32. Запліднення яйцеклітин поза організмом тварини (in vitro)
Позитивне значення - незважаючи на низький вихід ооцитів, при кожному вилученні можливість багаторазового використання тварини.
33. Особливості запліднення яйцеклітин in vitro у самок різних видівс.-г. тварин
Розробка системи запліднення та забезпечення ранніх стадійрозвитку ембріонів ссавців поза організмом тварини (in vitro) має значення у вирішенні низки наукових завдань та практичних питань, вкладених у підвищення ефективності розведення тварин.
Для цих цілей необхідні ембріони на ранніх стадіях розвитку, які можна отримати тільки хірургічними методами з яйцеводів, що є трудомістким і не дає достатньої кількості зародків для проведення цієї роботи.
Запліднення яйцеклітин ссавців in vitro включає такі основні етапи: дозрівання ооцитів, капацитацію сперматозоїдів, запліднення та забезпечення ранніх стадій розвитку.
Дозрівання ооцитів in vitro. Велика кількість статевих клітин у яєчниках ссавців, зокрема у великого рогатої худоби, овець і свиней з високим генетичним потенціалом, є джерелом величезного потенціалу відтворювальної здатності цих тварин у прискоренні генетичного прогресу в порівнянні з використанням можливостей нормальної овуляції. У цих видів тварин, як та інших ссавців, число ооцитів, що овулюють спонтанно під час полювання, становить лише незначну частину від тисяч ооцитів, які перебувають у яєчнику при народженні тварини. Інші ооцити регенерують усередині яєчника або, як кажуть зазвичай, піддаються атрезії. Природно виникало питання, чи не можна виділити ооцити з яєчників шляхом відповідної обробки та провести їхнє подальше запліднення поза організмом тварини. В даний час не розроблені методи використання всього запасу ооцитів у яєчниках тварин, але значна кількість ооцитів може бути отримана з порожнинних фолікулів для подальшого їхнього дозрівання та запліднення поза організмом.
В даний час застосування на практиці знайшло дозрівання in vitro тільки ооцитів великої рогатої худоби. Ооцити отримують з яєчників корів після забою тварин та шляхом прижиттєвого вилучення, 1-2 рази на тиждень. У першому випадку яєчники беруть від тварин після забою, доставляють до лабораторії в термостатованому контейнері протягом 1,5-2,0 год. У лабораторії яєчники двічі промивають свіжим буфером фосфатним. Ооцити вилучають із фолікулів, діаметр яких 2-6 мм, шляхом відсмоктування або розрізання яєчника на пластинки. Ооцити збирають у середу ТСМ 199 з додаванням 10% сироватки крові від корови в полюванні, потім двічі промивають та відбирають для подальшого дозрівання in vitro тільки ооцити з компактним кумулюсом та однорідною цитоплазмою.
Останнім часом розроблено спосіб прижиттєвого вилучення ооцитів із яєчників корів за допомогою ультразвукового приладу або лапароскопа. При цьому ооцити відсмоктують з фолікулів, діаметр яких не менше 2 мм, 1-2 рази на тиждень від однієї і тієї ж тварини. У середньому одержують одноразово 5-6 ооцитів на тварину. Менше 50% ооцитів придатні дозрівання in vitro.
Позитивне значення - незважаючи на низький вихід ооцитів, при кожному витягуванні можливість багаторазового використання тварини. Капацитація сперматозоїдів. Важливим етапом розробки методу запліднення у ссавців було відкриття явища капацитації сперміїв. У 1951 р. М.К. Чанг і водночас із ним Г.Р. Аустін встановили, що запліднення у ссавців настає лише в тому випадку, якщо спермін протягом кількох годин до овуляції перебувають у яйцеводі тварини. Грунтуючись на спостереженнях щодо вивчення проникнення сперміїв яйцеклітини щура в різні терміни після спарювання Аустін ввів термін капацитації. Він означає, що в сперміні мають відбутися деякі фізіологічні зміни до того, як сперматозоїд набуде здатності до запліднення.
Розроблено кілька методів капацитації еякульованих сперміїв свійських тварин. Для видалення білків із поверхні сперміїв, які, мабуть, гальмують капацитацію сперміїв, було використане середовище з високою іонною силою.
Однак найбільшого визнання отримав спосіб капацитації сперматозоїдів з використанням гепарину (Дж. Парріш та ін, 1985). Паєти із замороженим насінням бика відтають у водяній бані при 39°С протягом 30-40 с. Приблизно 250 мкл відтаненого насіння підшаровують під 1 мл середовища для капацитації. Середовище для капацитації складається з модифікованого середовища Тіройду, без іонів кальцію. Після інкубації протягом однієї години верхній шарсередовища об'ємом 0,5-0,8 мл, що містить більшість рухомих сперматозоїдів, видаляють з пробірки і двічі промивають центрифугуванням при 500 g протягом 7-10 хв. Після 15 хв інкубації з гепарином (200 мкг/мл) розбавляють суспензію до концентрації 50 мільйонів сперматозоїдів в мл.
