Групову приналежністькрові за системою АВО визначають за допомогою реакції аглютинації Використовують три способи визначення груп крові за системою АВО:
За допомогою стандартних ізогемаглютинуючих сироваток;
За допомогою стандартних ізогемаглютинуючих сироваток та стандартних еритроцитів ( перехресний спосіб);
За допомогою моноклональних антитіл (цоліклонів анти-А та анти-В).
При необхідності визначення групи крові в екстреному порядку (при кровотечі необхідно термінове переливання крові) лікар стаціонару визначає групу крові сам (в лабораторії перевіряють перевірку, але постфактум).
1. Визначення груп крові за допомогою стандартних ізогемаглютинуючих сироваток.
Суть методу у виявленні у досліджуваній крові групових антигенів А та В за допомогою стандартних ізогемаглютинуючих сироваток. Для цього використовують реакцію аглютинації. Постановку реакції проводять у приміщенні з добрим освітленням при температурі 15-25С.
Методика проведення реакції
1. Перед початком реакції підписують тарілку (наносять прізвище та ініціали досліджуваного), після чого на неї під відповідні позначення наносять стандартні ізогемагглютинуючі сироватки I, II та ІІІ групв обсязі 0,1 мл (крапля близько 1 см у діаметрі). Щоб уникнути помилок, наносять дві серії сироваток кожної з груп, оскільки одна з серій може мати низьку активністьі не дати чіткої аглютинації. Усього виходить шість крапель, що утворюють два ряди по три краплі в наступному порядку ліворуч: 0(1), А(11), B(III).
2. Кров для дослідження беруть із пальця або з вени. Шість крапель досліджуваної крові величиною приблизно з шпилькову головку (0,01 мл, маленька крапля) послідовно переносять сухою скляною паличкою на пластину в шість крапок, кожну - поряд з краплею стандартної сироватки (кількість досліджуваної крові має бути приблизно в 10 разів менше кількості стандартної , з якою її змішують), потім їх обережно за допомогою скляних паличок із закругленими краями перемішують.
3. Після змішування тарілку періодично похитують.
Аглютинація починається протягом перших 10-30 с, спостереження слід обов'язково вести до 5 хв через можливість пізнішої аглютинації, наприклад з еритроцитами групи А2(2).
4. У краплі, де відбулася аглютинація, додають по одній краплі ізотонічного розчину хлориду натрію, після чого оцінюють результат реакції.
Трактування результатів
Реакція аглютинації може бути позитивною чи негативною. При позитивній реакції зазвичай протягом перших 10 - 30 з суміші з'являються видимі неозброєним поглядом дрібні червоні зернятка (аглютинати), що складаються зі склеєних еритроцитів. Дрібні зернятка поступово зливаються у більші зерна, а іноді в пластівці неправильної форми. При цьому сироватка частково або повністю знебарвлюється. Позитивна реакціяможе бути піскоподібною або пелюстковою.
Визначення резус-фактораАнтигенна система резус-фактора
У 1940 К. Ландштейнер і А. Вінер виявили в еритроцитах людини зовсім новий антиген, названий ними резус-фактором (Rh). Резус-фактор присутній у крові 85% людей, а 15% відсутній.
Система антигенів резус представлена п'ятьма основними антигенами: D, С, с, Е, е (раніше вважали, що їх шість, але пізніше було доведено, що алельного гена d немає). С і с, а також Е і е - аллельні антигени. Кожна з хромосом несе лише три гени з п'яти: D, С або с, Е або е.
Найбільш активний з усіх антигенів Rh0(D) – резус-фактор. Залежно від наявності чи відсутності кров людей ділять на резус-позитивную (Rh+) і резус-отрицательную (Rh-).
Способи визначення резус-фактора
Всі методи визначення резус-фактора ділять на способи, що застосовуються в клінічній практиці, та лабораторні способи.
