☰

Скринінговий тест у діагностиці ВІЛ інфекції. Госпітальний скринінг (ВІЛ, сифіліс та гепатити В та С). Кількісний аналіз на ВІЛ


Первинний етап (скринінг) дослідження на ВІЛ.

Увага! При здачі дослідження АТ та АГ до ВІЛ 1/2 для первинного скринінгу дослідження відповідно до законодавства РФ обов'язково надання наступних даних та документів:

1) Для жителів Москви та Московської області

  • Прізвище, ім'я, по-батькові
  • День, місяць та рік народження
  • Відомості про реєстрацію
  • Паспорт
  • Страховий поліс (серія та номер страхового поліса, найменування страхової компанії).
2) Для мешканців інших регіонів РФ та іноземних громадян додатково – ксерокопію (скан) паспорта.
  • Прізвище, ім'я, по-батькові
  • День, місяць та рік народження
  • Відомості про реєстрацію
  • Страховий поліс (серія та номер страхового поліса, найменування страхової компанії)
  • Ксерокопія (скан) паспорта
У разі не надання зазначеної вище інформації, для пацієнтів з попередніми позитивними та сумнівними результатами скринінг дослідження АТ та АГ до ВІЛ ½ (скринінг) (кач.), результат дослідження не може бути виданий.

Аналіз можна здати анонімно: при цьому пацієнт реєструється як анонім з індивідуальним номером замовлення (п.2, ст.8 ФЗ РФ № 38-ФЗ), за обов'язкового вказівки року народження та місця проживання (суб'єкт РФ).

Звертаємо Вашу увагу! Що результати первинного (скринінг) дослідження є лише результатами лабораторного дослідження та не є результатом огляду чи висновком про наявність чи відсутність ВІЛ-інфекції. За результатами скринінгу дослідження слід звернутися до муніципального центру-спіду для проведення добровільного огляду на наявність ВІЛ.

Результати дослідження на ВІЛ незалежно від їх результату видаються лише за особистого звернення пацієнта до лабораторного відділення. Під час обстеження неповнолітніх (до 14 років) дітей – законного представника, вказаного у замовленні.

Результати видаються за умови пред'явлення договору, кошторису та документа, що засвідчує особу самого пацієнта або представника пацієнта, зазначеного у замовленні.

Телефоном та електронною поштою результати досліджень не повідомляються.

За допомогою даного тесту досліджувані зразки сироватки/плазми крові можна одночасно протестувати на наявність антигену ВІЛ 1 та 2 типів та антитіл до ВІЛ 1 та 2 типу.

Вірус імунодефіциту людини відноситься до сімейства РНК-ретровірусів, що містять, і підродини лентивірусів, тобто. віруси повільних інфекцій. ВІЛ генетично та антигенно неоднорідний, за своєю структурою поділяється на 1 та 2 тип. При впровадженні в клітини людини вірус утворює в їхньому геномі ділянку ДНК, яка надалі утворює нові ВІЛ у необмеженій кількості. На поверхні ушкоджених клітин з'являються антигени вірусу. Відповіддю з їхньої появу з боку імунної системи є утворення специфічних антитіл до вірусу першого чи другого типу. За останні три роки кількість офіційно зареєстрованих у Росії ВІЛ-інфікованих осіб зростає в геометричній прогресії. Стрімке поширення ВІЛ-інфекції в країні може набути неконтрольованого характеру. Тому однією з головних завдань в даний час є використання більш досконалих методів її діагностики, що забезпечують виявлення заражених осіб на ранніх стадіях інфекції. До таких методів відносяться серологічні лабораторні тести, що визначають як білкові структури вірусу, так специфічні антитіла до вірусу.

Перші призначені виявлення всіх осіб, інфікованих ВІЛ, другі- виявлення осіб, не інфікованих ВІЛ, але дали позитивну реакцію при скринінговому тестуванні. Тому скринінгові тести мають високу чутливість, тобто майже не дають хибнонегативних результатів, а підтверджуючі тести мають високу специфічність, тобто майже не дають хибнопозитивних результатів. У поєднанні ці тести дають точні та надійні результати, які дозволяють виявити заражені препарати крові та поставити діагноз ВІЛ-інфекції. Проте існують біологічні чинники, які знижують точність цих тестів; можливі та лабораторні помилки. Тому в кожній лабораторії, яка проводить тести на антитіла до ВІЛ, має бути розроблена бездоганна програма контролю за якістю цих тестів. Не слід забувати і про те, що надійність лабораторних досліджень ніколи не буває стовідсотковою і що їх результати завжди мають розцінюватися як додаток до клінічного діагнозу.

Період вікна та виявлення ВІЛ-інфекції на ранніх термінах зараження:

Антитіла до ВІЛ починають вироблятися невдовзі після зараження, але час їх появи залежить від багатьох факторів, зокрема стану імунної системи пацієнта і властивостей вірусу. Важливо відзначити, що антитіла можуть бути присутніми в крові вже на ранніх термінах після зараження, але концентрація їх буває нижчою за межу чутливості деяких методів (період вікна). Перші тест-системи виявляли антитіла майже у всіх ВІЛ-інфікованих через 6-12 тижнів після зараження. Нові тест-системи, у тому числі пастковий ІФА третього покоління, виявляють антитіла через 3-4 тижні після зараження. Термін між зараженням та діагнозом ВІЛ-інфекції можна скоротити на кілька днів, застосовуючи методи виявлення антигенів ВІЛ, та ще на кілька днів, застосовуючи методи виявлення РНК ВІЛ. Якщо використати всі описані методи, діагноз ВІЛ-інфекції у більшості хворих можна встановити вже через 2-3 тижні після зараження. Наявні у продажу тест-системи для скринінгу на антитіла до ВІЛ мають дуже високу і приблизно однакову чутливість, достатню для виявлення більшості ВІЛ-інфікованих (так звану епідеміологічну чутливість). Однак різні тест-системи розрізняються за аналітичною чутливістю, тобто за здатністю виявляти низькі рівні антитіл, які мають місце до завершення сероконверсії.

Існують тест-системи, призначені для виявлення IgM-антитіл до ВІЛ, проте вони не знайшли широкого застосування в ранній діагностиці ВІЛ-інфекції, оскільки IgM-антитіла не завжди виробляються на ранніх термінах після зараження. Деякі тест-системи третього покоління одночасно виявляють IgM- і IgG-антитіла до ВІЛ і мають більш високу аналітичну чутливість.

Дивіться також:Розкриття ВІЛ-статусу без жалю, Викривлення перегородки носа, Аневризм судин: прихована загроза здоров'ю, Пренатальний скринінг; хромосомні аномалії, Прихована косоокість (Strabismus latenta, Heterophoria), Прихований ризик: жінки та захворювання серця, Прихований сифіліс (Syphilis latens), Протокол полімеразної ланцюгової реакції зі зворотною транскрипцією в реальному часі (ВІД-ПЛР РВ, RealtimeCRT виявлення та дослідження вірусу грипу А(H1N1), скрегіт зубами (бруксизм), обережно: приховані алергени

… діагностика будь-якого інфекційного захворювання ґрунтується на зіставленні епідеміологічних, клінічних та лабораторних даних, і перебільшення значення однієї з груп цих даних може призвести до діагностичних помилок.

