroblasty, PCNA - komórki proliferujące. Do wykrywania endotoksyny w komórkach wątroby stosuje się oczyszczone anty-Re-glikolipidprzeciwciała (Instytut Patologii Ogólnej i Klinicznej KDO, Moskwa).
WINIKI WYSZUKIWANIA
Przy dawce 25 mg/kg i wyższej, śmiertelny wstrząs obserwowano 6 godzin po podaniu LPS. Ostra ekspozycja na LPS na tkankę wątroby spowodowała aktywację komórek Ito, co objawiało się wzrostem ich liczby. Numer desmin pozytywny liczba komórek wzrosła od 6 godzin po wstrzyknięciu LPS i osiągnęła maksimum ma o 48-72 godziny (ryc. 1, a, b).
Ryż. 1. Przekroje wątroby dachu sowy, przetworzone LSAB -Ja- cennyprzeciwciała przeciwko des kopalnia(zespół α - gładki aktyna szyjna (c), x400 (A, B), x200 (cale).
a - przed podaniem endotoksynyna, pojedynczy desminpozytywnyKomórki Ito w strefie okołowrotnej; B- 72 godzinypo podaniu endotoksyny na: liczne desminpozytywny komórki Ito; V- 120 godzin po podaniu en dotoksyna: α - mięśnie gładkie występuje tylko aktywna aktynaw komórkach mięśni gładkich kah statki.
W 1 numer tygodnia desmin pozytywny liczba komórek spadła, alebył wyższy od wskaźników kontrolnych. Na W tym przypadku w żadnym wypadku nie zaobserwowaliśmy wyglądu A-GMA-pozytywny komórki w zatoce dać wątrobę. Wewnętrznie pozytywne kontrola po wybarwieniu przeciwciałami przeciwko A-GMA służył do identyfikacji komórek mięśni gładkich krwinaczynia żylne dróg wrotnych zawierające A-GMA (ryc. 1, V). Dlatego pomimo wzrostu liczby komórek Ito, jednorazowy ekspozycja na LPS nie prowadzi do transformacji ( transdyferencjacja) je do miofibroblastów.
Ryż. 2. Skrawki wątrobyleczone szczury LSAB -znakowane przeciwciała do PCNA. a - przed wprowadzeniem pl dotoksyna: pojedynczaproliferujące geny patocyty, x200; b - 72 godziny po podaniu endotoksyny: liczne proliferujące hepatocyty, x400.
Zwiększenie ilości desmin pozytywny komórki rozpoczęły się w strefie portalowej. Od 6 godzin do 24 godzin po podaniu LPS perysinusoidalny komórki znaleziono jedynie wokół dróg portalowych, tj. w I strefie ACI noosa. Po 48-72 godzinach zaobserwowano makmaksymalna ilość desmin pozytywny klej obecnie pojawiały się także w innych obszarach acinusa; niemniej jednak większość komórek Ito nadal była zlokalizowana okołowrotnie.
Być może wynika to z faktu, że peryportalnyzlokalizowane CC są pierwszymi, które chwytają endotoksyna pochodząca z jelita przez żyłę wrotną lub z krążenia ogólnoustrojowego. Ak aktywowane CC wytwarzają szerokie spektrum cytokiny, które, jak się uważa, powodują aktywację komórek Ito i transdyferencjacja je w miofibroblasty. Oczywiście dlatego komórki Ito zlokalizowane w pobliżu aktywowanych makrofagów wątrobowych (w I strefie acinus) jako pierwsze reagują na uwolnienie cytokin. W naszym badaniu ich jednak nie zaobserwowaliśmy. transdyferencjacja V miofibroblasty, co sugeruje, że cytokiny wydzielane przez CC i hepatocyty mogą służyć jako czynnik wspierający proces, który już się rozpoczął transdyferencjacja, ale prawdopodobnie nie są w stanie go wywołać pojedynczą ekspozycją wątroby na LPS.