Способи визначення Rho(D) у клінічній практиці
Методика проведення реакції.Дослідження проводять у центрифужних пробірках обсягом щонайменше 10 мл. На дно пробірки вносять одну краплю стандартного універсального реагенту, що є антирезусною сироваткою групи AB(IV), розведену 33% розчином декстрану потім до неї додають одну краплю досліджуваної крові (або еритроцитів). Круговим обертанням пробірки вміст розмазують її внутрішньої поверхнітаким чином, щоб вміст розтік по стінках. Це значно прискорює аглютинацію і робить її великолепестковою. Аглютинація на стінках пробірки настає протягом першої хвилини, але для утворення стійкого комплексу антиген-антитіло і чіткої аглютинації спостерігати не менше 3 хв. Потім для виключення неспецифічної агрегації еритроцитів до пробірки додають 2-3 мл фізіологічного розчину і перемішують шляхом однодворазового перевертання пробірки (без збовтування!).
Трактування результатів.
Наявність аглютинації (великі пластівці на тлі просвітленої рідини) вказує на резус-позитивну належність досліджуваної крові
Правило Оттенберга
піддаються аглютинації тільки еритроцити, що переливається донорської крові, так як аглютинини вливається крові розводяться в судинному русліпацієнта, їх титр стає низьким і вони не можуть аглютинувати еритроцити реципієнта. За правилом Оттенберга можна переливати кров, еритроцити якої не можуть бути аглютиновані сироваткою реципієнта.
Правило Оттенберга застосовується лише за переливанні до 0,5 л донорської крові (!).
Століттями вчені намагалися дізнатися про людському організміякнайбільше і навчитися зцілювати хворих від будь-якої хвороби. Одним із важливих параметрів є визначення групи крові цоліклонами. Медицина виділяє у людей лише чотири групи крові незалежно від статевої чи расової приналежності.Імунологічні ознаки, які становлять основну відмінність по групі еритроцитарних антигенів, передаються у спадок.
Що таке цоліклон
Визначення групи крові за допомогою різних лабораторних реагентів стандартний методдосліджень. Інформація групі крові вкрай важлива, особливо у випадках, коли людині потрібна екстрена допомога. Перед хірургічним втручаннямобов'язково визначається тип індивідуальних антигенних характеристик людини. Така сама процедура є обов'язково для військовослужбовців (інформація вказується на формі), для жінок перед пологами тощо.
Цоліклонами порівняно новий методдослідження. Цей аналіз може проводитись на будь-якому етапі стаціонарного лікування пацієнтів.
Для здійснення лабораторного дослідження не потрібно багато часу, достатньо всіх необхідних хімічних речовин(цоліклонів) та простого обладнання.
Цоліклони по суті є одним із видів імуноглобулінів (тип М). Це моноклональні антитіла, які були утворені за допомогою генної інженерії. Цоліклони отримані внаслідок впливу сироватки на стерильних лабораторних мишей. Утворюється скупчення рідини в черевної порожнинигризуна, яка містить ці антитіла.
Підготовка до процедури
Визначення груп крові за допомогою цоліклонів вимагає попередньої підготовкита дій згідно з встановленим алгоритмом. Обстановка в приміщенні, в якому проводиться аналіз, обумовлена окремо. Температура повітря має бути не нижче 15 і не вище 25 градусів, інакше результат дослідження не може вважатися достовірним. У приміщенні має бути пилу, тварин, комах та інших чинників, які можуть фізично вплинути процес проведення дослідження. Також проведення лабораторного аналізувимагає хорошого освітлення приміщення.
При використанні цоліклонів важливо тримати флакони щільно закопаними і не допускати пересихання реагентів, інакше здатність антитіл активним діямпомітно знижується. Перед процедурою готується необхідний інвентар. Для проведення аналізу знадобиться пробірка для біологічного зразка, планшет для нанесення реагентів, стерильні піпетки та палички для взаємодії з біологічними зразками.
Якщо лаборант проводить не лише лабораторне дослідження, але й забір крові, то необхідно підготувати одноразові шприци або вакуумні пробірки, джгут, медичний спирт, ватяні кулькита стерильні серветки. Також під рукою мають бути інструменти для маркування біообразів пацієнтів.
Проведення аналізу
У сучасній лабораторної діагностикивикористовується три види стандартних цоліклонів для визначення групи крові та резус фактора. Реагент типу «Анти-А» забарвлений у червоний колір, також забарвлений і флакон, ковпачок чи етикетка флакона». Тип "Анти-В" забарвлюється синім, а "Анти АВ" не позначається кольоровим маркером. Виробники реагентів випускають упаковки із цоліклонами 5 або 10 мл. Не допускається використання зіпсованих чи неякісних реагентів.
