„reacție senzorio-motorie. reacția motorie a unui boxer la apariția unui stimul extern.” Reacția în lanț a uraniului și reacția în lanț a senzațiilor

5. „REACȚIA SENSORMOTORULUI. REACȚIA MOTORĂ A UNUI BOXER LA APARIȚIA UNUI IRITANT EXTERN” În execuția cu viteză mare a unei lovituri, un rol important este acordat modului în care boxerul reacționează la apariția unui stimul extern (sunet, semnal, lumină pe dinamometru înainte

Antigen, complement și auxiliar, indicator sau sistem hemolitic - ser hemolitic și eritrocite de oaie.

Dacă în primul sistem se formează un complex specific antigen + anticorp, atunci complementul este adsorbit (se combină cu acest complex) și hemoliza nu are loc în al doilea sistem.

Reacția necesită:

1. Ser de testare, care este obținut din sângele prelevat prin puncția venei ulnare a pacientului. După coagularea sângelui, serul este aspirat într-un tub separat și inactivat timp de 30 de minute la 56 °C într-o baie de apă.

2. Antigen - o suspensie de gonococi uciși.

3. Globulele roșii de oaie sunt obținute din sânge defibrinat colectat steril. Se spală prin centrifugare de 3 ori cu noi porții de soluție salină. În reacție se folosește o suspensie de 3% de globule roșii.

4. Serul hemolitic se prepară în prealabil prin imunizarea iepurilor cu hematii de oaie. Înainte de utilizare, serul este titrat.

5. Complement – ​​ser proaspăt de cobai. Sângele este aspirat din inima unui cobai cu o seringă, iar după coagulare, serul este separat. Înainte de experiment, doza de lucru de complement este titrată. Pentru a face acest lucru, luați diluția de bază a complementului 1:10 și turnați-o în eprubete de la 0,1 la 0,5, după care volumul din fiecare eprubetă este ajustat la 1,5 ml cu soluție salină.

În același timp, se prepară un sistem hemolitic - diluat în titru triplu, ser hemolitic + 3% suspensie de eritrocite de oaie. Ambele ingrediente sunt în volume diferite și ținute într-un termostat timp de 30 de minute (sensibilizarea amestecului), după care amestecul se adaugă 1 ml în eprubete și se pune într-un termostat timp de 30 de minute. 2 eprubete servesc drept control:

1. 1 ml sistem hemolitic + 1,5 ml soluție fiziologică;

2. 0,5 ml complement 1:10 + 0,5 ml suspensie de globule roșii + 1,5 ml ser fiziologic.

Titrul de complement este cantitatea minimă la care mai are loc hemoliza. Pentru a stabili reacția, se ia o doză de lucru de complement, crescută față de titrul cu 20-25%, adică, de obicei, cantitatea de complement care este prezentă în penultimul tub cu hemoliză. Creșterea dozei de complement este necesară deoarece în reacție activitatea complementului poate fi oarecum suprimată de alte ingrediente ale reacției (antigen, ser).
43) RSK Wasserman

Plasat pentru a diagnostica sifilisul pentru a detecta anticorpi, precum și pentru a determina eficacitatea terapiei specifice. Se bazează pe principiul reacției de fixare a complementului Bordet-Gengou. O diferență semnificativă între reacția Wasserman este nespecificitatea antigenului: extractele lipoide din organele normale ale animalelor sunt folosite ca antigen.

Pentru a efectua reacția Wasserman, este necesar să aveți serul pacientului, agenți de diagnostic, antigene cu reacție încrucișată nr. 1, nr. 2, complement, ser hemolitic, globule roșii de oaie și soluție fiziologică.

Diagnosticum nr. 1 - specific, treponemal.

Diagnosticum No. 2 este un antigen nespecific, cardiolipin, care sunt extracte foarte purificate de inimă de bovină cu o compoziție chimică constantă de lipoide. Lipoidele sunt apropiate ca compoziție chimică de lipoizii din treponema pallidum, prin urmare, deși nu sunt specifici, fixează anticorpi împotriva spirochetei.

Acești antigeni sunt produși central și sunt utilizați diluați în reacție conform titrului indicat pe etichetă.

Concomitent cu experimentul principal, sunt plasate 2 controale: cu seruri evident negative și evident pozitive.