Wzrost aktywności proliferacyjnej komórek zaobserwowano także głównie w I strefie grodu. To prawdopodobnie sugeruje, że wszystkie (lub prawie wszystkie) procesy miały na celu out O- i parakrynna regulacja interakcji międzykomórkowych zachodzi w strefach okołowrotnych. Od 24 godzin po podaniu LPS zaobserwowano wzrost liczby proliferujących komórek; liczba komórek dodatnich wzrosła do 72 godzin (maksymalna aktywność proliferacyjna, ryc. 2, a, b). Proliferowały zarówno hepatocyty, jak i komórki sinusoidalne. Jednak barwienie dalej PCNA nie daje umiejętność identyfikacji rodzaju proliferacji przeżuwające komórki sinusoidalne. Według literatury działanie endotoksyn prowadzi do wzmożenia w zależności od ilości CC. Myślą, że o to chodzi pochodzi zarówno z proliferacji makrofagów wątroby, jak i migracji monocytów z innych narządów. Cytokiny uwalniane przez CK mogą zwiększać zdolność proliferacyjną komórek Ito. Dlatego logiczne jest założenie, że reprezentowane są komórki proliferujące perysinusoidalny Komórki Ito. Odnotowany przez nas wzrost ich liczby jest najwyraźniej niezbędny do zwiększenia syntezy czynników wzrostu i odbudowy macierzy międzykomórkowej w warunkach uszkodzeń. Może to być jedno z ogniw reakcji kompensacyjno-regeneracyjnych wątroby, gdyż komórki Ito są głównym źródłem składników macierzy międzykomórkowej, czynnika komórek macierzystych i czynnika wzrostu hepatocytów, które biorą udział w naprawie i różnicowaniu tworzenie komórek nabłonkowych wątroby. Nieobecny poprzez transformację komórek Ito w miofibroblasty wskazuje, że jeden epizod agresji endotoksyn nie wystarczy do rozwoju zwłóknienia wątroby.
Zatem ostre działanie endotok syna powoduje wzrost liczby desmin pozytywny Komórki Ito, co jest pośrednią oznaką uszkodzenia wątroby. Ilość perysinusoidalny komórek wzrasta, najwyraźniej w wyniku ich proliferacji. Pojedynczy epizod agresji endotoksyn powoduje odwrót moja aktywacja perysinusoidalny Komórki Ito i do nich nie prowadzi transdyferencjacja w miofibroblasty. W związku z tym można założyć, że w mechanizmach aktywacji i transdyferencjacja Komórki Ito obejmują nie tylko endotoksyny i cytokiny, ale także inne czynniki interakcji międzykomórkowych.
LITERATURA
1. Majański D.N., Wisse E., Decker K. // Nowe granice hepatologia. Nowosybirsk, 1992.
2. Salakhov I.M., Ipatov A.I., Konev Yu.V., Yakovlev M.Yu. // Zrobimy postęp, biol. 1998. T. 118, wydanie. 1. s. 33-49.
3. Jakowlew M.Yu. // Kazań . m jednostek czasopismo 1988. nr 5. s. 353-358.
4. Freudenberga N., Piotraschke J., Galano C. i.t glin. // VirchowsaŁuk. [B]. 1992. Tom. 61.P. 343-349.
5. Gressnera A. M. // Hepatogastronterologia. 1996. tom. 43. s. 92-103.
6. Schmidt C., Bladt F., Goedecke S. i in. // Natura. 1995. tom. 373, N 6516. s. 699-702.
7. Mądry MI., Braet F., Luo D. i in. // Toksyk. Patol. 1996. Tom. 24, N 1. s. 100-111.
Cytat: Kurysheva M.A. Zwłóknienie wątroby: przeszłość, teraźniejszość i przyszłość // Rak piersi. 2010. Nr 28. S. 1713
Zwłóknienie wątroby to miejscowy lub rozlany wzrost ilości tkanki łącznej, macierzy zewnątrzkomórkowej (tkanki włóknistej kolagenowej w przestrzeni okołozatokowej) i główna droga postępu przewlekłych rozsianych chorób wątroby. We wczesnych stadiach włóknienia nie ma objawów klinicznych, a dopiero badanie histologiczne wycinka biopsyjnego ujawnia nadmierne nagromadzenie tkanki łącznej. Następnie zwłóknienie prowadzi do powstania węzłów regeneracyjnych, zespoleń naczyniowych - powstania marskości wątroby. Zwłóknienie wątroby niezwiązane z marskością wątroby jest rzadkie i nie zostało uwzględnione w tej pracy.