За наявності видимих дефектів упаковки або появи пластівців у рідині, цоліклон не використовують.
- Для визначення спеціально підготовленої пластини, яка оформлена як таблиця, наносять цоліклони різних типів(А, В та АВ). Кожен із них має бути підписаний. Реагент наноситься на спеціально зазначену область. Кожен тип цоліклону повинен наноситися окремою стерильною піпеткою.
- Поряд з реагентами міститься по 1 краплі крові пацієнта.
- Стерильною паличкою реагенти змішують із біологічним зразком.
- Вже через кілька секунд можна помітити зміни та реакцію аглютинації, що відбувається. За правилами спостереження слід проводити протягом 3 хвилин. Після цього можна дійти невтішного висновку результати дослідження.
Як зрозуміти результат
- Відсутність будь-якої реакції склеювання у всіх зразках означає, що у клітинах еритроцитів пацієнта немає аглютиногену досліджуваного типу. Зразок крові зараховується до І групи (тип 0).
- Якщо еритроцитарні клітини пацієнта вступили в реакцію з реагентами типу "Анти-а" та "Анти-АВ", то у пацієнта II група крові (тип А).
- Помітна аглютинація зразка досліджуваної крові з цоліклонами тип «Анти-АВ» та «Анти-В» означає, що пацієнт має ІІІ групу крові (тип В).
- Якщо кров пацієнта вступила в реакцію з усіма хімічними реагентами, то досліджуваний зразок належить до IV групи (тип АВ). При визначенні групи крові за допомогою цоліклонів додаткової перевірки не потрібно, оскільки реагенти не містять добавок, які можуть спровокувати спонтанну реакцію.
Визначення групи крові та резус фактора проводиться у лабораторних установах у медичних установ. Це досить просте дослідження, яке дає дуже корисну та життєво важливу інформаціюпро людину.
Визначення групи крові за допомогою стандартних парних ізогемаглютинуючих сироваток.
1Вступне слово:Ми проводимо визначення групи крові зі стандартними сироватками у процедурному кабінеті за призначенням лікаря. На мені шапочка, окуляри, маска, халат, фартух, рукавички. Руки попередньо оброблені гігієнічним способом.
2 Оснащення:
Стандартні сироватки двох серій
Досліджувана кров у пробірці
Тарілка визначення групи крові.
Чотири стерильні скляні палички (у склянці, чашці Петрі)
Ізотонічний розчин хлориду натрію (пробірка)
Стерильні піпетки 2 шт.
Місткість з 3% розчином хлораміну.
3 Проведення маніпуляції
Внести по краплі (0,1 мл) стандартних сироваток окремі лунки.
Внести на тарілку велику краплю крові поряд з лункою 4 групи, на відстані не менше 1 см від неї.
Окремими кінцями скляних паличок внести кров у сироватки (співвідношення 10:1), змішати
Похитувати тарілку 5 хв, спостерігати аглютинацію.
У лунки, в яких відбулася аглютинація, додати фізіологічний розчин (0,1 мл)
Похитувати тарілку, спостерігати аглютинацію.
Форма відповіді:
При визначенні групи крові зі стандартними сироватками
Аглютинація не спостерігається в жодній з лунок – перша група
Аглютинація спостерігається в першій та третій лунках – друга група
Аглютинація спостерігається в першій та другій лунках – третя група
Аглютинація спостерігається у всіх лунках - ймовірно четверта група
Визначаємо результат із сироваткою четвертої групи (аналогічно)
Форма відповіді:
Із сироваткою четвертої групи аглютинація не спостерігається – четверта група
Із сироваткою четвертої групи аглютинація не спостерігається – визначити групу крові неможливо, слід замінити сироватки.
Після проведення маніпуляції усі забруднені кров'ю предмети замочуємо у тривідсотковому розчині хлораміну на одну годину.
4 Можливі помилки:
Грубі помилки:
Не використання засобів захисту медпрацівника.
Повторне використання паличок.
Перенесення паличок, які контактували з кров'ю над лотком із чистими паличками.
Чи не відповідність картини аглютинації висновку про групову приналежність.