Діагностика ВІЛ-інфекції включає два етапи:
Iетап - встановлення власне факту зараженості ВІЛ-інфекцією;
IIетап - визначення стадії захворювання.

ВСТАНОВЛЕННЯ ФАКТУ ЗАРАЖЕНОСТІ ВІЛ-ІНФЕКЦІЄЮ

Встановлення власне факту зараженості ВІЛ-інфекцією (тобто виявлення ВІЛ-інфікованих) у свою чергу також включає два етапи:
І етап— імуноферментний аналіз(ІФА): метод ІФА є скринінговим (відбірковим) - відбір імовірно інфікованих осіб, тобто його метою є виявлення підозрілих осіб та відсівні здорових осіб; антитіла до ВІЛ виявляють за допомогою інших антитіл до шуканих антитіл (антитіла проти інших антитіл).

Ці «допоміжні» антитіла мітять ферментом. Усі скринінгові випробування повинні бути високочутливими, ніж пропустити хворого. Через це їх специфічність не дуже висока, тобто ІФА може дати позитивну відповідь («ймовірно хворий») у неінфікованих людей (наприклад, у хворих на аутоімунні захворювання: ревматизм, системний червоний вовчак та ін). Частота хибно-позитивних результатів при використанні різних тест-систем коливається від 0,02 до 0,5%. Якщо у людини ІФА дало позитивний результат, для підтвердження факту інфікування ВІЛ необхідно обстежитися далі.

При проведенні ІФА в 3-5% випадків можливі помилково-негативні результати - якщо інфікування відбулося відносно недавно і рівень антитіл ще дуже низький, або в термінальній стадії хвороби, що характеризується важким ураженням імунної системи з глибоким порушенням процесу антитілоутворення. Тому за наявності даних, що свідчать про контакт з інфікованими ВІЛ, зазвичай проводять повторні дослідження через 2 — 3 місяці.
ІІ етап — імуноблотінг(В модифікації Western Blot, вестерн-блот): є більш складним методом і служить для підтвердження факту інфікування.

Цей метод виявляє не комплексні антитіла до ВІЛ, а антитіла до окремих його структурних білків (p24, gp120, gp41 та ін.).

Результати імуноблоту вважаються позитивними, якщо виявляються антитіла хоча б до трьох білків, один з яких кодується генами env, інший - генами gag, третій - генами pol. Якщо антитіла виявляються до одного або двох білків, результат вважається сумнівним і вимагає підтвердження.

У більшості лабораторій діагноз ВІЛ-інфекції ставиться, якщо одночасно виявляються антитіла до білків р24, р31, gp4l та gpl20/gp160. Суть методу: вірус руйнують на компоненти (антигени), які складаються з іонізованих амінокислотних залишків, а тому всі компоненти мають зоря, що відрізняється один від одного; потім за допомогою електрофорезу (електричного струму) антигени розподіляються на поверхні смужки - якщо в сироватці є антитіла до ВІЛ, то вони будуть взаємодіяти з усіма групами антигенів, а це можна виявити.

Слід пам'ятати, Що антитіла до ВІЛ з'являються у 90-95% інфікованих протягом 3-х місяців після зараження, у 5-9% інфікованих антитіла до ВІЛ з'являються через 6 місяців і у 0,5-1% інфікованих антитіла до ВІЛ з'являються в пізніші терміни.

У стадії СНІДу кількість антитіл може знижуватись, аж до повного зникнення.

В імунології існує таке поняття, як «серологічне вікно»- Період від інфікування до появи такої кількості антитіл, яку можна виявити.

Для ВІЛ цей період зазвичай триває від 2 до 12 тижнів, в окремих випадках довше. У період «серологічного вікна» за аналізами людина здорова, але насправді заражена ВІЛ. Встановлено, що ДНК ВІЛ може бути в геномі людини не менше трьох років без ознак активності та антитіла до ВІЛ (маркери ВІЛ-інфікування) не з'являються.

В даний період («серологічне вікно») виявити ВІЛ-інфікованого і навіть через 1-2 тижні після зараження можна за допомогою полімеразної ланцюгової реакції(ПЛР).

Це надзвичайно чутливий метод – теоретично можна виявити 1 ДНК на 10 мл середовища. Суть методу полягає в наступному: за допомогою полімеразної ланцюгової реакції отримують багато копій нуклеїнової кислоти (вірус є нуклеїновою кислотою -ДНК або РНК - у білковій оболонці), які потім виявляють за допомогою мічених ферментів або ізотопів, а також характерною будовою. ПЛР є дорогим методом діагностики, тому при скринінгу та в плановому порядку не використовується.

ВИЗНАЧЕННЯ СТАДІЇ ЗАХВОРЮВАННЯ

В основі розвитку СНІДу лежить насамперед руйнування Т-лімфоцитів-хелперів, що маркуються моноклональними антитілами — кластерами диференціювання — як CD4.

У зв'язку з цим проведення діагностики та спостереження за прогресуванням захворювання неможливе без контролю субпопуляції Т-хелперів, який найзручніше здійснювати за допомогою лазерного клітинного сортувальника.

При слабко вираженій ВІЛ-інфекціїкількість Т-лімфоцитів – надзвичайно варіабельний показник. Загалом, зниження числа клітин CD4 (абсолютне та відносне) виявляється у осіб, ВІЛ-інфікування яких відбулося не менше року тому.

З іншого боку, на ранніх стадіях інфекції нерідко виявляється різко підвищеним число Т-супресори (CD8) як у периферичній крові, так і у збільшених лімфовузлах.

При вираженому СНІДіабсолютна більшість хворих має знижену загальну кількість Т-лімфоцитів (менше 1000 в 1 мкл крові, у тому числі лімфоцитів CD4 - менше ніж 22 в 1 мкл, тоді як абсолютне значення вмісту CD8 залишається в межах норми).

Відповідно, різко знижується співвідношення CD4/CD8. Відповідь Т-лімфоцитів in vitro на стандартні антигени та мітогени знижується у суворій відповідності до відносно зниженого числа CD4.

Для пізніх стадії СНІДухарактерні загальна лімфопенія, нейтропенія, тромбоцитопенія (відповідно, зниження числа лімфоцитів, нейтрофілів та тромбоцитів), анемія.

Ці зміни можуть бути наслідком центрального пригнічення кровотворення за рахунок ураження кровотворних органів вірусом, а також аутоімунного руйнування клітинних субпопуляції на периферії. Крім того, для СНІДу характерне помірне збільшення кількості гамма-глобулінів з домінуючим збільшенням вмісту IgG.