Stabilirea experimentului principal

Mai întâi, serul de testare inactivat și diluat 1:5 este turnat în 4 eprubete. Apoi antigenele sunt turnate în 2 eprubete (Nr. 1, Nr. 2), iar soluția fiziologică este turnată în a 3-a eprubetă. După aceasta, în toate tuburile se adaugă o doză de lucru de complement. După amestecarea ingredientelor, suportul cu eprubete este plasat într-un termostat la 37 °C timp de 30 de minute. După păstrarea într-un termostat, sistemul hemolitic este adăugat în toate eprubetele. Tuburile sunt plasate din nou într-un termostat timp de 2 ore și apoi lăsate la temperatura camerei. A doua zi, se notează rezultatul se evaluează gradul de intensitate al reacției, patru plusuri (++++), trei (+++), două (++) și unul (+) - în funcție de intensitate. de culoarea lichidului și de dimensiunea sedimentului de globule roșii din partea de jos. Hemoliza completă este indicată de un (-) minus. Dacă există o discrepanță puternică între rezultatele cu antigeni diferiți, experimentul se repetă cu o nouă porțiune de sânge.
44) RIT-r. Imobilizarea Treponema pallidum.

Această reacție este utilizată atât în ​​scopuri de diagnostic, cât și pentru a recunoaște rezultatele fals pozitive ale testelor serologice standard, în special pentru sifilisul latent.

RIBT este că, în prezența imobilizinelor în serul pacienților cu sifilis și complement activ, treponema pallidum își pierde mobilitatea.

RIBT este plasat în cutii sterile. Reacția implică serul de testare, complementul și antigenul.

În RIBT, antigenul este o suspensie de treponem palid dintr-un testicul de iepure în stadiile incipiente (7-8 zile după infectare) ale orhitei sifilitice. Un mediu special de suspensie păstrează viabilitatea Treponema pallidum cel puțin o zi. RIBT folosește complement de cobai. RIBT apare în condiții anaerobe. Eprubete cu ingrediente sunt plasate într-un microanaerostat, din care este aspirat aerul atmosferic și se injectează un amestec de gaz (95 părți azot și 5 părți dioxid de carbon). Microanaerostatul cu eprubete se pune într-un termostat (35°C) timp de 18-20 ore.

În paralel cu formularea reacției, se efectuează studii de control cu ​​ser de sânge pozitiv și negativ prelevat din experiența anterioară.

Rezultatele RIBT sunt evaluate după îndepărtarea tuburilor din termostat (adică după 18-20 de ore de experiment). Folosind o pipetă Pasteur, o picătură din conținutul eprubetei este aplicată pe o lamă de sticlă, care este acoperită cu un capac de sticlă și examinată la un microscop cu câmp întunecat (obiectiv 40, ocular 10). Când până la 20% din treponemul palid sunt imobilizați, reacția este considerată negativă, de la 21 la 30% - îndoielnică, de la 31 la 50% slab pozitivă, de la 51 la 100% - pozitivă. Procentul de imobilizare a Treponema pallidum este determinat folosind un tabel special.

45) Reacția opson-fagocitară

Mecanism: creșterea fagocitozei celulelor microbiene sub influența efectelor prietenoase ale anticorpilor, serului imunitar și complementului.

Componente de reacție:

1) antigen - cultura microbiana zilnica;

3) complement - ser proaspăt de cobai;

4) fagocite - suspensie de leucocite.

Opsoninele sunt anticorpi care se găsesc în serurile normale și imune și pregătesc microbii pentru fagocitoză.

Reacția se realizează în eprubete speciale la t=37° minute. Apoi se prepară frotiuri din fiecare eprubetă, se numără 100 de fagocite și se determină numărul de microcontroale fagocitate.

Index opsonic = indice fagocitar. ser/indicator fagocitar al serului normal

Cu cât este mai mare indicele opsonic (trebuie să fie >1) al serului testat și, prin urmare, cu atât este mai mare! bruceloză).

Se utilizează pentru determinarea opsoninelor - anticorpi care stimulează activitatea fagocitară a leucocitelor, adică. serodiagnosticul infecțiilor, cum ar fi bruceloza.