Не продезінфіковані предмети, що контактували з кров'ю
Чи не грубі помилки:
Час очікування аглютинації менше 5 хв.
Не внесений фізрозчин до лунок, у яких відбулася аглютинація.
Утримування паличок за кінці, а не за центр.
5 Критерії оцінювання:
Здав – відсутність грубих помилок, наявність трохи більше двох не грубих помилок.
Чи не здав - наявність грубих помилок, наявність більше двох не грубих помилок.
Під час грубої помилки викладач може попросити повторити відповідний етап маніпуляції. Якщо повторюється помилка – не здав. Допускається трохи більше одного повторення.
Кожній людині корисно запам'ятати свою групу крові. Це може несподівано стати в нагоді у надзвичайних ситуаціях. Недарма у військовослужбовців відзначається група крові на гімнастерці чи жетонах. Проблеми з тим, як визначити групу крові, немає. У великих лікувальних закладахцим займаються лабораторії. Але навіть у невеликих сільських амбулаторіях є стандартні набори для визначення групи, а провести аналіз вміють усі лікарі та середні медичні працівники. Самостійно робити це ні до чого, коли є спеціалісти.
Яка група крові у дитини можна припустити батьків. Наприклад, знаючи, що у батьків друга, третя чи четверта, не варто сподіватися, що дитина буде першою.
Подібні поради дають люди, які «живуть» в інтернеті та збирають будь-яку інформацію без розбору. Часом переінакшують її на свій лад.
Справді, є теорія харчування залежно від типу крові та спроби пов'язати з нею характер особистості. Але це розроблялося для підбору найбільш відповідного раціону, запобігання хворобам. Про зв'язок типу особистості із номером крові навіть психологи перестали говорити.
Тим більше, не можна судити з улюблених страв чи схильності до лідерства про свою групу.
У домашніх умовах щось дізнатися краще з повноцінних статей, консультацій фахівців. Можливо, є медичні документи (амбулаторна карта, виписки із стаціонару), в яких є відомості про вашу кров.
За бажанням донорів та пацієнтів стаціонарів у паспорт можна проставити друк із зазначенням цих відомостей.
Подібні нашивки застосовуються на армійській формі
Хто вигадав групи крові
Першовідкривачем чотирьох груп крові є австрійський учений і лікар К. Ландштейнер, який отримав Нобелівську премію з медицини в 1930 році. Відкриття дозволило запобігти смертельні наслідкивнаслідок переливання, вивчати попередньо сумісність донорських ознак та реципієнта.
Суть запропонованої системи АВ0 полягає у наявності у людини та тварин антигенних структур на еритроцитах. Типових антитіл (гаммаглобулінів) до них у плазмі немає. Тому реакцію «антиген + антитіло» можна використовуватиме визначення.
Поширеність груп крові за національною ознакою
Склеювання еритроцитів відбувається під час зустрічі антигену зі своїм антитілом. Така реакція називається гемаглютинацією. Вона видно під час проведення аналізу як дрібних пластівців. Визначення групи крові ґрунтується на отриманні картини аглютинації з типовими сироватками.
Антигени еритроцитів типу "А" зв'язуються з антитілами "ά", відповідно "В" з "β". За складом крові виділено:
- I, чи 0 (ά, β) - лежить на поверхні еритроцитів зовсім немає антигенів;
- II, або А (β) – містять антиген А з антитілом β;
- III, або В (ά) - є антиген типу з антитілом ά;
- IV, або АВ(00) - має обидва антигени, але не містить антитіл.
Антигени є у зародка людини вже в ембріональному періоді, А антитіла (аглютиніни) з'являються у сироватці новонароджених протягом першого місяця життя.
Стандартне визначення групи крові (простий метод)
Для проведення аналізу на групу крові потрібні еритроцити пацієнта (беруться із краплі крові) та стандартні сироватки, що містять відомі антигени.
Сироватки виготовляються з донорської крові на «Станціях переливання», мають термін придатності, вимагають дотримання умов зберігання. На ампулах зазначається номер серії. Для точного аналізубереться два набори сироваток різних серій. Це робиться з метою виключення помилок.