Хворі із вираженими симптомами СНІДу нерідко мають підвищений рівень IgA. На деяких стадіях захворювання суттєво підвищується рівень таких маркерів СНІДу, як 1-мікроглобулін, кислотостабільний інтерферон, 1-тимозин. Те саме відбувається з секрецією вільного неоптерину - метаболіту макрофагів.

Поки неможливо оцінити відносну значимість кожного з перерахованих тестів, кількість яких постійно зростає. Тому їх слід розглядати у взаємодії з маркерами ВІЛ-інфекції як імуновірусологічного, і цитологічного характеру.

Для клінічного аналізу крові характерні лейкопенія, лімфопенія (відповідно, зниження числа лейкоцитів та лімфоцитів).

1 стадія - « стадія інкубації» - Антитіла до ВІЛ ще не виявляються; діагноз ВІЛ-інфекції на даній стадії ставиться на підставі епідеміологічних даних та лабораторно має підтверджуватись виявленням у сироватці крові пацієнта вірусу імунодефіциту людини, його антигенів, нуклеїнових кислот ВІЛ;
2 стадія - « стадія первинних проявів» - В даному періоді вже є вироблення антитіл:;
2А стадія - « безсимптомна» - ВІЛ-інфекція проявляється лише виробленням антитіл;
2Б стадія - « гостра ВІЛ-інфекція без вторинних захворювань» - у крові хворих можуть виявлятися широкоплазмові лімфоцити - «мононуклеари» і часто відзначається транзиторне зниження рівня СD4-лімфоцитів (гостра клінічна інфекція відзначається у 50-90% інфікованих осіб у перші 3 місяці після зараження; початок періоду гострої інфекції, як правило, випереджає сіркоконверсію, тобто.

поява антитіл до ВІЛ);
2В стадія - « гостра ВІЛ-інфекція з вторинними захворюваннями» - на фоні зниження рівня СD4-лімфоцитів і розвиненого внаслідок цього імунодефіциту з'являються вторинні захворювання різної етіології (ангіна, бактеріальна та пневмоцистна пневмонія, кандидози, герпетична інфекція та ін.);
3 стадія - « латентна» - у відповідь на прогресування імунодефіциту відбувається модифікація імунної відповіді у вигляді надмірного відтворення CD4-клітин з подальшим поступовим зниженням рівня CD4-лімфоцитів, в середньому зі швидкістю 0,05-0,07×109/л на рік; у крові виявляються антитіла до ВІЛ;
4 стадія - « стадія вторинних захворювань» - Виснаження лімфоцитів популяції CD4, концентрація антитіл до вірусу значно знижується (залежно від тяжкості вторинних захворювань виділяють стадії 4А, 4Б, 4В);
5 стадія - « термінальна стадія» — типово зниження кількості CD4-клітин нижче 0,05×109/л; Концентрація антитіл до вірусу значно знижується або антитіла можуть не визначатися.

Лабораторна діагностика ВІЛ-інфекції

При діагностиці ВІЛ-інфекції використовується 4 групи методів:

1. Визначення наявності вірусу, його антигенів чи копій РНК у матеріалах від хворого чи ВІЛ-інфікованого

Серологічна діагностика, заснована на виявленні специфічних антитіл до поверхневих (gp 120 і gp 41) та внутрішніх (р 18 і р 24) білків ВІЛ.

3. Виявлення патогномонічних (специфічних) для ВІЛ-інфекції змін в імунній системі.

Лабораторна діагностика опортуністичних інфекцій (СНІД-асоційованих захворювань).

1. Вірусологічна діагностика.Матеріалом виділення ВІЛ є Т-лімфоцити крові, лейкоцити кісткового мозку, лімфатичні вузли, тканини мозку, слина, сперма, спинномозкова рідина, плазма крові.

Отриманим матеріалом заражають культуру, що перевивається Т-лімфоцитів (Н9). Індикацію ВІЛ у культурі клітин проводять за ЦПД (освіта симпластів), а також методами імунофлюоресценції, електронної мікроскопії, за вираженою активністю зворотної транскриптази.

Сучасні методи дослідження дозволяють виявити один інфікований лімфоцит на 1000 клітин.

Виявлення вірусних антигенів в інфікованих Т-лімфоцитах здійснюють за допомогою моноклональних антитіл

В останні роки вирішальне значення для визначення прогнозу та тяжкості ВІЛ-інфекції має визначення кількості копій РНК ВІЛ у плазмі крові методом полімеразної ланцюгової реакції (ТТЦР) – так зване вірусне навантаження.

Якщо у пацієнтів, які не отримують терапії, вірусне навантаження знаходиться нижче за межу визначення (це менше 5000 копій РНК ВІЛ в I мл плазми), це свідчить про відсутність прогресування або про повільне прогресування. Ступінь заразності при цьому мінімальний. Високе вірусне навантаження (більше 10000 копій РНК в 1 мл плазми) у пацієнтів з числом СО4-лімфоцитів менше 300 в 1 мкл завжди свідчить про прогрес хвороби.

Серологічна діагностика В даний час набула найбільшого поширення.

Матеріал для дослідження: 5 мл. гепаринізованої крові, яку до доставки в лабораторію можна зберігати 6-8 годин в охолодженому, але не замороженому стані.

З метою серологічної діагностики СНІДу використовують насамперед методи імуноферментного аналізу із стандартними імуноферментними системами (ІФА).

Це скринінговий метод. Принцип роботи заснований на класичному принципі прямого ІФА. Імуносорбентом є полістиролові планшети з іммобілізованим інактивованим вірусспецифічним антигеном, отриманим з ВІЛ, або синтетичним шляхом.

Потім вносять випробувану сироватку у розведенні. Проводять інкубацію в лунках з антигеном. Після зв'язування АГ з AT слід триразове відмивання білків, що не зв'язалися, а після цього в лунки вносять кон'югат антитіл до імуноглобулінів людини з ферментною міткою.

Утворення специфічного комплексу АГ+АТ виявляють внесенням субстрату для ферменту (розчин ортофенілендіаміну та перекису водню).

В результаті фарбування середовища змінюється пропорційно кількості антитіл. Результати дослідження враховують на спектрофотометрі.

Сироватки крові, що мають вірусспецифічні антитіла за даними ІФА, надалі необхідно досліджувати методом імунного блотингу.

Імунний блотипг є підтверджуючим тестом, оскільки дозволяє виявити антитіла до різних ВІЛ-білків.

Він заснований на попередньому фракціонуванні молекулярної маси (розділенні) білків ВІЛ електро-форезом в поліакриламідному гелі з подальшим перенесенням антигенів на мембрану з нітроцелюлози. Потім на мембрану наноситься випробувана сиво-ротка. При цьому специфічні антитіла утворюють комплекс із конкретним АГ (gp.120, gp.41, p.24, p.18). Заключний етап дослідження - виявлення антитіл до різних білків ВІЛ.

Для цього до системи додають антитіла проти білків людини, мічені ферментом або радіоізотопною міткою.

Таким чином, у сироватці пацієнта виявляють (або не виявляють) вірусспецифічні антитіла до всіх або більшості антигенів ВІЛ.

