قوانین تعیین گروه خونی نحوه تعیین گروه خونی با استفاده از سرم های استاندارد با این تکنیک چه اشتباهاتی می توان کرد؟

وابستگی گروهیخون طبق سیستم ABO با استفاده از واکنش آگلوتیناسیون تعیین می شود. سه راه برای تعیین گروه های خونی بر اساس سیستم ABO وجود دارد:

استفاده از سرم های ایزوهماگلوتینه کننده استاندارد؛

استفاده از سرم های استاندارد ایزوهماگلوتینه و گلبول های قرمز استاندارد ( روش متقاطع);

استفاده از آنتی بادی های مونوکلونال (کولیکلون آنتی A و آنتی B).

در صورت لزوم تعیین گروه خونی در مواقع اضطراری (در صورت خونریزی ، انتقال فوری خون لازم است) ، پزشک بیمارستان خود گروه خونی را تعیین می کند (در آزمایشگاه ، یک بررسی مجدد انجام می شود ، اما پس از واقعیت).

1. تعیین گروه های خونی با استفاده از سرم های استاندارد ایزوهماگلوتینه

ماهیت روش تشخیص آنتی ژن های گروه A و B در خون آزمایش با استفاده از سرم های استاندارد ایزوهماگلوتیناسیون است. برای این منظور از واکنش آگلوتیناسیون استفاده می شود. واکنش در یک اتاق با نور خوب در دمای 15-25 درجه سانتیگراد انجام می شود.

روش واکنش

1. قبل از شروع واکنش، پلاک را امضا کنید (نام خانوادگی و حروف اول شخص مورد آزمایش را قرار دهید)، پس از آن سرم های استاندارد ایزوهماگلوتیناسیون I, II و گروه های IIIدر حجم 0.1 میلی لیتر (قطره ای به قطر حدود 1 سانتی متر). برای جلوگیری از اشتباه، از هر گروه دو سری سرم استفاده کنید، زیرا ممکن است یکی از این سرم ها داشته باشد فعالیت کمو آگلوتیناسیون شفاف ایجاد نمی کند. در مجموع شش قطره به دست می آید که دو ردیف از سه قطره را به ترتیب زیر از چپ به راست تشکیل می دهد: 0 (1)، A (11)، B (III).

2. خون برای تحقیق از انگشت یا از رگ گرفته می شود. شش قطره از خون آزمایشی، تقریباً به اندازه یک سر سوزن (0.01 میلی‌لیتر، قطره کوچک)، به‌طور متوالی با یک میله شیشه‌ای خشک در شش نقطه، هر کدام در کنار یک قطره سرم استاندارد (مقدار خون آزمایش‌شده) روی صفحه منتقل می‌شود. باید تقریباً 10 برابر کمتر از مقدار سرم استانداردی باشد که با آن مخلوط می شود) سپس با استفاده از میله های شیشه ای با لبه های گرد با دقت مخلوط می شوند.

3. پس از مخلوط کردن، بشقاب را به صورت دوره ای تکان دهید.

آگلوتیناسیون در 30-10 ثانیه اول شروع می شود، به دلیل احتمال آگلوتیناسیون بعدی، برای مثال با گلبول های قرمز گروه A2(2) باید حداکثر تا 5 دقیقه مشاهده شود.

4- یک قطره از محلول کلرید سدیم ایزوتونیک را به قطره هایی که در آن جمع آوری شده است اضافه کنید ، پس از آن نتیجه واکنش ارزیابی می شود.

تفسیر نتایج

واکنش آگلوتیناسیون می تواند مثبت یا منفی باشد. با یک واکنش مثبت ، معمولاً در 10-30 ثانیه اول ، دانه های قرمز کوچک (آگلوتینات) متشکل از گلبول های قرمز چسبانده ، که به چشم غیر مسلح قابل مشاهده است ، در مخلوط ظاهر می شود. دانه های ریز به تدریج به دانه های بزرگتر و گاهی اوقات به پوسته تبدیل می شوند شکل نامنظم. در این صورت، سرم به طور جزئی یا کامل تغییر رنگ می دهد. واکنش مثبتممکن است شنی یا گلبرگ شکل باشد.

تعیین فاکتور Rhسیستم آنتی ژنی فاکتور Rh

در سال 1940، K. Landsteiner و A. Wiener یک آنتی ژن کاملاً جدید را در گلبول های قرمز انسانی کشف کردند که آن را فاکتور Rh (Rh) نامیدند. فاکتور Rh در خون 85% افراد وجود دارد و در 15% وجود ندارد.

سیستم آنتی ژن RH توسط پنج آنتی ژن اصلی نشان داده شده است: D ، C ، C ، E ، E (قبلاً اعتقاد بر این بود که شش نفر وجود دارد ، اما بعداً ثابت شد که ژن آللی d وجود ندارد). C و c و همچنین E و e آنتی ژن های آللی هستند. هر کروموزوم فقط سه ژن از پنج ژن را حمل می کند: D، C یا c، E یا e.

فعال ترین آنتی ژن Rh0 (D) است - فاکتور Rh. خون انسان بسته به وجود یا عدم وجود آن به Rh مثبت (Rh+) و Rh منفی (Rh-) تقسیم می شود.