На плоскій тарілці двома рядами поміщають по великій краплі чотирьох сироваток (досить лише III і II, але контролю береться ще 1 і 1V). Різними скляними паличками (зручно користуватися очними піпетками) у краплі сироваток вносять досліджувану кров (співвідношення повинно вийти приблизно 1:10) і обережно помішують.
П'ять хвилин тарілку похитують, даючи можливість сироватка добре перемішатися з кров'ю.
Розшифровка результатів
Проходить 5 хвилин і можна оцінювати результати аналізу. У великих краплях сироватки настає просвітлення, в одних утворюються дрібні пластівці (реакція аглютинації), в інших їх немає. Тут можливі варіанти:
- якщо аглютинації немає в обох пробах із сироватками III та II груп (+ контрольні 1 та 1V) – це перша група;
- якщо згортання відзначається у всіх, крім II - це свідчить про другу групу;
- за відсутності аглютинації лише з III сироваткою – встановлюється третя група крові;
- якщо згортання відзначається у всіх пробах, включаючи 1V-контрольну - група четверта.
Коли сироватки розташовані в правильному порядку, на тарілці проставлені підписи, то легко орієнтуватися: де немає аглютинації, така і група.
Трапляються випадки, коли склеювання видно неясно. Тоді аналіз переробляють, дрібну аглютинацію дивляться під мікроскопом.
Метод перехресної реакції
Для уточнення групи при невираженій аглютинації застосовують метод подвійної перехресної реакції із стандартними еритроцитами. У даному випадкувідомими є не сироватки, як у простому методіа еритроцити. У пацієнта кров набирають у пробірку, центрифугують і дослідження піпеткою відкачують зверху сироватку.
Стандартні антисироватки
На плоску білу тарілку капають дві великі краплі сироватки від пацієнта. У них додаються стандартні еритроцити А (II) та (III) груп крові. Поступово розмішують, похитують тарілку.
Результат оцінюється через 5 хвилин:
- якщо аглютинація настала в обох краплях, група перша;
- якщо немає в жодній пробі, група четверта;
- якщо в одній із застосованих відомих еритроцитів, то група визначається за наявністю або відсутністю згортання краплі.
Визначення групи цоліклонами
Цоліклони – це синтетичні замінники сироваток. Вони містять штучні замінники аглютинінів і β. Їх називають еритротестами «Цоліклон анти-А» ( рожевого кольору) та «анти-В» (синього). Очікувана аглютинація відбувається між еритроцитами досліджуваної крові та аглютинінами цоліклонів.
Методика не потребує використання двох серій, вважається більш точною та надійною. Проведення та оцінка результатів такі ж, як у простому стандартному методі.
Особливість: четверта група АВ(IV) обов'язково підтверджується реакцією аглютинації зі специфічним цоліклоном анти-АВ і відсутністю неспецифічного склеювання еритроцитів в ізотонічному розчині хлориду натрію.
Експрес-методика за допомогою набору «Ерітротест-группокарт»
Метод дозволяє визначити групу та резус фактор у лабораторії та польових умовах. До складу набору входить картка із лунками. На дно лунок вже нанесено висушені реагенти. Тут, крім "анти-А", "анти-В" та "анти-АВ" використовується "анти-D", який дає результат резус-фактора.
Можна використовувати кров у будь-якому вигляді, підійде з'єднання з консервантом та взята з пальця.
Перед дослідженням на картці записується прізвище пацієнта, у кожну лунку вноситься крапля води розчинення інгредієнтів. Потім окремими паличками до лунок з реактивами додають кров і злегка перемішують. Остаточний результат «читають» через три хвилини.
Група крові завжди перевіряється ще раз при необхідності переливання. Одночасно контролюють групову та індивідуальну сумісність. Адже, насправді, у крові людини виявлено набагато більше антигенних властивостей, Чим у системі АВ0. Просто вони у більшості населення виявляються слабо.
Але у пацієнта з тяжкими захворюваннями, що змінюють властивості крові та аллергізують організм, вони стають визначальними, вимагають зважати на наявність і рівень крові. Тому знання пацієнтом власної групидодає впевненості у результаті дослідження.
Процедура визначення груп крові за системою АВО полягає у виявленні антигенів А та В в еритроцитах за допомогою стандартних антитіл та використанням аглютинінів у плазмі або сироватці аналізованої крові стандартними еритроцитами. Методика розроблена на початку XX століття і досі активно застосовується у медицині. Визначення антигенів А та В здійснюється завдяки цоліклонам анти-А та анти-В.