Запліднення in vitro та забезпечення ранніх стадій розвитку ембріонів. Запліднення яйцеклітин у ссавців здійснюється в яйцеводах. Це ускладнює доступ дослідника до вивчення умов середовища, в якому відбувається процес запліднення. Тому система запліднення in vitro була б цінним аналітичним інструментом для вивчення біохімічних та фізіологічних факторів, що включаються до процесу успішного з'єднання гамет.
Застосовують наступну схему запліднення in vitro та культивування ранніх ембріонів великої рогатої худоби. Запліднення in vitro проводять у краплі модифікованого середовища Тіроїду. Після дозрівання in vitro ооцити частково очищають від навколишніх експандованих кумулюсних клітин і переносять у мікрокраплі по п'ять ооцитів у кожній. Суспензія сперматозоїдів об'ємом 2-5 мкл додається до середовища з ооцитами, щоб досягти концентрації сперматозоїдів у краплях 1-1,5 млн/мл. Через 44-48 годин після запліднення визначають наявність дроблення ооцитів. Потім ембріони поміщають на моношар епітеліальних клітин для подальшого розвиткупротягом п'яти днів.
Екстракорпоральне запліднення (від лат. extra- Зовні, поза і лат. corpus- Тіло, тобто запліднення поза тілом, скор. ЕКО) - медична технологія, що використовується для лікування безпліддя. Синоніми: "запліднення в пробірці", "запліднення in vitro", "штучне запліднення".
Метод (ЕКО) був вперше застосований у медичної практикив 1978 р. Суть процедури зводиться до отримання з яєчників жінки дозрілих яйцеклітин, запліднення їх сперматозоїдами чоловіка (донора), вирощування ембріонів, що вийшли в спеціальному середовищі поза організмом жінки (інкубатор) і перенесення ембріонів в матку. Дітей, що народилися завдяки застосуванню цього методу, часто часто називають «пробірковими» дітьми, т.к. ті етапи розвитку яйцеклітини та ембріона, які зазвичай проходять у трубі в перші 2-3 дні після запліднення, при ЕКЗ відбуваються штучних умовах- «У пробірці».
Метод ЕКЗ відноситься до методів допоміжних репродуктивних технологій (ДРТ), які використовуються у разі, коли лікування безпліддя засобами «першої лінії» (індукція овуляції, внутрішньоматкова інсемінація, оперативне лікування) не дає результатів.
Протипоказаннями для проведення ЕКЗ є стан жінки, при яких вагітність та пологи загрожують здоров'ю матері або дитини, а саме:
- соматичні та психічні захворювання, що є протипоказаннями для виношування вагітності та пологів;
- вроджені вади розвитку чи набуті деформації порожнини матки, у яких неможлива імплантація ембріонів чи виношування вагітності;
- пухлини яєчників;
- доброякісні пухлини матки, що потребують оперативного лікування;
- гострі запальні захворюваннябудь-якої локалізації;
- злоякісні новоутворення будь-якої локалізації, у тому числі в анамнезі.
Протипоказання щодо ЕКО з боку чоловіки відсутні.
Головними вимогами для проведення ЕКЗ у Сінгапурі є:
- пара має офіційно перебувати у шлюбі;
- вік жінки не повинен перевищувати 45 років.
Етапи програми ЕКО
Технологію ЕКЗ здійснюють у спеціалізованих медичних установв умовах амбулаторного лікування. Для проведення процедури екстракорпорального запліднення необхідно одержати яйцеклітини, одержати сперматозоїди, провести запліднення in vitro, виростити ембріон, ввести ембріон у порожнину матки жінки.
Метою лікування методом ЕКЗ є отримання великої кількостіяйцеклітин для екстракорпорального запліднення (запліднення поза організмом жінки, у штучних умовах) спермою чоловіка (або донора) та перенесення отриманих таким чином ембріонів у порожнину матки жінки. Лікувальний циклЕКЗ триває 15-30 днів (залежно від виду протоколу) і складається з 4-х послідовних етапів:
Отримання яйцеклітин
Як правило, для екстракорпорального запліднення намагаються отримати кілька яйцеклітин, оскільки це підвищує ефективність лікування безплідності цим методом. Оскільки в нормі у жінки протягом одного менструального циклудозріває одна яйцеклітина, то для отримання кількох яйцеклітин проводять так звану процедуру "стимуляції суперовуляції". Для цього пацієнтці призначають гормональні ін'єкції.
препаратів. Для стимуляції використовують ін'єкції препаратів фолікулостимулюючого гормону (ФСГ), лютеїнізуючого гормону (ЛГ), хоріонічного гонадотропіну(ХГ), а також блокаторів гонадотропін-рилізинг гормону (ГнРГ). Поєднання видів і кількості гормональних препаратів, що вводяться, називають «схемою стимуляції». Існує кілька схем стимуляції суперовуляції, але остаточна кількість, типи та тривалість введення препаратів підбирають індивідуально для кожної жінки. Залежно від схеми, стимуляція суперовуляції займає час від 7 до 50 днів і вимагає. підшкірного введенняпрепаратів (щоденні ін'єкції або введення підшкірних капсул).