روش های تعیین فاکتور Rh

تمام روش های تعیین فاکتور Rh به روش های مورد استفاده در تقسیم می شوند عمل بالینیو روش های آزمایشگاهی

روشهای تعیین Rho (D) در عمل بالینی

روش واکنشاین مطالعه در لوله های سانتریفیوژ با حجم حداقل 10 میلی لیتر انجام شده است. یک قطره از یک معرف جهانی استاندارد ، که یک سرم ضد رندس از گروه AB (IV) است ، با یک محلول 33 ٪ دکستران رقیق شده است ، به پایین لوله آزمایش اضافه می شود ، سپس یک قطره از خون آزمایش (یا قرمز سلول های خونی) به آن اضافه می شود. با چرخاندن لوله آزمایش به صورت دایره ای ، محتویات روی آن پخش می شود. سطح داخلیبه طوری که محتویات روی دیوارها پخش شود. این امر به طور قابل توجهی سرعت بخشیدن را سرعت می بخشد و آن را به قسمتهای بزرگ و کوچک می کند. تجمع روی دیواره های لوله در دقیقه اول رخ می دهد ، اما برای تشکیل یک مجتمع آنتی ژن و آنتی بادی پایدار و ترکیب شفاف ، حداقل 3 دقیقه مشاهده کنید. سپس ، برای حذف تجمع غیر اختصاصی گلبول های قرمز ، 2-3 میلی لیتر محلول فیزیولوژیکی را به لوله آزمایش اضافه کنید و با وارونه کردن لوله آزمایش یک بار (بدون لرزش!) مخلوط کنید.

تفسیر نتایج.

وجود آگلوتیناسیون (ورقه های بزرگ در برابر پس زمینه مایع پاک شده) نشان می دهد که خون مورد آزمایش Rh مثبت است.

حکومت اوتنبرگ

فقط گلبول های قرمز خونی که تزریق شده اند تحت آگلوتیناسیون قرار می گیرند خون اهدا کرداز آنجایی که آگلوتینین های خون تزریق شده در آن رقیق می شوند بستر عروقیبیمار، تیتر آنها کم می شود و نمی توانند گلبول های قرمز گیرنده را آگلوتینه کنند. طبق قانون اوتنبرگ می توان خونی را که گلبول های قرمز آن توسط سرم گیرنده آگلوتینه نمی شود، تزریق کرد.

قانون اوتنبرگ فقط در هنگام انتقال خون تا 0.5 لیتر خون اهداکننده (!) قابل اجرا است.

قرن‌هاست که دانشمندان تلاش کرده‌اند تا در مورد بدن انسانتا حد امکان و شفای بیمار از هر بیماری را بیاموزید. یکی از پارامترهای مهم تعیین گروه خونی توسط سیکلون است. پزشکی تنها چهار گروه خونی را بدون توجه به جنسیت و نژاد در افراد شناسایی می کند.ویژگی های ایمونولوژیکی که تفاوت اصلی در گروه آنتی ژن های گلبول قرمز را تشکیل می دهند، ارثی هستند.

زولیکلون چیست؟

تعیین گروه خونی با استفاده از معرف های مختلف آزمایشگاهی روش استانداردپژوهش. اطلاعات گروه خونی به ویژه در مواردی که فرد نیاز دارد بسیار مهم است کمک اضطراری. قبل از مداخله جراحینوع خصوصیات آنتی ژنی فردی فرد باید مشخص شود. همین رویه برای پرسنل نظامی (اطلاعات در فرم مشخص شده است)، برای زنان قبل از زایمان و غیره اجباری است.

کولیکون ها در مقایسه با روش جدیدپژوهش. این تجزیه و تحلیل را می توان در هر مرحله از درمان بستری بیماران انجام داد.

برای انجام آزمایشات آزمایشگاهی زمان زیادی نیاز نیست، کافی است تمام موارد لازم را داشته باشید مواد شیمیایی(کلیکون) و تجهیزات ساده.

کولیکلون ها در اصل یکی از انواع ایمونوگلوبولین ها (نوع M) هستند. اینها آنتی بادی های مونوکلونال هستند که با استفاده از آنها تولید شده اند مهندسی ژنتیک. کولیکلون ها با قرار دادن موش های آزمایشگاهی بدون میکروب در معرض سرم به دست آمد. تجمع مایع در آن شکل می گیرد حفره شکمیجوندگانی که حاوی این آنتی بادی ها هستند.

آمادگی برای رویه

تعیین گروه های خونی با استفاده از سیکلون ها نیاز دارد آماده سازی اولیهو اقدامات طبق الگوریتم تعیین شده. محیط اتاقی که تجزیه و تحلیل در آن انجام می شود به طور جداگانه مشخص می شود. دمای هوا نباید کمتر از 15 و بالاتر از 25 درجه باشد، در غیر این صورت نتیجه مطالعه را نمی توان قابل اعتماد دانست. اتاق باید عاری از گرد و غبار، حیوانات، حشرات و سایر عواملی باشد که می توانند بر روند تحقیق تأثیر فیزیکی بگذارند. همچنین برگزاری تجزیه و تحلیل آزمایشگاهینیاز به نور مناسب اتاق دارد.