Основні поняття
У донорів завжди визначаються як антигени в еритроцитах, а й аглютинини в сироватці (плазмі) із застосуванням стандартних еритроцитів. Як біоматеріал використовується венозна кров. Перед дослідженням необхідно відмовитись від жирної їжіза добу до аналізу та не палити за півгодини до здачі тесту. Групи крові визначають двічі: спочатку у лікувальному відділенні, де заготовляється матеріал, а потім підтверджують дослідженням у лабораторії.
Визначення груп крові за системою АВО є основним тестом, що використовується у трансфузіології. Також подібна система груп крові є у деяких тварин, наприклад, у шимпанзе, горил і бонобо.
Історія відкриття
У науці існує загальноприйнята думка про те, що методику визначення груп крові за системою АВО було виявлено вперше Карлом Ландштейнером, австрійським ученим, у 1900 році. Тоді він описав у своїй праці три типи антигенів. За це через тридцять років йому було присуджено Нобелівська преміяз медицини та фізіології. Через те, що між вченими раніше не було тісних зв'язків, пізніше встановили, що чеський лікар-серолог Ян Янський незалежно від досліджень К. Ландштейнера вперше описав чотири групи крові людини, але його дослідження були не відомі широкій аудиторії. В даний час саме класифікація, розроблена Я. Янським, застосовується в Росії та республіках колишнього СРСР. У У. Л. Мосс створив свою схожу роботу 1910 р.
Методика визначення груп крові за системою АВО за допомогою цоліклонів
Група крові повинна визначатися у приміщенні з хорошим освітленням з дотриманням діапазону температури від 15 до 25 градусів Цельсія, оскільки відхилення від цієї норми можуть вплинути на результати дослідження. На платівці чи тарілці пишуться ініціали та прізвище пацієнта. Зліва направо або по колу наносять стандартні позначення груп (О(I), A(II), В(III)). Під ними розміщують краплі відповідні сироватки окремими піпетками для кожного виду. Потім до них додається кров пацієнта. Матеріал для дослідження береться з мочки вуха чи пальця. Цього потребує техніка визначення групи крові за системою АВО.
Правомірно також використання еритроцитів, що у пробірці після того, як утворився потік. Потрібно, щоб кількість сироватки була більше кількостідоданої крові удесятеро. Після цього краплі перемішуються скляними паличками (окремо кожної). Протягом п'яти хвилин, акуратно похитуючи платівку, стежать за появою реакції гемаглютинації. Вона виявляється в тому, що з'являються маленькі червоні грудочки, що зливаються потім у більші. Сироватка тим часом практично повністю втрачає колір.
Щоб усунути хибну гемаглютинацію простого склеювання еритроцитів, потрібно через три хвилини додати одну краплю фізіологічного розчину і перевірити, чи зберігається аглютинація. Якщо так, вона є істинною. Все визначення груп крові за системою АВО на цьому завершено.
Тлумачення результатів
В результаті можуть спостерігатися чотири реакції:
- не відбувається аглютинація з жодної з сироваток - перша група О(I);
- реакція проявилася із сироватками I(ab) та III(a) - друга група А(II);
- аглютинація настає із сироватками I(ab) та II(b) - третя група В(III);
- якщо реакція відбувається з трьома сироватками, слід провести додаткову процедуру з реактивами групи АВ(IV), які є стандартними; якщо аглютинація у такій краплі відсутня, можна вважати, що це 4 група крові АВ(IV).
Експрес-метод для резус-фактора
Методика визначення груп крові у системі АВО передбачає одночасне виявлення резус-фактора (Rh).
Поверхню платівки попередньо змочують і пишуть на ній «контрольна сироватка» та «сироватка антирезус». Потім під написами мають одну-дві краплі необхідних реактивів і додають до них аналізований матеріал. Для цього також можна використовувати кров з пальця (у такій кількості, як і обсяг сироватки) або еритроцити, що залишилися на дні пробірки після появи згустку (половина об'єму сироватки). Вибір матеріалу на кінцевий результатне впливає. Потім кров і сироватка перемішуються сухою скляною паличкою, після чого протягом п'яти хвилин очікують настання реакції. Щоб усунути хибні показання, через три-чотири хвилини додають ізотонічний розчин натрію хлориду (загалом кілька крапель). Визначення групи крові за системою АВО та Rh проводиться дуже часто.