3. Дослідження імунного статусу.Спрямовані на виявлення:

1) зменшення співвідношення CD4/CD8 клітин (в N 2 і >, при СНІДі - 0,5 і<);

2) зниження вмісту CD4 клітин (<200 клеток/мл.);

3) наявності однієї з лабораторних ознак, що включають анемію, лейкопенію, тромбошггопенію, лімфопенію;

4) підвищення концентрації Ig А та Ig G у сироватці крові;

5) зниження реакції бластгрансформації лімфоцитів на мітогени;

6) відсутність шкірної реакції ГТЗ на кілька антигенів;

7) підвищення рівня циркулюючих імунних комплексів.

Попередня1234567891011Наступна

ПОДИВИТИСЯ ЩЕ:

Антитіла до ВІЛ 1/2– складові плазми крові, білкової природи, що перешкоджають розмноженню ВІЛ-інфекції та повністю нейтралізують їх негативний вплив.

Що таке аналіз на антитіла до ВІЛ 1/2 (скринінг)

Скринінговий аналіз на антитіла до ВІЛ 1,2 – система тестів, які дають змогу виявити осіб, інфікованих вірусом імунодефіциту. Крім цих, існують і так звані підтверджуючі (допоміжні) тести, завдання яких полягає в тому, щоб виявити осіб, які не інфіковані вірусом, але з позитивною реакцією на вірус при скринінгу.

Суть скринінгового дослідження ВІЛ-інфекції полягає у визначенні антитіл до вірусу імунодефіциту.

Його відмінна особливість у підвищеній чутливості – більш ніж 99,5%. Специфіка тестування полягає в тому, що скринінг може дати хибнопозитивний результат, якщо в організмі пацієнта містяться аутоантитіла.

Ідентичний результат може бути виявлений і у разі хвороби печінки у пацієнта, протигрипозної вакцинації або наявності будь-якого гострого вірусного захворювання. Виходячи з цього, для отримання точних результатів, поряд зі скринінгом, зазвичай прийнято робити і згаданий вище підтверджує тест.

Показання для аналізу

У медичній практиці існує досить широкий спектр свідчень проходження скринінгового обстеження.

Пацієнт може звернутися до лабораторії у разі:

  • виникнення підозри на інфікування (якщо був близький контакт із носієм ВІЛ-інфекції);
  • при втратах ваги, пропасниці;
  • пневмонії, яка не піддається звичайній терапії;
  • захворюваннях хронічного характеру, що виникли з незрозумілих причин;
  • у процесі підготовки до хірургічної операції;
  • переливання крові;
  • планування вагітності та сім'ї;
  • При запалених лімфовузлах;
  • Випадкові статеві зв'язки.

Особи, які потрапляють в особливу групу ризику: наркомани та люди, які ведуть безладне статеве життя.

Як проводиться скринінг на антитіла до ВІЛ 1/2

Проведення процедури передбачає дотримання низки необхідних правил:

  • пацієнт повинен здавати кров виключно натще (пити воду дозволено);
  • з моменту останнього прийому їжі має пройти не менше восьми годин;
  • лікар повинен бути повідомлений про те, які ліки приймає пацієнт і знати дозування (якщо немає можливості навіть короткочасного скасування);
  • якщо пацієнт може почекати із застосуванням лікарських засобів, йому рекомендовано це зробити за 10-15 днів до дня маніпуляції;
  • за день до початку тестування пацієнту бажано відмовитися від прийому смажених чи жирних продуктів, також йому заборонено вживати алкогольні напої, курити, обмежити тяжкі фізичні навантаження.

Необхідно відзначити, що лабораторні дослідження на наявність інфекції у дітей, які були народжені від матерів-носіїв вірусу імунодефіциту, мають свою специфіку.

Оскільки в перші місяці життя дитини, в її крові можуть бути материнські антитіла до ВІЛ, то за результатами аналізу неможливо отримати об'єктивну картину про стан здоров'я новонародженого і навіть негативний результат аж ніяк не означає, що вірус не зміг проникнути через плацентарний бар'єр.

Для отримання точних даних тестування слід проводити протягом 36 місяців після народження дитини.

Послуги за напрямом «Сучасна діагностика»

Клініки за напрямком «Сучасна діагностика»

Перед тестуванням чи скринінгом на антитіла до ВІЛ стоять дві широкі, але дуже чітко визначені цілі – виявлення випадків та епідеміологічний нагляд. При виявленні випадків передусім слід уточнити статус інфікованості ВІЛ кожного даного індивідуума призначення відповідного лікування чи спостереження з вживанням належних заходів.

Мета епідеміологічного нагляду полягає в оцінці поширеності ВІЛ, розподілу випадків інфекції та її тенденцій у групі чи цілій популяції.

Чутливість тесту на антитіла до ВІЛ є мірою його здатності точно виявляти ці антитіла в пробі, а специфічність тесту - міра його здатності точно підтверджувати відсутність антитіл, якщо їх у пробі немає.

В ідеалі чутливість та специфічність тесту мають досягати 100%. На практиці ж жоден біологічний тест цієї вимоги не задовольняє і тим не менш застосовувані тести на антитіла до ВІЛ належать до найбільш чутливих і специфічних тестів, що є в даний час

Лабораторна діагностика СНІДу полягає у проведенні вірусологічних, серологічних, імунологічних досліджень матеріалу від хворих осіб із підозрою на це захворювання.

p align="justify"> При вірусологічних дослідженнях з метою виділення вірусу можуть бути використані первинні культури мононуклеарних клітин крові.

Виділення та ідентифікація вірусу методично складні та можуть виконуватися у спеціалізованих лабораторіях. Найбільш ефективним методом діагностики, що використовується в даний час для повсякденних масових обстежень є виявлення антитіл до вірусу імунодефіциту людини. Антитіла до ВІЛ можуть з'являтись до кінця першого місяця зараження. За даними ряду авторів, для розвитку сіркоконверсії потрібно від 4-7 тижнів до 6 місяців і більше. Наявність антитіл має діагностичне значення при СНІДі або вказує на ризик розвитку.

Антитіла – не лише серологічний маркер СНІДу. Виявляючись у передклінічній фазі захворювання, вони дозволяють здійснити його ранню діагностику. Особливої ​​значущості їх наявність набуває виявлення носіїв.

Антитіла виявляються протягом багатьох років, практично протягом усього життя. Дослідники встановили паралелізм у виявленні вірусу та антитіл до нього, тобто наявність антитіл до вірусу імунодефіциту вказує на високу ймовірність того, що людина є вірусоносієм.

Антитіла до антигену ВІЛ, з'явившись в інкубаційному періоді, продовжують інтенсивно вироблятися з розвитком хвороби, так як антигенне подразнення стимулюється і віріонами, що виділяються із заражених лімфоцитів, і субвіріонними компонентами, що потрапляють у кровотік при розпаді заражених клітин, і зараженими.