هنگام استفاده از زولیکلون ها، مهم است که ویال ها را محکم بسته نگه دارید و اجازه ندهید که معرف ها خشک شوند، در غیر این صورت توانایی آنتی بادی ها برای اقدامات فعالبه طور محسوسی کاهش می یابد. قبل از عمل، تمام تجهیزات لازم آماده می شود. برای انجام تجزیه و تحلیل، شما به یک لوله برای نمونه بیولوژیکی، یک صفحه برای اعمال معرف ها، پیپت های استریل و چوب برای تعامل با نمونه های بیولوژیکی نیاز دارید.

اگر تکنسین آزمایشگاه نه تنها انجام دهد تست آزمایشگاهی، بلکه خونگیری، تهیه سرنگ های یکبار مصرف یا لوله های خلاء، تورنیکت ، الکل پزشکی, توپ های پنبه ایو دستمال مرطوب استریل ابزارهایی برای برچسب زدن تصاویر زیستی بیمار نیز باید در دسترس باشد.

انجام تجزیه و تحلیل

در مدرن تشخیص آزمایشگاهیبرای تعیین گروه خونی و فاکتور Rh از سه نوع زولیکلون استاندارد استفاده می شود. معرف Anti-A قرمز رنگ است و بطری، درپوش یا برچسب بطری نیز رنگی است. نوع "Anti-B" آبی رنگ است و نوع "Anti-AB" با نشانگر رنگی مشخص نشده است. تولید کنندگان معرف بسته های 5 یا 10 میلی لیتری زولیکلون را تولید می کنند. استفاده از معرف های خراب یا بی کیفیت مجاز نیست.

اگر عیوب بسته بندی قابل مشاهده است یا پوسته هایی در مایع ظاهر می شود، از زولیکون استفاده نکنید.

• برای تعیین این مورد، زولیکلون ها را روی یک صفحه آماده شده مخصوص اعمال می کنند که به عنوان یک میز طراحی شده است. انواع مختلف(الف، ب و اب). هر یک از آنها باید امضا شود. معرف بر روی یک منطقه مشخص شده خاص اعمال می شود. هر نوع زولیکلون باید با یک پیپت استریل جداگانه استفاده شود.
• 1 قطره از خون بیمار در کنار معرف ها قرار می گیرد.
• با استفاده از یک چوب استریل، معرف ها با نمونه بیولوژیکی مخلوط می شوند.
• تنها پس از چند ثانیه، می توانید تغییرات و واکنش آگلوتیناسیون را مشاهده کنید. طبق قوانین، مشاهده باید به مدت 3 دقیقه انجام شود. پس از این می توان در مورد نتایج تحقیق نتیجه گیری کرد.

چگونه نتیجه را درک کنیم

• عدم وجود هرگونه واکنش چسبندگی در همه نمونه ها به این معنی است که هیچ آگلوتینوژن از نوع آزمایش شده در گلبول های قرمز خون بیمار وجود ندارد. نمونه خون به عنوان گروه I (نوع 0) طبقه بندی می شود.
• اگر گلبول های قرمز خون بیمار با معرف هایی مانند "ضد A" و "ضد AB" واکنش نشان دهد ، بیمار مبتلا به نوع II (نوع A) است.
• تجمع قابل توجه نمونه خون آزمایش با نوع Coliclones "ضد AB" و "Anti-B" به این معنی است که بیمار دارای گروه خونی III (نوع B) است.
• اگر خون بیمار با تمام معرفهای شیمیایی واکنش نشان داده باشد ، نمونه آزمایش متعلق به گروه IV (نوع AB) است. هنگام تعیین گروه خونی با استفاده از زولیکلون ها، آزمایش اضافی لازم نیست، زیرا معرف ها حاوی مواد افزودنی نیستند که می توانند واکنش خود به خودی را تحریک کنند.

تعیین گروه خونی و فاکتور RH در مراکز آزمایشگاهی در موسسات پزشکی. این یک مطالعه نسبتاً ساده است که اطلاعات بسیار مفید و حیاتی را ارائه می دهد. اطلاعات مهمدر مورد یک انسان

تعیین گروه خونی با استفاده از سرم Isohemagglutinating زوج استاندارد.

1. معرفی:طبق تجویز پزشک، گروه‌بندی خون را با سرم‌های استاندارد در اتاق درمان انجام می‌دهیم. من یک کلاه ، عینک ، ماسک ، لباس ، پیش بند ، دستکش می پوشم. دست ها از قبل به روشی بهداشتی درمان می شوند.

2 تجهیزات:

سرم های استاندارد دو سری

آزمایش خون در لوله آزمایش

پلاک برای تعیین گروه خونی

چهار میله شیشه ای استریل (در یک لیوان، ظرف پتری)

محلول ایزوتونیک کلرید سدیم (لوله آزمایش)

پیپت استریل 2 عدد.

ظرف با محلول 3 درصد کلرامین.

3 انجام دستکاری

یک قطره (0.1 میلی لیتر) از سرم استاندارد را در چاهک های جداگانه اضافه کنید.

یک قطره بزرگ خون را در یک بشقاب در کنار چاه گروه 4 و در فاصله حداقل 1 سانتی متری از آن قرار دهید.