Дозрівання яйцеклітин безпосередньо не може бути визначене неінвазивними методами. Тому про дозрівання яйцеклітин судять опосередковано зростання фолікулів яєчника. Зростання фолікулів спостерігають за допомогою апаратів ультразвукового дослідження. Досягши домінантного фолікула певного розміру (16-20 мм) призначають процедуру вилучення яйцеклітин - пункцію фолікулів яєчника. Пункцію фолікулів проводять під загальною (частіше) або місцевою (рідше) анестезією, голку проводять трансвагінально, перебіг голки контролюють апаратом УЗД. Метою пункції є аспірація (відсмоктування) вмісту фолікула (фолікулярної рідини). Отриману рідину досліджують мікроскопом для виявлення яйцеклітин. Виявлені яйцеклітини відмивають від фолікулярної рідини та переносять у лабораторний посуд з культуральним середовищем. Посуд з яйцеклітинами поміщають в інкубатор, де вони містяться до запліднення.
Зазвичай використання гормональних препаратів та проведення пункції фолікулів не викликає негативних реакційу пацієнтки, але іноді можуть виникнути ускладнення. Ускладненням стимуляції суперовуляції є синдром гіперстимуляції яєчників (СГЯ), який може розвинутись через кілька днів після закінчення стимуляції. СГЯ виникає при дозріванні великої кількості фолікулів, які, трансформуючись у жовті тіласекретують велика кількістьестрогенів. При тяжкому перебігуСГЯ може знадобитися госпіталізація хворої. Ускладненням пункції фолікулів може бути гематома яєчника.
Отримання сперми
Сперму пацієнт одержує самостійно за допомогою мастурбації. Можливе використання перерваного коїтусу, або медичного презервативу без змащення. У разі неможливості отримання сперми шляхом еякуляції використовують хірургічні методи: аспірація вмісту епідидимісу, біопсія яєчка та ін. Сперму отримують у день пункції фолікулів дружини. Якщо одержання сперми в день пункції неможливе, то використовують попереднє одержання сперми з наступним заморожуванням і зберіганням рідкому азоті(Кріоконсервація). Перед заплідненням яйцеклітини сперматозоїди відокремлюють від насіннєвої рідини. Для цього проводять багаторазове центрифугування сперми в культуральному середовищі.
Запліднення in vitro
Безпосередньо ЕКЗ проводиться лікарями-ембріологами в умовах ембріологічної лабораторії. Власне запліднення проводять одним із двох способів: 1) інсемінація in vitro; 2) інтрацитоплазматична ін'єкція сперматозоїдів (ICSI, ІКСІ). При першому, більше простому способідо яйцеклітин, які знаходяться в живильному середовищі, додають суспензію сперматозоїдів Сперматозоїди додають із розрахунку 100-200 тис. на одну яйцеклітину. Протягом 2-3 годин один із сперматозоїдів проникає в яйцеклітину і цим запліднює її. При другому способі (ІКСІ) сперматозоїд вводять в яйцеклітину вручну за допомогою мікрохірургічних інструментів. ІКСІ використовують при дуже поганій якостісперми, коли запліднення може бути отримано навіть у чашці. Після проникнення сперматозоїда яйцеклітина вважається ембріоном. Можливість успішного запліднення 60-70%. Ембріони містять у штучних умовах від 2 до 5 днів.
Перенесення ембріона в матку
Перенесення ембріона до матки здійснюють через 2-5 днів після запліднення яйцеклітини. Процедура не вимагає анестезії (знеболювання) і виконується на гінекологічному крісліпротягом кількох хвилин. Ембріон переносять у матку, проводячи через шийку матки спеціальний еластичний катетер. Сучасна практикаЕКЗ така, що зазвичай здійснюють перенесення 2 ембріонів.
Додаткові заходи щодо культивування ембріонів
Протягом культивування ембріонів можливе здійснення додаткових лабораторних заходів. Кріоконсервація ембріонів – життєздатні ембріони заморожують та зберігають при температурі рідкого азоту. Надалі ембріони можуть бути розморожені та здійснено повторне перенесення в матку для досягнення вагітності. Преімплантаційна генетична діагностика(ПГД) - дослідження наявності деяких хромосомних або деяких генетичних патологійу ембріона до імплантації. Також цим методом можна визначити стать ембріона.
Вагітність при ЕКЗ настає у 30-40 % випадків. Тому сама процедура називається спробою. Існують деякі фактори, що призводять до невдачі програми ЕКЗ:
- при стимуляції овуляції відсутнє зростання яйцеклітин;
- передчасна овуляція;
- неможливість одержання яйцеклітини при пункції;
- погана якість отриманих яйцеклітин;
- відсутність запліднення через патологію сперми і поганої якості яйцеклітин;
- можливість проникнення в яйцеклітину декількох сперматозоїдів;
- остутсвие процесу поділу клітин ембріона або утворення ембріів поганої якості;
- проблеми імплантації (прикріплення) ембріонів у порожнині матки.