У той самий час провірус, вбудований у геном заражених клітин, залишається недоступним для специфічних антитіл. Цим і пояснюється, здавалося б, парадоксальний факт: що більше антитіл до вірусу імунодефіциту людини у сироватці крові, то легше виділити сам вірус від хворого.

Відбувається це тому, що антитіла, що виробляються у відповідь на інфекцію вірусу, не є нейтралізуючими і внаслідок цього не помітно впливають на вірус, а просто присутні в організмі разом з ним. Для виявлення антитіл (AT) до вірусу СНІДу розроблено низку тестів, що дозволяють здійснити дослідження на досить високому рівні специфічності та чутливості. Це методи твердофазного радіоімунологічного аналізу, радіоімунопреципітації, імунофлюоресценції, імуноферментного аналізу та імунного блотингу.

Найбільш широке застосування у практиці знайшли методи імуноферментного аналізу (ІФА), який відрізняється високою чутливістю, можливістю кількісного та візуального обліку результатів реакції, що робить метод доступним для лабораторії будь-якого рівня.

В ІФА використовуються зарубіжні та вітчизняні тест-системи.

Клінічний перебіг ВІЛ-інфекції та СНІДу

Потрібно виявляти обережність щодо дітей, народжених від інфікованих матерів. За відсутності клініки дитина вважається інфікованою у разі, якщо AT до ВІЛ зберігаються після року. При отриманні позитивного результату в ІФА необхідно триразово протестувати сироватки, що дали одноразово позитивні результати, та підтвердити позитивний результат у незалежній системі - імунному блотингу

Виявлення AT в реакції ІФА не дає достатньої інформації, так як не говорить стан досліджуваного, а свідчить лише про інкубацію, хворобу або наявність безсимптомної інфекції.

Імунний блотинг дає велику інформацію.

Інформативним є підрахунок кількості Т (хелперів) та співвідношення Т4 до Ті (супресорів) лімфоцитів, які визначаються за допомогою моно-кпональних антитіл.

Важливим критерієм захворювання може бути різке збільшення кількості імуноглобулінів, особливо А і V. У загальному клінічному аналізі крові про захворювання може свідчити лімфопенія, лейкопенія, еритропенія, тромбоцитопенія, еозинофілія.

Тести на ВІЛ, що використовуються для епідеміологічного нагляду, не повинні мати таку ж точність, яка потрібна для клінічних цілей.

Однак при дуже низькій ураженості ВІЛ у популяції всі позитивні проби необхідно досліджувати повторно у додаткових тестах.

Збір крові для тесту на антитіла до ВІЛ або скринінгу може супроводжуватися реєстрацією прізвищ обстежуваних (пойменений збір), або проводитися без реєстрації прізвищ або індивідуальної ідентифікаційної інформації (анонімний збір) (табл.

Для анонімного скринінгу без урахування ідентифікаційної інформації характерні такі моменти: - використовуються проби крові, зібрані для інших цілей; гарантується анонімність завдяки тому, що ідентифікаційні дані не збираються або не враховуються; не потрібно отримувати згоди обстежуваних; не потрібен контакт із консультаційними та соціальними службами; нарешті, що найважливіше, зводяться до мінімуму помилки у статистичних оцінках, які від рівня участі населення.

Хоча при анонімному дослідженні на ВІЛ можна отримати точніші дані, цей метод має такі недоліки: він не може усунути потенційне зміщення оцінки, зумовлене відбором; дані про пов'язану з високим ризиком поведінку та інших важливих змінних недоступні та не можуть бути зібрані ретроспективно; неможливо встановити контакт із ураженими ВІЛ особами, щоб повідомити їх про їх стан; обстеження можна проводити лише в групах осіб, у яких кров взята для інших цілей.

У районах, де поширеність ВІЛ-інфекцій вважається дуже низькою, нагляд за нею в рамках системи охорони здоров'я повинен насамперед бути спрямований на окремих осіб або групи населення, для яких характерна поведінка, пов'язана з найбільшим ризиком зараження. статевих партнерів

Кров для дослідження на ВІЛ у такій групі ризику найлегше брати в центрах, що спеціалізуються на лікуванні хвороб, що передаються статевим шляхом, або подібних до них установ.

Якщо поширене також внутрішньовенне введення наркотиків, проби крові слід брати у споживачів у спеціальних установах.

Збір крові один раз на 3 або 6 місяців у групах найбільшого ризику з географічних районів, де таких груп найбільше, буде достатнім. Виняток можуть скласти такі групи ризику, як наркомани, які практикують внутрішньовенне введення препаратів, для яких можуть бути потрібні більш приватні обстеження.

Зараз ВООЗ займається створенням системи класифікації (стадування) захворювання для клінічних досліджень, яку можна також використовувати у випробуваннях методів лікування, що може мати також прогностичну цінність.

Однак, така система не покликана замінити існуючі визначення СНІДу, які використовуються при проведенні нагляду в системі охорони здоров'я.

Нині розробляються системи планового (рутинного) нагляду за ВІЛ.

Ці системи необхідно адаптувати до існуючої епідеміологічної ситуації; так, методи складання вибірок у популяціях з дуже низькою поширеністю вірусу повинні обов'язково відрізнятися від застосовуваних там, де поширеність помірна чи висока.

Такий нагляд передбачає рутинні обстеження чітко охарактеризованих та доступних груп населення.

До нього насамперед слід включати ті групи, які наражаються на найбільший ризик зараження, і в кожній з цих груп необхідно відбирати постійну заздалегідь встановлену кількість осіб для обстеження.

В останні роки анонімний скринінг у групах, що спостерігаються, без урахування ідентифікаційних даних набуває все більшої поширеності як точний і економічно ефективний спосіб епідеміологічного нагляду за ВІЛ-інфекцією в системі охорони здоров'я.

Методи лабораторної діагностики ВІЛ

У високоспеціалізованій лабораторії проводяться:

а) визначення циркулюючих у крові антитіл, антигенів та імунних комплексів; культивування вірусу, виявлення його геномного матеріалу та ферментів;

б) оцінка функцій клітинної ланки імунної системи.

Основна роль належить методам серологічної діагностики, спрямованим визначення антитіл, і навіть антигенів збудника у крові та інших біологічних рідинах організму.

Тестування на антитіла до ВІЛ здійснюють з метою:

а) безпеки гемотрансфузій та трансплантацій;

б) епіднагляду, тестування з метою моніторингу превалентності ВІЛ-інфекції та вивчення динаміки її поширеності у певній популяції;

в) діагностики ВІЛ-інфекції;

е. добровільне тестування сироватки крові практично здорових людей або хворих з різними клінічними ознаками та симптомами, подібними до ВІЛ-інфекції або СНІДу.

Система проведення лабораторної діагностики ВІЛ-інфекції побудована за триетапним принципом.