با استفاده از انتهای جداگانه میله های شیشه ای، خون را به سرم اضافه کنید (نسبت 10:1)، مخلوط کنید

بشقاب را به مدت 5 دقیقه تکان دهید و آگلوتیناسیون را مشاهده کنید.

محلول نمکی (0.1 میلی لیتر) را به چاه هایی که در آنها آگلوتیناسیون رخ داده است اضافه کنید.

بشقاب را تکان دهید و آگلوتیناسیون را مشاهده کنید.

فرم پاسخگویی:

هنگام تعیین گروه خونی با سرم های استاندارد

آگلوتیناسیون در هیچ یک از چاهک ها - گروه اول مشاهده نمی شود

آگلوتیناسیون در چاه اول و سوم - گروه دوم مشاهده می شود

آگلوتیناسیون در چاه اول و دوم - گروه سوم مشاهده می شود

آگلوتیناسیون در همه چاه ها - احتمالاً گروه چهارم - مشاهده می شود

نتیجه را با سرم گروه چهارم تعیین می کنیم (به طور مشابه)

فرم پاسخگویی:

با سرم گروه چهارم ، جمع شدن مشاهده نمی شود - گروه چهارم

با سرم گروه چهارم ، تجمع مشاهده نمی شود - تعیین نوع خون غیرممکن است ؛ سرم باید جایگزین شود.

پس از دستکاری، تمام اشیاء آلوده به خون را به مدت یک ساعت در محلول کلرامین سه درصد خیس کنید.

4 خطاهای احتمالی:

اشتباهات فاحش:

عدم استفاده از تجهیزات محافظ کارگر بهداشت.

استفاده مجدد از چاپستیک.

چوب هایی که با خون تماس پیدا کرده اند را روی یک سینی چوب تمیز منتقل کنید.

الگوی آگلوتیناسیون با نتیجه گیری در مورد عضویت گروه مطابقت ندارد.

اشیاء در تماس با خون ضد عفونی نمی شوند

غیر اشتباهات:

زمان انتظار آگلوتیناسیون کمتر از 5 دقیقه است.

به چاه هایی که آگلوتیناسیون در آنها رخ داده است، محلول نمکی اضافه نشده است.

چوب ها را از انتها بگیرید نه از مرکز.

5 معیار ارزیابی:

گذشت - بدون اشتباه عمده، بیش از دو اشتباه جزئی.

گذشت - وجود اشتباهات، وجود بیش از دو غیر اشتباه.

اگر یک اشتباه جدی مرتکب شود، معلم ممکن است از شما بخواهد که مرحله مربوط به دستکاری را تکرار کنید. اگر خطا تکرار شود، شکست می خورید. بیش از یک تکرار مجاز نیست.

یادآوری گروه خونی برای هر فردی مفید است. این ممکن است به طور غیرمنتظره زمانی مفید واقع شود موقعیت های اضطراری. بیهوده نیست که پرسنل نظامی گروه خونی خود را روی تونیک یا نشان هایشان نشان می دهند. نحوه تعیین گروه خونی شما مشکلی ندارد. بطور گسترده موسسات پزشکیاین کاری است که آزمایشگاه ها انجام می دهند. اما حتی در کلینیک های کوچک سرپایی روستایی کیت های استانداردی برای تعیین گروه وجود دارد و همه پزشکان و پرستاران می توانند آنالیز را انجام دهند. کارکنان پزشکی. در صورت وجود متخصصان نیازی به انجام این کار به تنهایی نیست.

اینکه کودک چه گروه خونی دارد را می توان از والدینش حدس زد. مثلاً با دانستن اینکه والدین دوم، سوم یا چهارم را دارند، نباید امیدوار باشید که فرزند اولی را داشته باشد.

توصیه های مشابهی توسط افرادی ارائه می شود که در اینترنت "زندگی می کنند" و هر گونه اطلاعاتی را بی رویه جمع آوری می کنند. گاهی آن را به شیوه خود باز تفسیر می کنند.

در واقع تئوری تغذیه بسته به گروه خونی وجود دارد و سعی شده است شخصیت با آن ارتباط برقرار شود. اما این برای انتخاب بیشتر طراحی شده است رژیم غذایی مناسب، پیشگیری از بیماری. حتی روانشناسان نیز در مورد ارتباط بین گروه شخصیت و شماره خون صحبت نمی کنند.

علاوه بر این، شما نمی توانید گروه خود را بر اساس غذاهای مورد علاقه خود یا تمایل به رهبری قضاوت کنید.

بهتر است هر چیزی را در خانه از مقالات کامل و مشاوره با متخصصان یاد بگیرید. شاید وجود داشته باشد مدارک پزشکی (کارت سرپایی، یادداشت های ترخیص از بیمارستان) که حاوی اطلاعاتی در مورد خون شما هستند.

در صورت درخواست اهداکنندگان و بیماران بیمارستانی، پاسپورت می تواند با این اطلاعات مهر شود.

نوارهای مشابهی در لباس ارتش استفاده می شود.