Якщо аглютинація еритроцитів у краплі із сироваткою відбувається, це вказує на позитивний резускрові. За статистикою Rh+ зустрічається у 85% населення планети. Відсутність її дозволяє говорити про резус-негативну належність. Якщо аглютинація з'явилася в контрольній сироватці, значить вона стала непридатною. На жаль, алгоритм визначення групи крові у системі АВО який завжди спрацьовує ідеально.
Які помилки можуть бути допущені за даної методики?
Неточності щодо визначення належності крові тій чи іншій групі залежить від таких причин:
- Технічні.
- Біологічна специфіка досліджуваної крові.
- Неповноцінного характеру стандартних сироваток та еритроцитів.
Технічні помилки
Можливі похибки щодо групи крові системи АВО перехресним способом:
Помилки біологічної специфіки
Похибки, пов'язані з біологічною специфікою аналізованої крові, поділяються на два типи.
- Залежні від особливостей еритроцитів.
- Помилки, зумовлені біологічними особливостямисироватки.
Розглянемо кожен вид докладніше.
Залежні від особливостей еритроцитів
- Пізня аглютинація, що пояснюється «слабкими» формами еритроцитів та антигенів. Щоб уникнути помилок, визначати групу крові донорів і реципієнтів потрібно з використанням стандартних еритроцитів. Індентифікувати аглютиноген А2 слід повторним дослідженням з іншими видами реагентів та іншого посуду, збільшивши час реєстрації реакції.
- «Панаглютинація» («аутоаглютинація») - вміння крові виявляти однакову реакцію неспецифічного характеруз усіма сироватками, у тому числі з власною. Через п'ять хвилин гострота такої аглютинації слабшає, хоча має посилюватися. Подібні випадкиспостерігаються в онкохворих, обпалених та ін. Як контроль необхідно оцінити прояв аглютинації аналізованих еритроцитів у стандартній сироватці четвертої групи та фізрозчині. При панаглютинації групу крові визначають в результаті потрійного відмивання еритроцитів. Якщо воно не дає потрібного результату, варто провести повторний забір зразка крові в прогріту перед процедурою пробірку і поставити пробу в термоконтейнер, щоб сприяти підтримці температури 37 градусів Цельсія і вище. Потім слід доставити в лабораторію, де зберігається вказана вище температура і використовуються підігріті фізіологічний розчин, платівка та реактиви.
- Іноді еритроцити аналізованої крові розташовуються як «монетні стовпчики», і їх можна вважати аглютинати. Якщо додати дві краплі ізотонічного розчину та м'яко похитати планшет, червоні кров'яні клітини займають правильну позицію.
- Неповна або змішана аглютинація, що зустрічається у пацієнтів з другою, третьою та четвертою групами внаслідок трансплантації кісткового мозкуабо у перші три місяці після переливання крові 0(I).
Зумовлені біологічними особливостями сироватки
Помилки, пов'язані із застосуванням неповноцінних стандартних еритроцитів та сироваток
Слабкі сироватки з минулим терміном придатності або мають титр менше 1:32 здатні зароджувати слабку та пізню аглютинацію. Застосування таких реактивів є неприпустимим.
Використання непридатних стандартних еритроцитів або сироваток, приготованих у нестерильних умовах і недостатньо законсервованих, призводить до появи «бактеріальної» аглютинації, що має неспецифічну природу.
Існує безліч популярних припущень про групи крові системи АВО, що виникли безпосередньо після її виявлення у різних світових культурах. Так, наприклад, у 30-ті роки минулого століття в Японії та деяких інших країнах набула популярності теорія, що пов'язує групу крові з тим чи іншим типом особистості. Подібні теорії популярні і сьогодні.
Є також думка, що людина, яка має групу А, схильна важкому похмілля, Про пов'язана з добрими зубами, а група А2 - з самим високим рівнем IQ. Але науково такі твердження не доведено.
Ми розглянули визначення груп крові за системою АВО за допомогою стандартних сироваток.