З 20 вагітностей пологами закінчуються в середньому 18. Після введення ембріонів один раз на 3 дні потрібно контролювати рівень гормонів у крові. Через 12 днів виконується тест на вагітність. У випадку багатоплідної вагітностіза бажанням жінки виконують редукцію — видалення непотрібних ембріонів.
Пологи при вагітності після ЕКЗ нічим не відрізняються від звичайних. У тих випадках, коли причина безпліддя — хвороба жінки, пологи проводяться з урахуванням конкретної хвороби і до способу запліднення це вже не має жодного стосунку.
На думку лікарів, діти зачаті у пробірці нічим не відрізняються від решти. Тим не менш, є думка, що такі діти краще навчаються, але частіше хворіють. Лікарі вважають, що це може бути пов'язане з надмірною опікою бажаної дитини.
Безпосередньо ЕКЗ проводиться лікарями-ембріологами в умовах ембріологічної лабораторії. Власне запліднення проводять одним із двох способів:
1) інсемінація in vitro;
2) інтрацитоплазматична ін'єкція сперматозоїдів (ICSI, ІКСІ).
При першому, більш простому способі до яйцеклітин, які знаходяться в поживному середовищі, додають суспензію сперматозоїдів. Сперматозоїди додають з розрахунку 100-200 тис. на одну яйцеклітину. Протягом 2-3 годин один із сперматозоїдів проникає в яйцеклітину і цим запліднює її. При другому способі (ІКСІ) сперматозоїд вводять в яйцеклітину вручну за допомогою мікрохірургічних інструментів. ІКСІ використовують при дуже поганій якості сперми, коли запліднення не може бути отримане навіть у чашці.
Після проникнення сперматозоїда яйцеклітина вважається ембріоном. Імовірність успішного запліднення 60-70%. Ембріони містять у штучних умовах від 2 до 6 днів. Для цього використовують так звані 2 -інкубатори - шафи, в яких підтримується температура 37 ° C і вміст 2 в атмосфері 5-6%. Ембріони (а раніше яйцеклітини) в інкубаторах безпосередньо містять у пластикових чашках (чашки Петрі, чашки Нунка, планшети тощо) з культуральним середовищем. У культуральне середовище для ембріонів входять основні фізіологічні іони (Na + , K + , Ca 2+ , Mg 2+ , C l- , CO 3- і т. д.), енергетичні субстрати (глюкоза, піруват, лактат), амінокислоти, часто вітаміни та білки сироватки крові. За час інкубації ембріон людини практично не збільшується в розмірі (перші 4 дні його розмір 0,1 мм, на 5 день 0,15-0,2 мм), але кількість клітин, що його складають, зростає багаторазово (1 день - 1 клітина; 2 день - 4 клітини; 3 день - 8 клітин; Перенесення ембріона в матку здійснюють через 2-5 днів після запліднення яйцеклітини. Процедура не вимагає анестезії (знеболювання) та виконується на гінекологічному кріслі протягом декількох хвилин. Ембріон переносять у матку, проводячи через шийку матки спеціальний еластичний катетер. Згідно з наказом № 67 МОЗ РФ в порожнину матки не рекомендується переносити більше 4 ембріонів, щоб уникнути багатоплідної вагітності. Сучасна практика ЕКЗ у Росії така, що зазвичай здійснюють перенесення 2 ембріонів. При неможливості виношування плода пацієнтка може вдатися до використання сурогатної матері.
Висновок
На сьогоднішній день у клініках заморожують (кріоконсервують) статеві клітини людини (сперматозоїди, ооцити), та ембріони на різних стадіяхрозвитку, отриманих у результаті програм ЕКЗ. Заморожують ембріони, що залишилися після перенесення у «свіжому» (тобто, стимульованому) циклі тільки гарної якості, т.к. згодом вони благополучно перенесуть розморожування.
Заморожування сперми застосовують у випадках: ракових захворюваньу чоловіків з метою забезпечення запасів сперми до початку хіміотерапії та подальшого використання замороженого зразка для отримання здорового потомства, невпевненість наявності партнера під час збору сперми для ЕКЗ - ситуація, характерна для іногородніх пацієнтів, донорства, у випадках планованого відкладеного батьківства. Можливо, у зв'язку з помітним зниженням чоловічої фертильності, запасання на користь сперми молодих чоловіків буде популяризуватися.