Badania procesów włóknienia w wątrobie prowadzone są od wielu lat (tab. 1), jednak dopiero odkrycie roli komórek gwiaździstych w procesach włóknienia otworzyło nowe możliwości terapii przeciwfibrotycznej.
Patogeneza zwłóknienia wątroby
Komórki sinusoidalne - śródbłonek, komórki Kupffera, komórki gwiaździste (komórka Ito, komórka gwiaździsta, komórka przechowująca retinoidy, lipocyt) wraz z obszarem hepatocytów skierowanym w stronę światła sinusoid tworzą jednostkę funkcjonalną. Oprócz komórek w obszarze sinusoidy znajduje się macierz zewnątrzkomórkowa (ECM), widoczna jedynie w chorobach wątroby. Wszystkie komórki tworzące sinusoidy mogą brać udział w tworzeniu ECM. Zwykle istnieje równowaga pomiędzy czynnikami fibrogenezy i czynnikami przeciwzwłóknieniowymi. Główną rolę w procesie zwłóknienia odgrywają komórki Ito, które wytwarzają czynniki profibrotyczne i przeciwfibrotyczne. Czynnikami przeciwfibrotycznymi są metaloproteazy macierzy (MMP), które biorą udział w niszczeniu białek ECM (kolagenazy, żelatynazy, stromolizyny). Aktywność MMP jest tłumiona przez tkankowe inhibitory metaloproteaz macierzy (TIMP), które są również wytwarzane przez komórki Ito.
Kiedy wątroba jest uszkodzona, uwalniane są substancje biologicznie czynne, które aktywują makrofagi i śródbłonek sinusoidalny, uwalniając IL-1, TNFα, tlenek azotu, endotelinę, działając na komórki Ito. Po aktywacji komórki gwiaździste wytwarzają czynnik aktywujący płytki krwi PDGF i transformujący czynnik wzrostu TGFβ 1. Pod wpływem TGFβ 1 komórki Ito zaczynają się aktywować i migrować do obszarów zapalnych. Następuje zmiana fenotypu komórek Ito – przekształcają się one w miofibroblasty, które w dalszym ciągu wytwarzają TGFβ 1 i zaczynają wytwarzać ECM. Zaburzenie równowagi pomiędzy czynnikami zwłóknieniowymi i przeciwwłóknieniowymi prowadzi do 3-10-krotnego wzrostu składników ECM i zmiany jej składu (przewaga kolagenu typu I i III). Redystrybucji macierzy do przestrzeni Dissego, jej ekspansji, kapilaryzacji sinusoid towarzyszą zaburzenia wymiany między hepatocytami a krwią, przetaczanie krwi z powodu rozwoju płatków rzekomych i rozwoju marskości wątroby. Jeśli działanie mediatorów stanu zapalnego ustanie, komórki Ito ponownie zaczynają wytwarzać substancje profibrotyczne i następuje zmniejszenie składników ECM w przestrzeni Dissego. Zatem zwłóknienie we wczesnych stadiach rozwoju jest procesem odwracalnym.