چه کسی گروه های خونی را اختراع کرد

کاشف چهار گروه خونی دانشمند و پزشک اتریشی K. Landsteiner است که در سال 1930 جایزه نوبل پزشکی را دریافت کرد. این کشف امکان پیشگیری را فراهم کرد فوت‌شدگانبه دلیل انتقال خون، ابتدا سازگاری ویژگی های اهداکننده و گیرنده را مطالعه کنید.

ماهیت سیستم AB0 پیشنهادی وجود ساختارهای آنتی ژنی بر روی گلبول های قرمز در انسان و حیوانات است. هیچ آنتی بادی معمولی (گاماگلوبولین) برای آنها در پلاسما وجود ندارد. بنابراین، واکنش "آنتی ژن + آنتی بادی" را می توان برای تعیین استفاده کرد.

شیوع گروه های خونی بر اساس ملیت

چسبندگی گلبول های قرمز زمانی اتفاق می افتد که آنتی ژن با آنتی بادی خود برخورد کند. این واکنش هماگلوتیناسیون نامیده می شود. در هنگام تجزیه و تحلیل به شکل تکه های کوچک قابل مشاهده است. تعیین گروه خونی بر اساس بدست آوردن الگوی آگلوتیناسیون با سرم های استاندارد است.

آنتی ژن های گلبول های قرمز از نوع "A" به آنتی بادی های "ά"، به ترتیب "B" به "β" متصل می شوند. بر اساس ترکیب خون، موارد زیر متمایز می شوند:

• I، یا 0 (ά، β) - هیچ آنتی ژنی در سطح گلبول های قرمز وجود ندارد.
• II، یا A (β) - حاوی آنتی ژن A با آنتی بادی β است.
• III، یا B (ά) - یک آنتی ژن نوع B با آنتی بادی ά وجود دارد.
• IV یا AB(00) - دارای هر دو آنتی ژن است، اما حاوی آنتی بادی نیست.

آنتی ژن ها در جنین انسان از قبل وجود دارد دوره جنینیو آنتی بادی ها (آگلوتینین ها) در سرم نوزادان در ماه اول زندگی ظاهر می شوند.

گروه خونی استاندارد (روش ساده)

برای انجام آزمایش گروه خونی ، گلبول های قرمز خون بیمار (که از قطره خون گرفته شده است) و سرم استاندارد حاوی آنتی ژن های شناخته شده مورد نیاز است.

سرم‌ها از خون اهداکننده در «ایستگاه‌های انتقال خون» ساخته می‌شوند، تاریخ انقضا دارند و نیاز به رعایت شرایط نگهداری دارند. شماره سری روی آمپول ها مشخص شده است. برای تجزیه و تحلیل دقیقدو سری سرم از سری های مختلف گرفته می شود. این کار برای از بین بردن خطاها انجام می شود.

یک قطره بزرگ از چهار سرم در دو ردیف روی یک صفحه صاف قرار می گیرد (فقط III و II کافی است، اما 1 و 1 ولت نیز برای کنترل گرفته می شود). با استفاده از میله های شیشه ای مختلف (استفاده از پیپت های چشم راحت است) ، خون را اضافه کنید تا در قطره های سرم آزمایش شود (نسبت باید تقریباً 1:10 باشد) و به آرامی هم بزنید.

بشقاب به مدت پنج دقیقه تکان داده می شود و اجازه می دهد سرم به خوبی با خون مخلوط شود.

رمزگشایی نتایج

5 دقیقه می گذرد و نتایج آنالیز قابل ارزیابی است. در قطره های بزرگ سرم، پاکسازی رخ می دهد، در برخی پوسته های کوچک تشکیل می شود (واکنش آگلوتیناسیون)، در برخی دیگر اینگونه نیست. در اینجا گزینه های احتمالی وجود دارد:

• اگر آگلوتیناسیون در هر دو نمونه با سرم های گروه III و II (+ کنترل 1 و 1 ولت) وجود نداشته باشد - این گروه اول است.
• اگر انعقاد در همه به جز II مشاهده شود، این نشان دهنده گروه دوم است.
• در صورت عدم آگلوتیناسیون فقط با سرم III، گروه خونی سوم ایجاد می شود.
• در صورت مشاهده انعقاد در همه نمونه ها، از جمله کنترل 1V - گروه چهار.

زمانی که سرم ها در به ترتیب درست، روی صفحه امضاها وجود دارد، به راحتی می توان آن را پیمایش کرد: جایی که آگلوتیناسیون وجود ندارد، گروه چنین است.

مواقعی وجود دارد که پیوند به وضوح قابل مشاهده نیست. سپس آنالیز دوباره انجام می شود، آگلوتیناسیون ریز زیر میکروسکوپ بررسی می شود.

روش واکنش متقاطع

برای روشن شدن گروه در صورت آگلوتیناسیون بیان نشده، از روش واکنش متقاطع مضاعف با گلبول های قرمز استاندارد استفاده می شود. که در در این موردشناخته شده سرم نیست، همانطور که در روش سادهو گلبول های قرمز. خون بیمار به داخل لوله آزمایش کشیده می شود، سانتریفیوژ می شود و سرم از بالا با پیپت برای آزمایش به بیرون پمپاژ می شود.