Перший етап – скринінговий, призначений для виконання первинних досліджень крові на наявність антитіл до білків ВІЛ. Другий референтний етап - дозволяє за допомогою спеціальних методичних прийомів уточнити (підтвердити) первинний позитивний результат, отриманий на скринінговому етапі. Третій етан – експертний, призначений для остаточної перевірки наявності та специфічності маркерів ВІЛ-інфекції, виявлених на попередніх етапах лабораторної діагностики.

Необхідність кількох етапів лабораторної діагностики обумовлена ​​передусім економічними міркуваннями.

У практиці застосовується кілька тестів, що дозволяють з достатньою мірою достовірності виявляти ВІЛ-інфікованих:

ІФА (ELISA)-тест (твердофазний імуноферментний аналіз) виявлення першого рівня, характеризується великою чутливістю, хоча і меншою специфічністю перед нижченаведеними;

Імунний блот (Western-blot), вельми специфічний тест, що найбільше використовується, що дозволяє диференціювати ВІЛ-1 і ВІЛ - 2;

Антигенемія р25-тест, ефективний у початкових стадіях зараження;

Полімеразна ланцюгова реакція (ПЛР).

У випадках масового скринінгу зразків крові рекомендується тестувати суміші сироваток від групи обстежуваних, складені з таким розрахунком, щоб кінцеве розведення кожного зразка не перевищувало 1:100.

Якщо суміш сироваток виявляється позитивною, проводиться дослідження кожної сироватки позитивної суміші. Цей спосіб не веде до втрати чутливості як у ІФА, так і в імуноблоті, але знижує трудові витрати та вартість первинного обстеження на 60-80%.

Імунологічні методи

кількість Т хелперів,

2. співвідношення Т4 і Т8,

3. стан гіперчутливості,

4. компенсаторна функція Т клітинної системи.

Виявляється гіперпродукцією імуноглобулінів, вони низько афінні і матеріал організму витрачається ще більше.

Недоліки: проявляються пізно, деякі імунологічні показники можуть бути за інших інфекцій.

Клінічні методи – м.б. подібні до інших захворювань, найбільш типові прояви реєструються на пізніх стадіях, тому клінічна діагностика мало ефективна

Основний метод – серологічний – реалізується у 2 етапи:

1 - скринінгове обстеження - відбір проб до сумарних антитіл до всіх білків імунного аналізу.

Цей етап дає 95% справжніх результатів і 5% хибнопозитивних.

2 – метод, що підтверджує – всі проби досліджують за допомогою підтверджуючого методу. Ця методика дозволяє виявити антитіла до вірусного білка.

Позитивний результат, коли антитіла виявлені не менше ніж до 3 вірусних білків, якщо до 1 або до 2 результат сумнівний і вимагає додаткового обстеження.

При первинній серодіагностиці ВІЛ-інфекції проводиться визначення сумарних антитіл за допомогою скринінгових відбірних тестів – ІФА та аглютинаційних реакцій.

На другому (арбітражному) етапі використовують складніший тест - імуноблот, що дозволяє не тільки підтвердити або відхилити початковий висновок, але й зробити це на рівні визначення антитіл до індивідуальних білків вірусу.

Інтерпретація результатів аналізу на антитіла до ВІЛ

Досить велика кількість різних факторів впливає на результат аналізу антитіл до ВІЛ і серед них важливе значення має час проведення аналізу після можливого зараження.

Найчастіше антитіла до ВІЛ можна виявити через 6–12 тижнів після зараження.

Цей період від потрапляння вірусу до організму до появи визначеної кількості антитіл називається періодом позитивної сероконверсії чи періодом “вікна”. Є поодинокі випадки появи антитіл через 6 місяців після зараження, а повідомлення про виявлення антитіл лише через 1 рік не мають доказів. Нині діагностична служба використовує нові генерації методів ІФА, які дозволяють виявити антитіла до ВІЛ через 3–4 тижні після зараження, а певні комбінації цих методів, звані стратегії тестування, скорочують період “вікна” до 2–3 тижнів, тобто. .

дають можливість виявити антитіла до ВІЛ, як тільки вони починають вироблятися в організмі.

Негативний результат означає, що антитіла до ВІЛ у крові обстежуваного не виявлено.

Такий стан називається серонегативністю і означає, як правило, що людина не заражена.

Негативний результат не дає жодних гарантій на майбутнє. Він констатує лише стан у момент обстеження. Існує незначний шанс, що обстеження проведено у період вікна. Тому, якщо людина раніше ризикувала заразитися ВІЛ та отримала негативний результат тестування, необхідно пройти повторне тестування принаймні через 6 місяців після ризикованої події.

Позитивний результат означає, що у крові обстежуваного знайдено антитіла до ВІЛ.

Такий стан називається серопозитивністю – людина заражена ВІЛ. Важливо розуміти, що позитивний результат свідчить лише про ВІЛ-інфекцію, а не про захворювання на СНІД.

Тим не менш, дуже важливо зрізу з отримання позитивного результату звернутися до лікаря для отримання консультацій і, якщо потрібно, медичної допомоги, що дозволить підтримати якість життя на хорошому рівні тривалий час.

Невизначений результат. У поодиноких випадках результат аналізу на антитіла до ВІЛ незрозумілий.

Лабораторія не може дати відповідь серопозитивна людина або серонегативна. За таких обставин необхідно проконсультуватися з лікарем та ще раз пройти тестування.

Діагноз інфекції ВІЛ може бути встановлений у лабораторії за допомогою виявлення специфічних антитіл до вірусу. При багатьох інших вірусних захворюваннях наявність антитіл свідчить про перенесену в минулому інфекцію. Однак, оскільки при зараженні ВІЛ розвивається хронічна інфекція, серопозитивні особи є не тільки активно інфікованими, а й заразними.

Серологічний тест для визначення наявності антитіл до ВІЛ став широкодоступним у 1985 році. "dot" ELISA. Тести можна виконати швидко і просто, вони не потребують складного обладнання.

Хоча вищезазначені тести високою мірою чутливі, вони можуть давати і помилкові результати, а позитивний результат потребує подальшого підтвердження за допомогою додаткового тесту, такого, як імуноблотінг (вестерн-блот) або непряма імунофлуоресценція.

Також можливе безпосереднє визначення антигенів ВІЛ (вірусу чи вірусного білка) у спермі; Промисловість випускає необхідні набори реактивів. Ці аналізи були спочатку розроблені як спроба отримати лабораторний показник наявності інфекції в період вікна між зараженням і утворенням антитіл, яке зазвичай триває від 4 до 16 тижнів. Аналізи виявлення антигенів нині використовуються ширше контролю за результатами противірусного лікування хворих на СНІД.

Програми скринінгу на наявність інфекції ВІЛ (тобто обстеження всього населення або окремих груп населення з метою визначення інфікованості чи наявності захворювання) можуть допомогти:

  • попередити передачу вірусу через кров та продукти крові, сперму, тканини чи органи для пересадки;
  • отримати епідеміологічну інформацію про поширеність та частоту захворюваності на ВІЛ.