Patogeneza zwłóknienia wątroby w przewlekłym wirusowym zapaleniu wątroby jest związana z indukcją aktywności komórek zapalnych przez zakażone hepatocyty, co prowadzi do stymulacji komórek Ito. W alkoholowej chorobie wątroby aldehyd octowy i wolne rodniki tlenowe aktywują komórki Ito. Ponadto etanol sprzyja rozwojowi mikroflory Gram-ujemnej w jelicie, zwiększając poziom lipopolisacharydów we krwi wrotnej i aktywując komórki Kupffera wytwarzające TNFα, działając na komórki Ito. Patogeneza zwłóknienia wątroby w niealkoholowej stłuszczeniowej chorobie wątroby jest związana z hiperglikemią i insulinoopornością, co prowadzi do zwiększonego poziomu wolnych kwasów tłuszczowych i stłuszczenia wątroby, a wolne rodniki i cytokiny prozapalne prowadzą do apoptozy hepatocytów i aktywacji komórek zapalnych wraz z postępem choroby. zwłóknienie wątroby. W pierwotnej marskości żółciowej komórki żółciowe wydzielają mediatory fibrogeniczne, które aktywują komórki Ito, wywołując fibrogenezę.
Odwracalność zwłóknienia wątroby
Przez długi czas zwłóknienie wątroby uważano za nieodwracalny stan patologiczny. Jednak już 50 lat temu opisywano przypadki odwrotnego rozwoju zwłóknienia po skutecznej terapii hemochromatozy i choroby Wilsona-Kovalova, a następnie wielokrotnie publikowano dane dotyczące odwrotnego rozwoju zwłóknienia w autoimmunologicznym zapaleniu wątroby w wyniku leczenia immunosupresyjnego, wtórnej niewydolności żółciowej marskość wątroby po chirurgicznej dekompresji dróg żółciowych, niealkoholowe stłuszczeniowe zapalenie wątroby ze spadkiem masy ciała, alkoholowe zapalenie wątroby w okresie abstynencji.
Odwracalność zwłóknienia obserwowano przy długotrwałej abstynencji od alkoholu, gdy po 4-6 tygodniach podczas biopsji oraz w surowicy krwi wykryto zmniejszenie zawartości kolagenu typu IV, lamininy i kwasu hialuronowego w ściankach sinusoid - nastąpiła regresja procesu „kapilaryzacji sinusoidalnej”. Zaobserwowano także zmiany odzwierciedlające funkcję komórek Ito – wzrost poziomu MMP-2 i spadek poziomu jej inhibitora TIMMP-2. W określonych odstępach czasu zaobserwowano spadek liczby miofibryli aktynowych w ścianach sinusoid, co wskazuje na spadek aktywności komórek gwiaździstych Ito i ich przejście z syntezy macierzy zewnątrzkomórkowej do jej degradacji.
Jednocześnie dopiero wraz z wprowadzeniem terapii przeciwwirusowej do praktyki klinicznej koncepcja zwłóknienia wątroby, jako procesu dynamicznego, z możliwością zarówno progresji, jak i regresji, została uznana za naukowo udowodniony fakt.
Postęp doprowadził do jasnego zrozumienia, że zwłóknienie wątroby jest odwracalne, oraz do realistycznych oczekiwań, że skuteczna terapia przeciwwłóknieniowa znacząco zmieni sposób postępowania z pacjentami z chorobami wątroby i zapewni korzystne rokowanie nawet u osób z rozpoznaną marskością wątroby.
Diagnostyka zwłóknienia wątroby
Złotym standardem w diagnostyce zwłóknienia wątroby jest biopsja z badaniem histologicznym. Ocenę histologiczną przeprowadza się według skal Desmeta (1984) zmodyfikowanych przez Serowa; Skala JSHAK lub METAVIR. W zależności od lokalizacji i częstości występowania wyróżnia się następujące formy zwłóknienia wątroby: żyłkowe i okołożylne (w centrum płatków i ścianach żył centralnych - charakterystyczne dla przewlekłego alkoholowego zapalenia wątroby); okołokomórkowe (wokół hepatocytów w przewlekłym wirusowym i alkoholowym zapaleniu wątroby); przegroda (koncentryczny wzrost tkanki włóknistej wokół kanałów żółciowych - z wirusowym zapaleniem wątroby); portal i periportal (w przypadku wirusowego, alkoholowego, autoimmunologicznego zapalenia wątroby); zwłóknienie okołoprzewodowe (wokół kanałów żółciowych w stwardniającym zapaleniu dróg żółciowych); mieszane (prezentowane są różne formy zwłóknienia).