Întărirea fagocitozei are loc datorită atașării opsoninelor cu centrii activi (fragmentul Rav) la determinanții bacterieni, iar apoi cu ajutorul fragmentelor Pc la receptorii Pc ai fagocitelor. Serul normal conține cantități mici de opsonine, care își exercită efectele în prezența complementului. Există mai multe opsonine în serul imunitar, iar activitatea lor este mai puțin dependentă de complement.

Componente:

Test de ser

Ser normal

Cultură microbiană zilnică (de exemplu, stafilococică)

Fagocite - o suspensie de neutrofile

Se incubează la 37°C timp de 30 de minute. Frotiurile sunt preparate din fiecare eprubetă, colorate conform Romanovsky-Giemsa, iar numărul de microbi din 100 sau mai mulți neugrofili este numărat la microscop, adică. determina indicatorul fagocitar.

Indicator fagocitar - numărul de microbi absorbiți de un neutrofil.

Index opsonic - indicator fagocitar al serului imunitar (test) / indicator fagocitar al serului normal.

Cu cât indicele opsonic este mai mare (trebuie să fie > 1), cu atât imunitatea este mai mare.

Indicele opson-fagocitar este un indicator digital = numărul de fagocite x evaluarea fagocitozei (în funcție de numărul de microbi absorbiți). Valoarea maximă este -75.

46) RN pe șoareci pentru a stabili exotoxina

Această reacție se bazează pe capacitatea unui ser antitoxic specific de a neutraliza exotoxina.

Anticorpii serici imunitari sunt capabili să neutralizeze efectele dăunătoare ale microbilor sau toxinelor acestora asupra celulelor și țesuturilor sensibile, ceea ce este asociat cu blocarea antigenelor microbiene de către anticorpi, adică neutralizarea acestora.

Reacția de neutralizare (RN) se realizează prin introducerea unui amestec antigen-anticorp în animale sau în obiecte de testare sensibile (cultură celulară, embrioni). În absența efectelor dăunătoare ale microorganismelor sau ale antigenelor sau toxinelor acestora la animale și obiectele de testat, ele vorbesc despre efectul neutralizant al serului imun și, prin urmare, despre specificitatea interacțiunii complexului antigen-anticorp.

Pentru a efectua reacția, materialul de testat, care ar trebui să conțină o exotoxină, este amestecat cu ser antitoxic, păstrat într-un termostat și administrat animalelor (cobai, șoareci). Animalele de control sunt injectate cu filtratul materialului de testat, netratat cu ser. Dacă exotoxina este neutralizată cu ser antitoxic, animalele din lotul experimental vor rămâne în viață. Animalele de control vor muri ca urmare a exotoxinei.

Reacția de neutralizare a exotoxinei are loc atunci când interacționează cu serul antitoxic (anticorpi antitoxină). Ca urmare a formării complexului antigen-anticorp, toxina își pierde proprietățile toxice.

Reacția de neutralizare este efectuată pentru a detecta și titra toxine, toxoizi sau antitoxine.

Toxinele sunt obținute prin filtrarea unui mediu de cultură lichid sau a materialului de testat în care au crescut bacterii toxigenice. Când este tratată cu formaldehidă timp de 30-45 de zile la o temperatură de 37°C, toxina este transformată în toxoid, care este folosit pentru a imuniza animalele pentru a obține ser antitoxic.

Reacție de neutralizare in vivo. Pentru a determina tipul de toxină, aceasta este amestecată cu ser antitoxic de diagnostic și acest amestec este injectat în șoareci albi. La neutralizarea toxinei cu ser antitoxic, șoarecii nu mor.

Reacția de neutralizare este utilizată pentru a determina imunitatea antitoxică la copiii cu difterie (testul Schick) și scarlatina (testul Dick). Pentru a face acest lucru, o anumită cantitate din toxina corespunzătoare (1/40 DLM) este injectată intradermic în zona antebrațului. Dacă în organism există antitoxine, toxina va fi neutralizată și reacția va fi negativă. În absența antitoxinelor în organism, apare o reacție inflamatorie la locul injectării toxinelor.
47) RN (reacție de neutralizare) pe șoareci pentru a identifica virusul encefalitei transmis de căpușe