Щоразу, коли обговорюється програма скринінгу, слід точно формулювати та вирішувати всі питання, зазначені у заяві ВООЗ (Додаток 4). Погано розроблені та погано здійснені програми можуть завдати шкоди громадському здоров'ю та призвести до втрати ресурсів. Задоволення потреб охорони здоров'я та дотримання прав людини забезпечуються найкращим чином при ретельному розгляді низки питань, пов'язаних з технологією та матеріально-технічним постачанням, а також соціальних, правових та етичних проблем до того, як буде прийнято рішення про продовження скринінгової програми.

Обов'язковому скринінгу на ВІЛ відводиться дуже обмежена роль програмах профілактики та боротьби зі СНІДом.

Рутинний скринінг донорів допомагає запобігти передачі ВІЛ з кров'ю, спермою або іншими клітинами, тканинами і органами. Частиною такого скринінгу є згода індивіда, заснована на інформації, та проведення консультацій, за яких має бути забезпечена конфіденційність.

Виявлення серопозитивних осіб за допомогою обстеження дозволяє визначити епідеміологічний тип ВІЛ, що необхідно для оцінки районів та груп населення, які потребують спеціальних програм освіти чи інших профілактичних служб. Ці обстеження слід проводити з використанням методів, які не загрожують дотриманню прав людини. Їх слід здійснювати під час консультації або отримавши згоду від поінформованого індивіда, дотримуючись при цьому конфіденційності, або анонімним, вільним чином (без реєстрації інших даних, що дозволяють встановити особу).

Добровільні перевірки на СНІД можуть стати частиною медико-санітарної допомоги при підозрі на захворювання, пов'язані з ВІЛ, а також можуть бути здійснені в комплексі з інформуванням, просвітництвом, консультуванням та іншими підтримуючими службами та покликані сприяти стійким змінам поведінки. При добровільних перевірках на ВІЛ дуже важливими є отримання згоди від поінформованого індивіда та можливість консультування за умови збереження конфіденційності. Частиною програм запобігання СНІДу та боротьби з ним мають стати широкодоступні служби добровільних перевірок на ВІЛ, причому слід полегшити доступ до таких служб.

Діагностика ВІЛ-інфекції необхідна для призначення ефективного лікування.Щоб діагностувати СНІД проводиться стандартна процедура обстеження пацієнта. Вона складається з 2 етапів:

  • здавання скринінгу;
  • імунний блот.

Для встановлення діагнозу додатково призначають ПЛР, експрес-тестування.

Проведення ІФА

Початкова діагностика СНІДу ґрунтується на застосуванні лабораторних білків ВІЛ, які вловлюють специфічні антитіла. Після контакту з ферментами тест-системи змінюється колір індикатора. Потім змінена кольорова гама обробляється за допомогою спеціальної апаратури, яка визначає результат тестування.

Подібна лабораторна діагностика ВІЛ-інфекції показує результат через 21 день після інфікування. За допомогою ІФА не можна визначити наявність вірусу. Даний метод діагностики сприяє виявленню вироблення антитіл до вірусу. Подібний процес може спостерігатись через 2-6 тижнів після зараження.

Фахівці розрізняють 4 покоління ІФА-систем із різною чутливістю. Медики частіше застосовують тести 3 та 4 покоління. Ці системи створені на основі рекомбінантних білків або пептидів синтетичного походження, які мають значну точність і специфічність. ІФА застосовується для виявлення, моніторингу поширення вірусу, що забезпечує безпеку під час перевірки донорської крові. Точність таких систем коливається не більше 93-99%. Найбільшу чутливість мають тести, випущені в Західній Європі. Щоб виконати діагностику, лаборант проводить забір венозної крові (5 мл). За 8 годин перед дослідженням рекомендується відмовитися від їди. Дослідження найчастіше проводиться вранці.

Розшифрування даних

Для отримання результатів тесту потрібно 10 днів. Якщо результат негативний, пацієнт не інфікований. У такому разі лікування не призначається. Хибнонегативний результат виявляється:

  • до 3 тижнів після інфікування;
  • на останній стадії СНІДу при низькій імунній системі;
  • при неправильній підготовці крові.

Якщо результат позитивний, пацієнт інфікований. У такому разі проводять ІБ. Неправдивий результат вказує на наявність супутніх захворювань та неправильно проведену підготовку крові. Якщо тестування показано вагітним, то у зібраному матеріалі лікар може виявити неспецифічні антитіла, вироблення яких не пов'язане з вірусом. Зібраний матеріал досліджується в референсі чи арбітражної лабораторії. Якщо результат повторного тестування негативний, тоді перший результат помилковий. У такому разі ІБ не проводиться.

Проведення імунного блоттингу

Лікування СНІДу призначається при отриманні позитивного результату імунного блотингу. Цей метод діагностики проводиться за допомогою нітроцелюлозної смужки, яку наносяться вірусні білки. Для ІБ використовують венозну кров, яка потім піддається обробці. Білки, що знаходяться в сироватці, поділяються на групи з урахуванням їхнього заряду та молекулярної маси. Для такого процесу використовується спеціальна апаратура.

За наявності в досліджуваному матеріалі антитіл до вірусу на смужці проявляються відповідні лінії. Позитивне ІХ вказує на ВІЛ-інфікування пацієнта. Сумнівний результат виявляється на початкових етапах зараження, при туберкульозі та онкології, у вагітних. У таких випадках рекомендується повторне проведення ІХ.

Невизначений результат ІХ вказує на наявність в імуноблоті одного та більше білків до вірусу. Подібна картина спостерігається при недавньому зараженні, коли в крові є незначна кількість антитіл до інфекції. У такому випадку ІБ буде позитивним через деякий час. Невизначений результат цього дослідження може бути пов'язаний з відсутністю ВІЛ-інфекції при гепатитах, хронічних обмінних захворюваннях у період вагітності. У такому разі ІХ стане негативним або фахівці виявлять у пацієнта причину невизначеного результату.

ПЛР дослідження

Захисна система уражається і натомість застосування вірусу в людський організм. Для інкубаційного періоду характерний термін 3 місяці. Тому після статевого контакту з ВІЛ-інфікованим партнером рекомендується пройти ПЛР-діагностику. Вона дозволить визначити РНК вірусу. Період, протягом якого рекомендується пройти подібне дослідження, становить 8-24 місяці.

Для остаточного діагнозу показано регулярне здавання крові на ВІЛ (1 раз на 3 місяці). За рахунок високої чутливості це обстеження дозволяє виявити вірус через 10 днів після інфікування. Несправжній позитивний результат при ПЛР можна отримати і за наявності в організмі пацієнта іншої інфекції. ПЛР дослідження вважається дорогою процедурою, оскільки потребує наявності спеціального обладнання.

ПЛР призначається для виявлення вірусу у наступних осіб:

  • новонароджений, який народився від ВІЛ-інфікованої матері;
  • пацієнти із сумнівним ІБ.

Також дана методика показана для контролю концентрації вірусу в крові та дослідження донорської крові.