Заморожування яйцеклітин застосовують у випадках, коли стимуляція не рекомендується або протипоказана (наприклад, онкологічні та ін. захворювання) або неможливо провести запліднення клітин в даний період. Зрілий ооцит ( жіноча клітка) вкрай тендітний через великого розміру, рідкого вмісту та розташування хромосом та під час процедур заморожування/розморожування легко ушкоджується. Частота пологів після запліднення та інсемінації заморожених-розморожених ооцитів становить 3-4%. За допомогою кріоконсервації вирішується проблема зачаття та безпліддя. Крім лікування багатьох форм чоловічого та жіночої безплідності, ДРТ використовуються і для вирішення проблем фундаментальної біології та медицини. Використовуючи не потрібні для імплантації ембріони, вивчають механізми запліднення та розвитку ембріона, генетичну регуляцію ембріогенезу, можливості преімплантаційної діагностики. спадкових захворюваньта інші проблеми. Сперму пацієнт одержує самостійно за допомогою мастурбації. Можливе використання перерваного коїтусу, або медичного презервативу без змащення. У разі неможливості отримання сперми шляхом еякуляції використовують хірургічні методи: аспірація вмісту епідидимісу, біопсія яєчка та інше. Сперму отримують у день пункції фолікулів подружжя. Якщо одержання сперми в день пункції неможливе, то використовують попереднє одержання сперми з подальшим заморожуванням та зберіганням у рідкому азоті. Перед заплідненням яйцеклітини сперматозоїди відмивають від насіннєвої рідини та за допомогою спеціальних методіввиділяють найякісніші з них.
При неможливості використання сперми чоловіка або за відсутності пацієнтки статевого партнера, можливе використання сперми донора. Використання сперми донора проводиться у разі обов'язковому письмовій згоді чоловіка й регламентується наказом N107Н МОЗ РФ. Відповідно до цього наказу сперма донора використовують після 6-тимісячного карантину, тобто. через 6 місяців зберігання у замороженому стані та повторного обстеження донора, що підтверджує відсутність інфекційних захворювань.
Штучне запліднення – це реальний шанс безплідних парздобути батьківське щастя чи протиприродну процедуру, шанси успішності якої мізерно малі?
Материнство — найбільше щастя та радість для жінки, її покликання та найбільш природний стан. Коли ж із якихось об'єктивних причин жінка не може стати мамою, то на допомогу приходить штучне запліднення. Що ж це таке, які існують методи штучного запліднення, в чому особливості процедури, а також інші питання, що хвилюють жінок, розглянемо в цій статті.
Значення штучного запліднення
Штучне запліднення - це сучасний методвирішення проблеми безплідності, коли зачаття дитини не може відбуватися природним шляхом. Процедура штучного запліднення може проводитися з низки причин, у яких безпліддям хворий як із партнерів, і обоє.
Основними показаннями до проведення штучного запліднення є:
- полікістоз яєчників
- ендометріоз
- низька якість сперми партнера, яка може проявлятися в малорухомості сперматозоїдів, їх низькій концентрації та у великій кількості патологічних одиниць
- гормональна безплідність
- трубне безпліддя
- безпліддя, причини якого не встановлені
Завдяки прогресу в медицині сотні тисяч безплідних подружніх пар нарешті можуть пізнати радість материнства та батьківства, адже штучне запліднення дарує можливість мати дітей при формах безпліддя, які в минулому ставили хрест на репродуктивну функцію.
Відео: Зачаття in vitro
Методи штучного запліднення
Коли мова заходить про штучне запліднення, то багато хто думає про поширену та популярну процедуру ЕКЗ. Насправді існує кілька методів штучного вирішення проблеми безплідності:
- ІСМ - метод, при якому всередину матки жінки переносять сперматозоїди її чоловіка. Дана методиказастосовується у випадках, коли репродуктивні функціїжінки не порушені і вона не може стати матір'ю через низької якостісперми чоловіка або коли слиз у піхву жінки є агресивним середовищем для існування сперматозоїдів і вони гинуть так і не діставшись яйцеклітини
- ІСД - якщо сперма чоловіка непридатна до зачаття або він безплідний, то подружжю пропонується метод штучного запліднення спермою донора. Сама процедура даного методу практично не відрізняється від попереднього: жінці також вводять сперматозоїди в матку, але тільки донором сперми не є її чоловік.
- ГІФТ - коли причина безплідності полягає в тому, що яйцеклітина жінки не виходить у маткову трубу для запліднення, то ефективний метод інтратубарного перенесення гамет. Полягає він у перенесенні в маткову трубу попередньо взятої у жінки яйцеклітини, з'єднаної штучним шляхом з чоловічими сперматозоїдами. Чоловічі статеві клітини можуть належати як дружині, так і донору.
- ЗІФТ - метод, при якому в підготовлену гормонами матку вводять запліднену яйцеклітину. Попередньо у жінки методом проколу яєчника беруть здорову, придатну для зачаття яйцеклітину та запліднюють її поза жіночого організмусперматозоїдами. Після цього ембріон вводиться через шийку матки
- ІКСІ - ефективний методштучного запліднення, що передбачає запліднення яйцеклітини сперматозоїдом за допомогою найтоншої голки. Через прокол яєчок вилучається найактивніший сперматозоїд і впроваджується в яйцеклітину
- ЕКО - найпоширеніший вид штучного запліднення яйцеклітини поза організмом жінки, після якого ембріон імплантується в матку
ЕКО метод запліднення
Екстракорпоральне запліднення - сучасна репродуктивна технологія, до якої найчастіше вдаються у нашій країні, а й у всьому світі. Чим пояснюється така популярність методу? По-перше, така методика дає найбільше високі результати; по-друге, за допомогою ЕКЗ можна домогтися вагітності навіть у дуже складних випадкахбезпліддя, коли обидва партнери мають серйозні проблемирепродуктивної функції.