Virusul TBE este patogen pentru o serie de animale de laborator și sălbatice. Soarecii albi nou-născuți și tinerii sunt cei mai sensibili. După infectarea creierului, intraperitoneal, intramuscular, aceste animale dezvoltă encefalită, care se termină cu moartea animalelor. Dintre animalele de fermă, caprele sunt cele mai sensibile la virusul TBE, oile și vacile sunt mai puțin sensibile, iar caii sunt slab sensibili. Virusul TBE are un efect citopatogen (CPE), provocând modificări citopatice în culturile primare și continue de celule renale embrionare porcine (SPEB și RPE) și se înmulțește fără un CPE pronunțat în multe alte culturi celulare. În creierul șoarecilor infectați și în fluidul de cultură al culturilor infectate are loc acumularea virusului TBE și a antigenelor virale specifice: fixarea complementului, hemaglutinarea, precipitarea etc.

Virusul TBE persistă mult timp la temperaturi scăzute (mod optim -60 grade C și mai jos), tolerează bine liofilizarea, persistă în stare uscată mulți ani, dar este rapid inactivat la temperatura camerei. Fierberea o omoară în 2 minute, iar în lapte fierbinte la 60 de grade. C moare în 20 de minute.

Formalina, fenolul, alcoolul și alți dezinfectanți și radiațiile ultraviolete au, de asemenea, un efect de inactivare.

Reacția de neutralizare se bazează pe capacitatea serurilor imune specifice de a stinge efectul infecțios al virusurilor. Aplicabil în două direcții:

1) pentru tiparea virusurilor izolate;

2) pentru titrarea anticorpilor în serurile celor care s-au recuperat.

Configurarea reacției:

1. Pe animale de laborator. Criterii pentru prezența unui virus

servește la moartea animalelor de laborator. Se calculează LD50

Diluția maximă a suspensiei virale, care

a provocat moartea a 50% dintre animalele infectate. Pentru

Se realizează identificarea virusului encefalitei transmise de căpușe

infecția intracerebrală a șoarecilor albi.

2. În culturi de țesuturi. Rezultatele sunt luate în considerare

În funcție de efectul citopatic (CPE)

Conform metodei de testare a culorii bazată pe schimbarea culorii

Prin hemadsorbție.

3. În embrionul de pui. Rezultatele sunt înregistrate conform

apariția urmelor de-a lungul membranei corioalantoide.

48) RTGA

Această reacție este utilizată în practica virologică:

Pentru a determina tipul de virus (pe sticlă);

Pentru detectarea în serul pacienților (extins).

La stabilirea unei reacții indicative de inhibare a hemaglutinării, se aplică pe sticlă 1 picătură de ser imun specific tipului, apoi se adaugă 1 picătură de material de testat și 1 picătură de suspensie 5% de globule roșii.

Luarea în considerare a rezultatelor: tipul de virus este determinat de serul cu care nu a avut loc reacția, deoarece serul imunitar specific virusului izolat îi suprimă activitatea hemaglutinantă, iar globulele roșii nu se aglutinează.
49) RIF

Coloranții fluorocromi luminoși (izotiocianat de fluorisceină etc.) sunt utilizați ca etichete.

Există diverse modificări ale RIF. Pentru diagnosticarea expresă a bolilor infecțioase, Koons RIF este utilizat pentru a identifica microbii sau antigenele acestora în materialul de testat.

Există două metode de RIF conform lui Koons: directă și indirectă.

Componente RIF directe:

1) material de testare (scaunul evacuat de nazofaringe etc.);

2) ser imun specific marcat care conţine AT-la la antigenul dorit;

3) soluție izotonică de clorură de sodiu.

Un frotiu din materialul de testat este tratat cu antiser marcat.

Are loc reacția AG-AT. În timpul examinării microscopice luminiscente, fluorescența este detectată în zona în care sunt localizați complexele AG-AT.

Componentele RIF indirecte:

1) materialul studiat;

2) antiser specific;

3) ser antiglobulinic (AT-la împotriva imunoglobulinei), marcat cu fluorirom;

4) Soluție izotonică de clorură de sodiu.

Un frotiu din materialul de testat este tratat mai întâi cu ser imunitar la antigenul dorit și apoi cu ser antiglobulină marcat.

Complexele luminescente AG-AT - marcate AT sunt detectate folosind un microscop fluorescent.

Avantajul metodei indirecte este că nu este nevoie să se pregătească o gamă largă de seruri specifice fluorescente, ci se folosește un singur ser antiglobulinic fluorescent.