Швидкі методики дослідження

До сучасних методів діагностики СНІДу спеціалісти відносять експрес-тести. Для їх розшифровки потрібно 10-15 хв. Імунохроматографічні тести, що базуються на капілярному потоці, забезпечують точні результати. Такі системи тестування представлені як спеціальних смужок, куди наноситься кров чи слина. За наявності вірусу через 10 хв на тесті з'являються 2 смужки:

  • контрольна;
  • кольорова.

У разі результат тестування носить позитивний характер. На негативний результат вказує на появу однієї контрольної смужки. Для підтвердження отриманого результату проводиться ІБ. На основі загальних даних лікар ставить діагноз, призначає лікування.

Можна виявити вірус у домашніх умовах. Для цього використовують спеціальні експрес-набори. OraSure Technologies1 – система, розроблена у США. Якщо після тестування виявлено позитивний результат, пацієнту рекомендується пройти повне обстеження у медичному центрі.

Обстеження дитини

Новонароджені дітки, які народилися від інфікованих матерів, терміново піддаються обстеженню. За допомогою серологічних методик не можна точно виявити вірус у дітей віком 5-18 місяців. Але результат такого обстеження важливий під час проведення ІБ.

Виявити інфікування у дітей можна за допомогою ПЛР. ДНК вірусу виявляє фахівець у дітей першого місяця життя. Щоб встановити концентрацію РНК збудника, спеціалісти визначають провірус імунодефіциту. Для дослідження лікар використовує цільну кров або її суху пляму. Матеріал міститься в пробірку з консервантом ЕДТА (пропорція 1:20). Зразок необхідно зберігати за температури не вище 8°С (протягом 2 діб). Не допускається заморожування матеріалу.

Для отримання зразка сухої крові наносять цільну рідину на спеціальний папір. Зразок можна зберігати за температури нижче 8°С. Картки використовують протягом 8 місяців. Новонароджену дитину необхідно оглянути, взявши матеріал на дослідження, протягом наступних термінів:

  • через 48 годин після народження;
  • у віці 2 місяці після народження;
  • через 3-6 місяців після народження.

Якщо лікар виявив ген провірусу ВІЛ через кілька годин після появи немовляти на світ, то сталося внутрішньоутробне інфікування малюка. Заразитися вірусом можна і під час пологів або при грудному вигодовуванні. Результати, що вказують на наявність ДНК вірусу у 2 зразках, вказують на розвиток СНІДу у дитини. Диспансерне спостереження не потрібне, якщо результати ПЛР негативні через 4 місяці після народження малюка.

Якщо результат тестування негативний, але симптоматика СНІДу є, тоді рекомендується проконсультуватися з лікарем. Подібна клініка може бути спровокована іншими захворюваннями. Єдиним і 100% методом діагностики вірусу вважається тестування. Навіть кваліфіковані і досвідчені фахівці не можуть визначити вірус за симптоматикою.

Якщо через деякий час результати пацієнта негативні, ВІЛ в організмі відсутня.

У цьому не враховується симптоматика. Але подібна клінічна картина може бути пов'язана зі СНІДофобією. У такому разі потрібна допомога психолога. За потреби дитині або дорослому призначають відповідне лікування.

Раннє виявлення ВІЛ-інфекції дозволяє контролювати розмноження вірусу в крові та запобігти розвитку СНІДу. Стандартний аналіз ІФА виявляє в плазмі крові хворої людини антитіла, які починає виробляти імунна система через півтора-три місяці після зараження (їхня поява часто супроводжується симптомами, характерними для грипу - лихоманкою та загальним нездужанням). ПЛР дозволяє виявити ВІЛ вже через 2-3 тижні після інфікування.

З метою ранньої діагностики цієї хронічної вірусної інфекції проводяться скринінгові (масові) обстеження груп населення з підвищеним ризиком ВІЛ-інфікування (наприклад, особи, які вживають наркотики).

Такий аналіз може призначити будь-який лікар, якщо підозрює у пацієнта або вважає за потрібне виключити ВІЛ-інфекцію. Стандартний тест може пройти будь-яка людина за власним бажанням та безкоштовно, у тому числі анонімно, у центрах профілактики СНІДУ та їх філіях (пунктах). Результат такого аналізу – лікарська таємниця, він надається пацієнту лише особисто.

Основні свідчення

  • після будь-якого незахищеного статевого контакту з новим, випадковим, малознайомим партнером;
  • після зґвалтування;
  • якщо виявилось, що сексуальний партнер (колишній, справжній) ВІЛ-інфікований;
  • якщо партнер потрапляв у ситуації із високим ризиком інфікування;
  • якщо введення наркотичних речовин здійснювалося не індивідуальними шприцами та голками;
  • після нанесення тату та виконання пірсингу загальними для групи осіб голками;
  • після застосування нестерильних голок та медичних інструментів;
  • після контакту з ВІЛ-позитивною кров'ю;
  • якщо діагностовано ЗПСШ.

Також це потрібно зробити, якщо спостерігаються:

  • різке схуднення без об'єктивної причини;
  • незрозуміла хронічна діарея;
  • синдром хронічної втоми;
  • часті застудні захворювання;
  • нічна пітливість;
  • збільшення кількох груп лімфовузлів;
  • часта захворюваність на вірусні інфекції.

Як підготуватися до дослідження

Забір крові з вени проводиться натще, тому протягом 8 годин до аналізу не рекомендується вживати їжу.

Особливості аналізу

Присутність вірусу у плазмі крові підтверджують за допомогою трьох аналізів – ІФА, імуноблотінгу, ПЛР.

Імуноферментний аналіз крові (ІФА) виявляє білкові антитіла до вірусу, які починають циркулювати в плазмі через 3-6 місяців після його появи в організмі. ІФА – досить чутливий метод, точність якого становить до 99%.

Результат цього тесту може бути позитивним, негативним чи сумнівним. Якщо результат серонегативний за високого ризику зараження чи сумнівний без такого ризику, то призначаються інші аналізи на ВІЛ. Іноді ІФА показує хибнопозитивний результат при інфекційних, онкологічних або аутоімунних захворюваннях, що також потребує призначення інших тестів.

Імуноблот- це також тест на наявність антитіл у плазмі, але більш чутливий. Серопозитивний тест верифікує ВІЛ-інфекцію. Сумнівний тест повторюють через 4-6 тижнів. Якщо результат не змінився, кров здають ще двічі - кожні 3 місяці або проходять інше дослідження.

Полімеразна ланцюгова реакція (ПЛР) ідентифікує в плазмі крові ДНК вірусу через 2-3 тижні після його потрапляння в кров.

Однак вартість цього тесту та ймовірність хибнопозитивних відповідей передбачає його застосування лише тоді, коли результати двох попередніх (стандартних) досліджень не дають змоги поставити або виключити ВІЛ-інфекцію.

За серйозної підозри на зараження ВІЛ краще звернутися до центру профілактики СНІДу, де під керівництвом лікаря пройти всі необхідні дослідження та отримати достовірний результат.