آنتی سرم استاندارد

2 قطره بزرگ سرم از بیمار روی یک صفحه صاف سفید ریخته می شود. آنها گلبول های قرمز استاندارد A (II) و B (III) را به گروه های خونی اضافه می کنند. به تدریج هم بزنید و بشقاب را تکان دهید.

نتیجه بعد از 5 دقیقه ارزیابی می شود:

• اگر آگلوتیناسیون در هر دو قطره رخ داد، گروه یک.
• اگر در هیچ نمونه ای نیست، گروه چهار.
• اگر در یکی از گلبول های قرمز شناخته شده استفاده شده باشد، گروه با وجود یا عدم وجود انعقاد در قطره تعیین می شود.

تعریف گروه توسط زولیکلون ها

زولیکلون ها جایگزین های سرم مصنوعی هستند. آنها حاوی جایگزین های مصنوعی برای آگلوتینین ά و β هستند. آنها را تست اریتروتست "Tsoliklon anti-A" می نامند. رنگ صورتی) و "ضد B" (آبی). آگلوتیناسیون مورد انتظار بین گلبول های قرمز خون مورد آزمایش و آگلوتینین کولیکلون ها رخ می دهد.

این تکنیک نیازی به استفاده از دو سری ندارد و دقیق تر و قابل اعتمادتر در نظر گرفته می شود. روش و ارزیابی نتایج مانند روش استاندارد ساده است.

ویژگی: گروه چهارم AB (IV) لزوماً با واکنش آگلوتیناسیون با زولیکن ضد AB خاص و عدم وجود چسبندگی غیر اختصاصی گلبول های قرمز در محلول ایزوتونیک کلرید سدیم تأیید می شود.

روش اکسپرس با استفاده از کیت "Erythrotest-group card".

این روش به شما امکان می دهد تا گروه و فاکتور Rh را در شرایط آزمایشگاهی و مزرعه تعیین کنید. این مجموعه شامل یک کارت با سوراخ است. معرف های خشک شده قبلاً در کف چاه ها اعمال می شود. در اینجا، علاوه بر "ضد A"، "ضد B" و "ضد AB"، از "anti-D" استفاده شده است که نتیجه فاکتور Rh را می دهد.

شما می توانید از خون به هر شکلی استفاده کنید؛ ترکیبی که یک ماده نگهدارنده دارد و از انگشت شما گرفته می شود.

قبل از مطالعه، نام بیمار روی کارت نوشته می شود و به هر چاه یک قطره آب اضافه می شود تا مواد حل شوند. سپس با استفاده از چوب های جداگانه خون را داخل چاهک ها اضافه کنید و به آرامی مخلوط کنید. نتیجه نهایی پس از سه دقیقه "خوانده" می شود.

اگر نیاز به تزریق خون باشد، همیشه گروه خونی دوباره بررسی می شود. در عین حال، سازگاری گروهی و فردی نظارت می شود. در واقع، در واقع، بسیار بیشتر در خون انسان یافت می شود خواص آنتی ژنینسبت به سیستم AB0 آنها به سادگی در اکثریت جمعیت تجلی ضعیفی دارند.

اما در بیمار مبتلا به بیماری های جدی که خواص خون را تغییر داده و بدن را حساسیت می دهد ، تعیین کننده می شوند و نیاز به توجه به حضور و سطح خون دارند. بنابراین، دانش بیمار گروه خوداطمینان را به نتیجه تحقیق اضافه می کند.

روش تعیین گروه های خونی با استفاده از سیستم ABO شامل شناسایی آنتی ژن های A و B در گلبول های قرمز با استفاده از آنتی بادی های استاندارد و استفاده از آگلوتینین ها در پلاسما یا سرم خون مورد بررسی با گلبول های قرمز استاندارد است. این تکنیک در ابتدای قرن بیستم توسعه یافت و هنوز به طور فعال در پزشکی استفاده می شود. تعیین آنتی ژن های A و B به لطف سیکلون های anti-A و anti-B انجام می شود.

مفاهیم اساسی

در اهداکنندگان، نه تنها آنتی ژن های موجود در گلبول های قرمز، بلکه آگلوتینین ها در سرم (پلاسما) نیز با استفاده از گلبول های قرمز استاندارد تعیین می شوند. به عنوان بیومتریال استفاده می شود خون بدون اکسیژن. قبل از مطالعه، شما باید امتناع کنید غذاهای چربیک روز قبل از آزمایش و نیم ساعت قبل از آزمایش سیگار نکشید. گروه های خونی دو بار مشخص می شوند: ابتدا در بخش پزشکی ، جایی که مواد تهیه شده است ، و سپس با تحقیقات در آزمایشگاه تأیید می شود.

تعیین گروه های خونی با استفاده از سیستم ABO آزمایش اصلی مورد استفاده در ترانسفوزیولوژی است. همچنین برخی از حیوانات دارای سیستم گروه خونی مشابهی مانند شامپانزه ها، گوریل ها و بونوبوها هستند.