Процедура штучного запліднення
Для ЕКЗ необхідна наявність кількох яйцеклітин. Але оскільки в організмі жінки за один цикл може сформуватися лише одна яйцеклітина, то кількість вироблення яйцеклітин стимулюється гормонами.
Коли за допомогою УЗД визначається, що яєчник збільшений і в ньому сформувалися яйцеклітини, їх вилучають. Після цього ооцити відмивають від фолікулярної рідини та поміщають в інкубатор, де яйцеклітини перебувають до моменту штучного запліднення.
Якщо ж отримати яйцеклітини у жінки не вдається, використовуються донорські.
У цей же день здійснюється забір сперматозоїдів, які одержують методом мастурбації або перерваного статевого акту. В отриманій спермі виділяють сперматозоїди та відбирають найбільш активні з них. Після цього до пробірки з яйцеклітинами додають необхідну кількість активних сперматозоїдів, у розрахунку 100-200 тис. на яйцеклітину. Можливе застосування сперми донора.
Протягом 2-3 годин сперматозоїд запліднює яйцеклітину. Далі отриманий ембріон поміщають у сприятливе середовище, де він знаходиться від 2 до 6 днів. Весь цей час у пробірку вводяться необхідні вітаміни, фізіологічні іони, субстрати та амінокислоти Після цього проводиться безпосереднє перенесення ембріонів у матку, яке здійснюється за лічені хвилини на гінекологічному кріслі.
Якщо ж жінка не може сама виносити вагітність, то вдаються до сурогатного материнства.
Відео: Екстракорпоральне запліднення. Комаровський
Екстракорпоральне запліднення за та проти
Незважаючи на те що ЕКО відкриває для людей, які страждають на безплідність, можливість мати дітей ця процедура може мати також негативні наслідки, які іноді переходять у розряд плачевних:
- порушення гормонального фону
- гіперстимуляція яєчників
- вади розвитку плоду
- багатоплідна вагітність, при якій необхідно умертвляти зайві зародки для виживання хоча б одного-двох
Окрім цього, процедура ЕКО – дорогий захід, який дозволити собі можуть далеко не всі і, часом, бездітним парамдоводиться відмовитися від будь-яких надій стати батьками, оскільки сума їм просто непідйомна.
З іншого боку, в суспільстві існує упереджене ставлення до процедури штучного запліднення — «дітей з пробірки» помилково сприймають як неповноцінні та відстаючі у розвитку.
Сьогодні процедура ЕКЗ багато в чому вдосконалюється. Застосовуються нові технології, встановлюється точне дозування гормонів, що забезпечує необхідні процеси та водночас доставляє найменша шкодаорганізму жінки.
Важливо також, що вкрай рідко в порожнину матки міститься велика кількість ембріонів, як правило, лише два, що запобігає необхідності усунення зайвого зародка. Та й сама радість материнства перевищує все можливі ризикиі небажані наслідки, які може спричинити процедура ЕКЗ.
Скільки коштує штучне запліднення?
Ціна питання залежить від методу штучного запліднення. Вона може змінюватись у різних клініках, але в середньому прейскурант виглядає так:
- ярмо від 28 до 40 тис. руб
- ЕКЗ від 40 до 100 тис. руб
- ІКСІ від 100 до 150 тис. руб
Інші методи штучного запліднення в Росії не поширені через більш низьку ефективність.
Штучне запліднення самотніх жінок
Жінкам, які не мають партнера для зачаття дитини, але відчайдушно бажають завести дитину, допоможе процедура штучної інсемінації. У ході цієї процедури в матку жінки містять активні сперматозоїди донора, після чого відбувається запліднення яйцеклітини.
Безпосередньо перед процедурою жінка проходить обстеження та здає аналізи, за необхідності здійснюється гормональна стимуляція.
Штучне запліднення в домашніх умовах
Процедура штучної інсемінації може проводитись і в домашніх умовах. Її суть полягає в тому, що в матку жінки за допомогою шприца та катетера вводиться доза сперми, отримана при сім'явипорскуванні. Завдяки такій маніпуляції в рази збільшується шанс запліднення, адже всі сперматозоїди відправляються до яйцеклітини, тоді як при природному заплідненні частина насіння виливається та нейтралізується слизом піхви, навіть не потрапляючи до матки.
Для здійснення штучної інсемінації вдома потрібні стерильні:
- шприц
- катетер
- гінекологічне дзеркало
- піпетка
- дезінфікуючий засіб
- тампони
- рушник
- гінекологічні рукавички
Важливо проводити процедуру під час овуляції, яку можна визначити за допомогою спеціального тесту.