Există și un tip de RIF indirect cu 4 componente, atunci când complementul (ser de cobai) este introdus suplimentar. Într-o reacție pozitivă, se formează un complex de AG-AT - etichetat - complement AT.

Reacția se referă la reacții serologice care implică antigeni sau anticorpi marcați.

Se realizează prin metode directe și indirecte.

Prin metoda directă, antigenul este detectat în materialul de la pacient. Se folosește un ser fluorescent de diagnostic, care conține imunoglobuline izolate din serurile imune și marcate cu fluorocromi.

Antigenul specific este detectat sub formă de conglomerate luminiscente de culoare verde strălucitor, iar fundalul preparatului este colorat portocaliu-roșu.

Componentele reacției directe de imunofluorescență:

1) materialul studiat;

2) ser luminiscent specific;

3) microscop fluorescent.

La diagnosticarea gripei, se face diferențierea de agenții patogeni ai infecției cu parainfluenza și adenovirus. Tamponul nazofaringian este tratat cu ser gripal fluorescent sau imunoglobulină gripală.

Rezultatul „+” sub forma unei străluciri verzi se obține după 3 ore.

Prin metoda indirectă, anticorpii specifici sunt detectați și titrați. Titrul seric este diluția sa maximă la care se notează fluorescența „+ +”.

Componentele reacției indirecte de imunofluorescență

Pentru a căuta un antigen în timpul diagnosticului rapid:

1) material de testare (antigen);

2) ser specific;

3) ser luminescent antiglobulinic

4) microscop fluorescent.

/ specific fazei

Anticorpii serici se adsorb la antigen.

// faza nespecifica

Se utilizează ser antiglobulinic cu anticorpi marcați cu fluorocromi. Se formează un complex antigen + anticorp (I) + ser antiglobulină (II), care strălucește.

În tusea convulsivă, iritanții sunt bacilul Bordet-Gangou și toxinele acestuia, care pentru o lungă perioadă de timp provoacă iritarea constantă a receptorilor nervoși de pe membrana mucoasă a tractului respirator, ceea ce duce la crearea în sistemul nervos central (în centrii respiratorii și de tuse) a unui focar de excitare stagnant, care afectează natura respirației la copii.

Potrivit lui I. A. Arshavsky și V. D. Soboleva (1948), în perioada spasmodică, respirația este ținută la înălțimea inspirației (apnee inspiratorie). În acest moment, mușchii respiratori intră într-o stare de spasm tonic, care este deosebit de pronunțată la nivelul diafragmei. Acesta din urmă practic nu participă la actul de respirație în acest moment.

Durata spasmului inspirator - 3 - 45 s, pe fondul cărora apar impulsuri expiratorii scurte de putere scăzută, efectuate datorită mecanismului costal. Continuă până când copilul expiră tot aerul luat. Aceasta este urmată de o inhalare zgomotoasă forțată, însoțită de un fluier (repetare). Și toate acestea se repetă de mai multe ori în timpul atacului. I. A. Arshavsky, V. D. Sobolev (1948) consideră că baza convulsiilor inspiratorii este fenomenul Traube. Traube (1847), stimulând segmentul central al nervului vag cu un curent faradic, a observat oprirea respirației în faza de inspirație.

Pentru tuse convulsivă odată cu creșterea iritabilității, respirația se poate opri într-o fază sau alta (expirație sau inspirație), în special la copii în primele luni de viață.

Un focar stagnant de excitare în sistemul nervos central dobândește toate semnele unei dominante conform lui Ukhtomsky: excitabilitatea acestui focus este crescută, drept urmare atrage și rezumă toate iritațiile și impulsurile care intră în sistemul nervos central; excitația din focarul dominant iradiază către centrii vecini - vasculară (crește presiunea), musculară (se observă convulsii ale mușchilor feței și ale membrelor), emetică (vărsăturile apar la sfârșitul atacului); leziunea este persistentă, durează mult timp și lasă urme de reacție.

Acest lucru este bine confirmat în viață. Adesea, după 2-6 luni, un copil care a avut tuse convulsivă dezvoltă o tuse paroxistică din cauza altor boli ale tractului respirator (gripa, catar viral al căilor respiratorii superioare, pneumonie etc.).

„Ghid pentru infecții transmise prin aer”, I.K. Musabaev