تاریخچه کشف

یک نظر به طور کلی پذیرفته شده در علم وجود دارد که روش تعیین گروه های خونی با استفاده از سیستم ABO برای اولین بار توسط کارل لندشتاینر ، یک دانشمند اتریشی ، در سال 1900 مشخص شد. سپس در کار خود سه نوع آنتی ژن را شرح داد. برای این کار، سی سال بعد به او جایزه اهدا شد جایزه نوبلدر پزشکی و فیزیولوژی با توجه به اینکه قبلاً هیچ ارتباط نزدیکی بین دانشمندان وجود نداشت ، بعداً مشخص شد که سرولوژیست چک ، جان جانسکی ، صرف نظر از تحقیقات K. Landsteiner ، اولین کسی بود که چهار گروه خونی انسانی را توصیف کرد ، اما تحقیقات وی نبود برای مخاطبان گسترده ای شناخته شده است. در حال حاضر، این طبقه بندی توسعه یافته توسط J. Jansky است که در روسیه و جمهوری ها استفاده می شود اتحاد جماهیر شوروی سابق. در ایالات متحده، دبلیو ال ماس اثر مشابه خود را در سال 1910 خلق کرد.

روش تعیین گروه های خونی بر اساس سیستم ABO با استفاده از زولیکلون ها

گروه خونی باید در اتاقی با نورپردازی مناسب تعیین شود و دامنه دمای 15 تا 25 درجه سانتیگراد را حفظ کند ، زیرا انحراف از این هنجار ممکن است بر نتایج مطالعه تأثیر بگذارد. حروف اول و نام خانوادگی بیمار روی پلاک یا پلاک نوشته می شود. از چپ به راست یا در یک دایره، تعیین گروه های استاندارد اعمال می شود (O(I)، A(II)، B(III)). سرم های مربوطه با استفاده از پیپت های جداگانه برای هر نوع، قطره قطره در زیر آنها قرار می گیرند. سپس خون بیمار به آنها اضافه می شود. مواد برای مطالعه از لاله گوش یا انگشت گرفته شده است. این مورد توسط تکنیک تعیین گروه خونی با استفاده از سیستم ABO لازم است.

همچنین استفاده از گلبول های قرمزی که در لوله آزمایش پس از تشکیل لخته هستند، قانونی است. لازم است مقدار سرم باشد مقدار بیشترده بار خون اضافه کرد پس از این، قطره ها با میله های شیشه ای (به طور جداگانه برای هر کدام) مخلوط می شوند. به مدت پنج دقیقه، بشقاب را به آرامی تکان دهید، مراقب ظاهر واکنش هماگلوتیناسیون باشید. با ظهور توده های قرمز کوچک آشکار می شود که سپس به توده های بزرگتر ادغام می شوند. سرم در این زمان تقریباً به طور کامل رنگ خود را از دست می دهد.

به منظور از بین بردن خونریزی کاذب از چسبندگی ساده گلبول های قرمز ، باید بعد از سه دقیقه یک قطره شور اضافه کنید و بررسی کنید که آیا این ترکیب همچنان ادامه دارد. اگر بله، پس درست است. تمام شد، تعیین گروه های خونی طبق سیستم ABO کامل شد.

تفسیر نتایج

در نتیجه، چهار واکنش را می توان مشاهده کرد:

• آگلوتیناسیون با هیچ یک از سرم ها رخ نمی دهد - گروه اول O(I).
• واکنش با سرم I (ab) و III (a) - گروه دوم A (II) ظاهر شد.
• آگلوتیناسیون با سرم های I (ab) و II (b) رخ می دهد - گروه سوم B (III).
• اگر واکنش با سه سرم رخ دهد، باید یک روش اضافی را با معرف های گروه AB (IV) که استاندارد هستند انجام دهید. اگر در چنین قطره ای آگلوتیناسیون وجود نداشته باشد، می توانیم فرض کنیم که این چهارمین گروه خونی AB (IV) است.

روش اکسپرس برای فاکتور Rh

روش تعیین گروه های خونی با استفاده از سیستم ABO شامل تشخیص همزمان فاکتور Rh (Rh) است.

سطح بشقاب از قبل خیس شده و سرم کنترل و سرم ضد رزوس روی آن نوشته شده است. سپس یک یا دو قطره از معرف های مورد نیاز در زیر کتیبه ها ریخته می شود و مواد مورد تجزیه و تحلیل به آنها اضافه می شود. برای این کار می توانید از خون انگشت (به اندازه حجم سرم) یا گلبول های قرمز باقی مانده در انتهای لوله پس از ظاهر شدن لخته (نصف حجم سرم) استفاده کنید. انتخاب مواد برای نتیجه نهاییتاثیر نمی گذارد. سپس خون و سرم با یک میله شیشه ای خشک مخلوط می شوند و پس از آن واکنش به مدت پنج دقیقه صبر می شود. به منظور حذف قرائت های نادرست، یک محلول ایزوتونیک کلرید سدیم (فقط چند قطره) پس از سه تا چهار دقیقه اضافه می شود. تعیین گروه خونی با توجه به سیستم های ABO و Rh اغلب انجام می شود.

اگر آگلوتیناسیون گلبول های قرمز در افت سرم رخ دهد، این نشان می دهد Rh مثبتخون طبق آمار، Rh+ در 85 درصد از جمعیت جهان رخ می دهد. عدم وجود آن به ما اجازه می دهد در مورد وابستگی Rh منفی صحبت کنیم. اگر آگلوتیناسیون در سرم کنترل ظاهر شود، به این معنی است که غیر قابل استفاده شده است. متأسفانه الگوریتم تعیین گروه خونی با استفاده از سیستم ABO همیشه بی نقص عمل نمی کند.