Проблема штучного запліднення
Детальний інструктаж про те, як здійснюється штучне запліднення будинку, можна дізнатися у гінеколога, але важливо розуміти, що здійснення такого важливого процесув домашніх умовах може нести ризик занесення в порожнину матки різних інфекцій, через можливу нестерильність використовуваних приладів.
Штучне запліднення: відгуки
Проаналізувавши відгуки жінок, які зважилися на штучне запліднення, можна виділити кілька ключових аспектів процедури:
- вагітність настає не завжди. Існують пари, що зважилися на ЕКО п'ять-шість разів поспіль, але так і не досягли бажаного
- багатьох безплідних жінок хвилює моральний аспект, адже проблема штучного запліднення досі викликає дискусії у різних колах, особливо з боку церкви, яка вважає подібні заходи протиприродними, а сім'ї, які мають дітей, засуджує, оскільки вони мають нести свій хрест і не йти проти волі Божої
- штучне запліднення – колосальне навантаження на організм жінки як у моральному, так і фізичному сенсі
- незважаючи на проблеми, з якими стикаються подружні пари, що все ж зважилися на штучне запліднення, позитивний результаті радість мати дитину перевищує всі ризики та негативні моментиі багатьох зупиняє лише ціна процедури від того, щоб завести дитину штучним шляхом повторно
Відео: Види штучного запліднення
Штучне запліднення
Штучне запліднення
Штучне запліднення – це процес запліднення, який виробляється з допомогою введення сперми безпосередньо в матку (штучна інсемінація) чи методом in vitro (поза організмом, «у пробірці»), тобто. екстракорпорально (ЕКО).
Види штучного запліднення:
- штучна інсемінація спермою чоловіка чи донора (ІІСМ/ІІСД);
- екстракорпоральне запліднення(ЕКО).
Залежно від свідчень жінці підбирається програма штучного запліднення.
- Внутрішньоматкова інсемінація - це введення спеціально підготовленої сперми за допомогою спеціального катетера безпосередньо в порожнину матки.
Таким чином, сперма не проходить бар'єри кислого середовищапіхви та щільного захисного слизу шийки матки, і відразу потрапляє в нейтральне середовище порожнини матки.
Після цього сперматозоїди самостійно просуваються до маткових труб і відбувається запліднення яйцеклітини так само, як за природного статевого контакту.
За даними літератури штучного запліднення жінки як лікування безпліддя застосовується вже понад 100 років. Ця процедурапроводиться тільки у спеціалізованих медичних клінікахза умови повного обстеженнячоловіків і жінок.
Обов'язковим є дослідження стану матки та маткових труб- гістеросальпінгографія ( рентгенологічне дослідженняіз застосуванням контрастної речовини) або лапароскопія (огляд матки за допомогою оптичного приладу– лапароскопа), щоб упевнитися у прохідності репродуктивних шляхів.
Для інсемінації може бути використана як нативна (жива), так і кріоконсервована сперма (попередньо розморожена). Сперма перед штучною інсемінацією очищається та концентрується.
Штучна інсемінація рекомендована жінкам із підвищеною в'язкістю шийного слизуабо кислотністю вагінального середовища. З боку партнера можуть бути такі показання, як ерректильна дисфункція, зниження кількості рухомих сперматозоїдів або підвищена в'язкістьсперми ін.
Процедура проводиться в операційній клініці, на гінекологічному кріслі спеціальним шприцем з катетером, за допомогою якого сперма і вводиться в порожнину матки. Після цієї процедури необхідно полежати протягом 15-20 хвилин. Процедура не потребує знеболювання.
- ЕКО – екстракорпоральне запліднення – це метод штучного запліднення, за якого чоловічі сперматозоїдиі жіночі яйцеклітини(попередньо вилучені з яєчників), що з'єднуються поза організмом, in vitro (у «склі», тобто в лабораторній пробірці).
Там відбувається самостійне запліднення, і отримані ембріони (1 або 2) через кілька днів переносять у матку жінки, де один або відразу обидва імплантуються в ендометрій (слизова оболонка порожнини матки) та розвиваються протягом 9 місяців.
Для отримання яйцеклітин протягом 2-3 тижнів проводиться стимуляція овуляції. гормональними препаратами. Після того, як дозріють відразу кілька яйцеклітин, репродуктолог витягує їх з яєчників (проводить пункцію фолікулів) і передає в ембріологічну лабораторію.
Штучне запліднення методом ІКСІ- це один з різновидів ЕКЗ. У цьому випадку лікар ембріолог за допомогою спеціальних інструментів під сильним збільшенням мікроскопа вводить до яйцеклітини найбільш фертильний сперматозоїд.
Отриманий після такого запліднення ембріон нічим не відрізняється від ембріонів, зачатих природним шляхом, також через кілька днів переноситься в матку жінки і розвивається протягом 9 місяців. Цей методуспішно застосовується у пацієнтів з чоловічим факторомбезпліддя, коли є відхилення від нормальних показниківсперми або після біопсії TESA при азооспермії.