Ze względu na inwazyjność, dość duży błąd badania histologicznego związany z „błędami w igle” podczas biopsji nakłuciowej wątroby oraz różnice w interpretacji wyników, w celu wczesnej diagnostyki procesów patologicznych, obecnie dużą uwagę zwraca się na nie -inwazyjne metody diagnostyki zwłóknienia. Należą do nich bioprognostyczne badania laboratoryjne; elastometrię wątroby i elastografię MR; USG, CT, MRI wątroby, USG Doppler naczyń wątroby i śledziony z obliczeniem wskaźników zwłóknienia i nadciśnienia wrotnego.
Markery zwłóknienia dzielą się na bezpośrednie (biomarkery), odzwierciedlające metabolizm ECM i pośrednie, wskazujące na niewydolność wątroby. Markery bezpośrednie obejmują peptyd na końcu karboksylowym prokolagenu typu I, peptyd na końcu aminowym prokolagenu typu III, TIMP-1, 2, kolagen typu IV, kwas hialuronowy, lamininę, MMP-2. Oznaczanie tych substancji wykorzystywane jest w badaniach klinicznych.
Do praktyki klinicznej zaproponowano różne obliczone wskaźniki prognostyczne do oceny nasilenia zwłóknienia wątroby za pomocą markerów pośrednich: APRI, ELF, FIB-4, FibroFast, FibroIndex, FibroMeter, FPI, Forns, GUCI, Hepascore, HALT-C, MDA, PGA, PGA.
Do oceny stopnia zaawansowania zwłóknienia wątroby wykorzystuje się systemy Fibro-test i Acti-test, uznając je za alternatywę dla biopsji. Fibrotest obejmuje 5 wskaźników biochemicznych: alfa 2-makroglobulinę (aktywuje komórki Ito), haptoglobinę (odzwierciedla pobudzenie komórek wątroby przez interleukiny), apolipoproteinę A1, transpeptydazę gamma-glutamylową, bilirubinę całkowitą. Acti-test (ocenia aktywność martwiczo-zapalną wirusa) oprócz wymienionych składników zawiera aminotransferazę alaninową – ALT. FibroMax to połączenie pięciu nieinwazyjnych testów: FibroTest i ActiTest, Steato-Test (diagnozuje stłuszczenie wątroby), NeshTest (diagnozuje niealkoholowe stłuszczeniowe zapalenie wątroby), AshTest (diagnozuje ciężkie alkoholowe stłuszczeniowe zapalenie wątroby). FibroMax wykrywa alfa 2-makroglobulinę, haptoglobinę, apolipoproteinę A1, transpeptydazę gamma-glutamylową, bilirubinę całkowitą, ALT, AST, glukozę, trójglicerydy, cholesterol. Na podstawie uzyskanych danych, biorąc pod uwagę wiek i płeć pacjenta, oblicza się stopień zaawansowania zwłóknienia oraz poziom aktywności zapalenia wątroby. Stosowanie testów ograniczają objawy cholestazy, które negatywnie wpływają na wartość diagnostyczną testów oraz wysoki koszt badania.
Działanie urządzenia, oparte na elastografii ultradźwiękowej wątroby poprzez przepuszczanie fal (drgań) przez wątrobę i wychwytywanie ich za pomocą czujnika, pozwala na ocenę stopnia zwłóknienia wątroby już we wczesnych stadiach. Urządzenie dostarcza niewiele informacji na temat otyłości i wodobrzusza.
Elastografia rezonansu magnetycznego jest bezpośrednią metodą określania gęstości wątroby, pozwalającą na oznaczenie F0 w porównaniu ze zdrowymi ochotnikami, czego nie wykazano dotychczas innymi metodami oceny zwłóknienia.
W przyszłości możliwe będzie określenie obecności i tempa progresji zwłóknienia w zależności od czynnika etiologicznego. Rozwiązanie tych problemów umożliwia zdiagnozowanie wczesnych stadiów zwłóknienia, a co za tym idzie, skuteczne jego leczenie.