با این تکنیک چه اشتباهاتی می توان کرد؟

عدم دقت در تعیین اینکه آیا خون متعلق به یک گروه خاص است به دلایل زیر بستگی دارد:

• فنی.
• ویژگی بیولوژیکی خون مورد آزمایش
• پایین بودن سرم ها و گلبول های قرمز استاندارد.

خطاهای فنی

خطاهای احتمالی هنگام تعیین گروه خونی ABO با استفاده از روش متقاطع:

خطاهای ویژگی بیولوژیکی

خطاهای مرتبط با ویژگی بیولوژیکی خون تجزیه و تحلیل شده به دو نوع تقسیم می شوند.

• بسته به ویژگی های گلبول های قرمز.
• خطاهای ناشی از ویژگی های بیولوژیکیسرم

بیایید هر نوع را با جزئیات بیشتری بررسی کنیم.

بسته به ویژگی های گلبول های قرمز

• آگلوتیناسیون دیررس، که با اشکال "ضعیف" گلبول های قرمز و آنتی ژن ها توضیح داده می شود. برای جلوگیری از خطا، تعیین گروه خونی اهداکنندگان و گیرندگان با استفاده از گلبول های قرمز استاندارد ضروری است. آگلوتینوژن A2 باید با تکرار مطالعه با انواع دیگر معرف ها و سایر ظروف شیشه ای شناسایی شود و زمان ثبت واکنش افزایش یابد.
• "پاناگلوتیناسیون" ("خودآگلوتیناسیون") - توانایی خون برای نشان دادن واکنش مشابه ماهیت غیر اختصاصیبا همه سرم ها از جمله سرم خودمان. پس از پنج دقیقه، شدت چنین آگلوتیناسیون ضعیف می شود، اگرچه باید افزایش یابد. موارد مشابهدر بیماران سرطانی، بیماران سوخته و غیره مشاهده شده است. به عنوان شاهد، بررسی تظاهرات آگلوتیناسیون گلبول های قرمز در سرم استاندارد گروه چهارم و محلول نمک ضروری است. با "پاناگلوتیناسیون"، گروه خون در نتیجه شستشوی سه گانه گلبول های قرمز تعیین می شود. اگر نمی دهد نتیجه مطلوببهتر است نمونه خون را مجدداً در لوله آزمایش گرم شده قبل از عمل قرار دهید و نمونه را در یک ظرف حرارتی قرار دهید تا دمای 37 درجه سانتیگراد و بالاتر حفظ شود. سپس باید به آزمایشگاه برده شود و در آنجا دمای فوق حفظ شده و از محلول نمکی گرم شده، پلیت و معرف استفاده شود.

• بعضی اوقات گلبولهای قرمز خون مورد تجزیه و تحلیل مانند "ستون های سکه" قرار می گیرند و می توانند در مورد آگلوتینات ها اشتباه بگیرند. اگر دو قطره از محلول ایزوتونیک اضافه کنید و به آرامی صفحه را سنگ بزنید ، گلبول های قرمز به حالت صحیح حرکت می کنند.
• ترکیب ناقص یا مخلوط ، در بیماران مبتلا به گروه های دوم ، سوم و چهارم در نتیجه پیوند رخ می دهد مغز استخوانیا در سه ماه اول پس از انتقال خون 0 (i).

با توجه به ویژگی های بیولوژیکی سرم

خطاهای مرتبط با استفاده از گلبولهای قرمز معیوب و گلبولهای قرمز و سرم

سرم های ضعیف که تاریخ انقضا را پشت سر گذاشته اند یا تیتر کمتر از 1:32 دارند ، قادر به ایجاد ترکیب ضعیف و دیررس هستند. استفاده از چنین معرف هایی غیرقابل قبول است.

استفاده از اریتروسیت ها یا سرم های استاندارد غیرقابل استفاده، تهیه شده در شرایط غیر استریل و به اندازه کافی حفظ نشده است، منجر به ظهور آگلوتیناسیون "باکتریایی" می شود که ماهیت غیر اختصاصی دارد.

مفروضات رایج زیادی در مورد گروه های خونی ABO وجود دارد که بلافاصله پس از کشف آن در فرهنگ های مختلف جهان ظاهر شد. به عنوان مثال، در دهه 30 قرن گذشته در ژاپن و برخی از کشورهای دیگر، نظریه ای که گروه خونی را با یک یا آن تیپ شخصیتی مرتبط می کند محبوبیت پیدا کرد. تئوری های مشابه امروزه نیز رایج هستند.

همچنین این عقیده وجود دارد که فردی با گروه A مستعد ابتلا است خماری شدید، O همراه است دندان های خوب، و گروه A2 - با بیشترین سطح بالا IQ اما چنین ادعاهایی از نظر علمی ثابت نشده است.

ما تعیین گروه های خونی را بر اساس سیستم ABO با استفاده از سرم های استاندارد بررسی کردیم.