Донорські програми при штучному заплідненні
Якщо у когось із подружжя відсутні свої здорові статеві клітини ЕКО може бути здійснено також і з донорською спермою, донорською яйцеклітиною. Донор перед здаванням своїх статевих клітин проходить ретельне медико-генетичне обстеження. Штучне запліднення спермою донора проводиться лише після дворазового обстеження з інтервалом 3 місяці.
У пар де жінці протипоказано виношування дитини (наприклад, при важких захворюванняхсерця) або воно фізично неможливе (через відсутність матки) застосовується ЕКЗ із сурогатною матір'ю.
Великою перевагою ЕКЗ є ще й те, що під час культивації ембріонів в ембріологічній лабораторії є можливість проведення преімплантаційної генетичної діагностики ембріона. Цей метод дозволяє виявити (якщо є) генетичні захворювання, хромосомні відхилення, аномалії розвитку (потворності). На відміну від багатьох інших клінік, «ВітроКлінік» ПГД проводиться на весь набір хромосом людини (тобто на 46 хромосом). Після такого аналізу в матку буде перенесено лише здорові ембріони.
Перед будь-якою програмою штучного запліднення пара проходить ретельно медичне обстеженнящодо виявлення можливих протипоказань. Перелік такого обстеження регламентований Наказом Міністерства охорони здоров'я і суворо дотримується нашої клініки.
Де зробити штучне запліднення?
Перед тим, як звернутися до лікаря з приводу подолання безпліддя, будь-яка подружня пара запитує: «Де можна зробити штучне запліднення на високому професійному рівні?».
Перед вибором такої клініки дотримуйтеся таких рекомендацій:
- У клініці мають працювати вузькі фахівцісаме з лікування безплідності: гінекологи-репродуктологи, урологи-андрологи, ембріологи та генетики.
- Центр штучного запліднення повинен використовувати у своїй роботі тільки якісні та оригінальні лікарські препаратита витратні матеріали для ЕКЗ.
- Реальні фахівці репродуктологи з кожною парою працюють індивідуально, тобто. вибір методу, схем стимуляції та підтримка ранніх термініввагітності підбирається фахівцем лише після ретельного вивчення анамнезу подружжя, минулого досвіду ЕКЗ (якщо такі були), віку, стану здоров'я на даний моментта багато інших.
- Досвідчені репродуктологи застосовують щадні схеми гормональних стимуляційдбаючи про здоров'я своїх пацієнтів та уникаючи гіперстимуляцій.
- Для виключення багатоплідної вагітності репродуктолог повинен переносити лише один або два ембріони (за показаннями). Три і більше – неприпустимо.
- Фахівці обраної Вами клініки повинні володіти всіма найсучаснішими техніками в репродуктивній медицині: ІКСІ, ПІКСІ, допоміжний хетчінг, генетична діагностика ембріона та ін.
- Аналізи сперми повинні виконуватися в лабораторії самої клініки фахівцями ембріологами, які оцінюють не лише морфологію сперматозоїдів, а й їхню фертильність.
- Вибирайте клініку, яка співпрацює з клініко-діагностичною лабораторією, сертифікованою міжнародним стандартам ISO. Якість виконуваних аналізів грає найважливішу рольпід час підготовки до ЕКЗ.
- Заздалегідь переконайтеся, що від первинної консультації і до кінця всієї програми ЕКО або штучної інсемінації Вас вестиме той самий репродуктолог (за винятком форс-мажорних ситуацій). Це говорить про відповідальність та націленість лікаря та клініки на позитивний результат.
- Віддавайте перевагу тим клінікам, де лікарі залишають пацієнтам свої контакти для зв'язку. Ви матимете можливість зателефонувати або написати на електронну поштусвого лікаря, якщо потрібні якісь уточнення або виникнуть питання.
- Добре, якщо в цій же клініці, де Ви робитимете ЕКО, є можливість залишитися для спостереження вагітності. Лікарі, знаючи всі нюанси Вашої вагітності, і маючи спадкоємність між собою, зроблять все, щоб довести її до кінця народження здорової дитини.
- Ціна у Москві на програми штучного запліднення у різних клініках може суттєво відрізнятися. Обов'язково уточнюйте у менеджера, скільки коштує штучне запліднення і що конкретно входить у кожну програму, що цікавить Вас, чи можна додавати туди якісь додаткові послуги, наприклад, ІКСІ або хетчінг, чи є варіанти з донорськими клітинами та ембріонами. Широкий асортиментрізних програм – великий плюс клініці. Це означає, що в цьому центрі штучного запліднення лікарі володіють усіма сучасними техніками ДРТ і можуть дозволити собі підібрати будь-яку програму для кожної пари.
Штучне запліднення не методом лікування безпліддя, а методом подолання безпліддя. Таким чином, воно долає перешкоди для досягнення вагітності. В даний час штучне запліднення використовується для подолання практично будь-яких причин безпліддя і дозволяє уникнути багатьох проблем із зачаттям.