Leczenie
Terapia przeciwfibrotyczna jest nierozerwalnie związana z leczeniem etiologicznym i patogenetycznym przewlekłego zapalenia wątroby (tab. 2). W większości przypadków leki eliminujące czynniki etiologiczne zapalenia wątroby są jednocześnie lekami przeciwfibrotycznymi. Działanie przeciwfibrotyczne wykryto w lekach przeciwwirusowych, pentoksyfilinie, fosfatydylocholinie, glikokortykosteroidach, donorach tlenku azotu, witaminie E, antagonistach receptora endoteliny, antagonistach receptora angiotensyny, inhibitorach enzymu konwertującego angiotensynę, sylimarynie. Trwają poszukiwania leków hamujących fibrogenezę do stosowania w sytuacjach, gdy wpływ na czynnik sprawczy jest utrudniony: przeciwutleniacze (betaina, probukol, N-acetylocysteina), hepatoprotektory (sylimaryna, UDCA, S-adenozylometionina, niezbędne fosfolipidy), redukujące aktywność czynnika martwicy nowotworu (pentoksyfilina, adiponektyna, infliksymab).
Trwają poszukiwania leków o ukierunkowanym działaniu przeciwfibrotycznym:
- eliminacja czynnika uszkadzającego (interleukina 10, inhibitory TNF - działanie przeciwzapalne; przeciwutleniacze - tłumienie procesów zwłóknieniowych w odpowiedzi na stres oksydacyjny);
- tłumienie aktywności profibrotycznej komórek gwiaździstych (interferony, czynnik wzrostu hepatocytów, agoniści PPARγ);
- utrzymanie aktywnego działania przeciwfibrotycznego komórek gwiaździstych (antagoniści TGFβ 1 – zmniejszają syntezę macierzy i zwiększają jej rozkład; antagoniści PDGF, tlenek azotu, inhibitory ACE – hamują proliferację komórek Ito);
- wpływ na wydzielanie kolagenu przez komórki gwiaździste wątroby (inhibitory ACE, inhibitory polihydroksylazy, interferon γ - zmniejszają zwłóknienie; antagoniści receptora endoteliny - zmniejszają zwłóknienie i nadciśnienie wrotne);
- wpływ na apoptozę komórek Ito (hylotoksyna, NGF – neuronalny czynnik wzrostu – stymulują apoptozę);
- zwiększony rozkład macierzy kolagenowej (metaloproteinazy, antagoniści inhibitorów tkankowych MMP; antagoniści TGFβ 1 – zmniejszają aktywność TIMP i zwiększają aktywność MMP; relaksyna – zmniejszają aktywność TIMP i zwiększają aktywność MMP).
Obiecujące wydaje się zastosowanie leku sylimaryna (Legalon) w celach przeciwfibrotycznych. Sylimaryna to oficjalna nazwa grupy czterech izomerów flawonolignanu (silibininy, izosilibininy, sylikrystyny i sylidianiny), izolowanych z ekstraktów z owoców ostropestu plamistego (Cardui mariae fructus) i zawartych w Legalonie 70 i 140 (dawka sylimaryny).
Podczas badań klinicznych wykazano, że obok działania przeciwzapalnego, przeciwutleniającego, antytoksycznego, hipolipidemicznego i przeciwnowotworowego, sylimaryna ma wyraźne działanie przeciwfibrotyczne. Dzieje się tak za sprawą wpływu na transformujący czynnik wzrostu β i ekspresję genów w komórkach Ito, a także zwiększonego usuwania wolnych rodników i bezpośredniego hamowania syntezy kolagenu.
Zależność farmakodynamiki sylimaryny/sylibininy od działania klinicznego Legalonu® przedstawiono w Tabeli 3. Wskazane mechanizmy działania decydują o wartości terapeutycznej Legalonu® w rozsianych chorobach wątroby. Liczne badania wykazały wysoką skuteczność Legalonu® przy długotrwałym stosowaniu w hamowaniu reakcji zapalno-martwiczej w wątrobie, hamowaniu rozwoju zwłóknienia i zmniejszaniu ryzyka złośliwej transformacji hepatocytów w marskości wątroby.
W modelu alkoholowego zwłóknienia wątroby u małp badanie morfologiczne wątroby i badanie markerów zwłóknienia w surowicy ujawniło, że u zwierząt leczonych sylimaryną postęp zwłóknienia był znacznie mniejszy i rzadziej rozwijała się marskość wątroby.
Wpływ Legalonu na zwłóknienie wątroby badano u 792 pacjentów z przewlekłymi chorobami wątroby, w tym marskością wątroby. Jako marker fibrogenezy wybrano wskaźnik P-III-NP. Okres obserwacji wynosił średnio 107 dni. Przy początkowo podwyższonym poziomie P-III-NP, po 3 miesiącach leczenia Legalonem, poziom P-III-NP obniżył się do normy.
Wyniki 5 międzynarodowych badań kontrolowanych placebo (w których wzięło udział 600 pacjentów) wykazały, że 4-letnie przeżycie pacjentów z alkoholową marskością wątroby podczas stosowania leku Legalon było istotnie statystycznie wyższe w porównaniu z grupą pacjentów otrzymujących placebo. Analizując podgrupy wykazano, że leczenie Legalonem było skuteczne w przypadku alkoholowej marskości wątroby, niezależnie od jej ciężkości i stopnia zaawansowania, a w podgrupie z marskością wątroby w stopniu A Chaida-Pugha, niezależnie od jej etiologii. W podgrupie chorych z alkoholową marskością wątroby w przebiegu wirusowego zapalenia wątroby w okresie obserwacji nie odnotowano zgonów, natomiast w grupie placebo odnotowano 4 zgony z powodu dekompensacji marskości wątroby.
Zwłóknienie jest obecnie nazywane kamieniem węgielnym przewlekłej patologii wątroby. To właśnie powoduje powstawanie marskości wątroby, dlatego wczesna diagnostyka i leczenie zwłóknienia jest w obecnych czasach niezwykle istotne i stanowi zadanie przyszłych badań naukowych.
Literatura
1. Sherlock Sh, Dooley J. Choroby wątroby i dróg żółciowych: praktyczny przewodnik. M.: GEOTAR-MED, 2002. 864 s.
2. Bataller R., Brenner D. A. Zwłóknienie wątroby. J. Clin. Inwestować. 2005; 115(2):209-218.
3. Iredale J. P. Modele zwłóknienia wątroby: badanie dynamicznej natury zapalenia i naprawy narządu stałego. J. Clin. Inwestować. 2007; 117(3):539-548.
4. Parsons C. J., Takashima M., Rippe RA. Molekularne mechanizmy fibrogenezy wątroby. J Gastroenterol Hepatol. 2007; 22(1):79-84.
5. Storozhakov G.I., Ivkova A.N. Patogenetyczne aspekty fibrogenezy w przewlekłych chorobach wątroby. Klin. Perspektywy gastroenterologii, hepatologii 2009; 2:3-10.
6. Pavlov Ch.S., Zołotarevsky V.B., Tomkevich M.S. Możliwości odwracalności marskości wątroby. Rossa. Journal of Gastroenterology, Hepatology and Coloproctology 2006; 1:20-29.
7. Severov M.V. Odwracalność zwłóknienia i marskości wątroby w zakażeniu HCV. Forum Hepatologiczne 2008; 1:2-6.
8. Pavlov Ch.S., Glushenkov D.V., Ivashkin V.T. Współczesne możliwości elastometrii, fibro- i acti-testu w diagnostyce zwłóknienia wątroby. Rossa. Journal of Gastroenterology, Hepatology and Coloproctology 2008; 4:43-52.
9. Rockey DC Terapia przeciwzwłóknieniowa w przewlekłej chorobie wątroby Clin. Gastroenterol. Hepatol. 2005; 3:95-107.
10. Dehmlow C, Erhard J. Hepatologia 1996; 23:749-754.
11. Lieber i in. Gastroenterol. 2003; 37:336-339.
12. Schuppan, Z. Allg. Med. 1998; 74:577-584.