ویژگی سیستم ایمنی و واکنش های دفاعی غیر اختصاصی بدن - ایمونولوژی. واکنش های ایمونولوژیک

همانطور که مشخص است، در طول پاسخ ایمنی، یک پیوند فیزیکوشیمیایی بین یک آنتی ژن خارجی و یک آنتی بادی (خاص) ایجاد می شود که فقط با آن واکنش نشان می دهد، که به خنثی سازی و تجزیه آنتی ژن ها کمک می کند. این سوال مطرح می شود: چگونه بدن می تواند یک آنتی بادی خاص برای هر یک از صدها هزار آنتی ژنی که از محیط بیرونی منشا می گیرند تشکیل دهد. اخیراً سعی شده است پاسخ ایمنی با دو نظریه متناقض توضیح داده شود: نظریه آموزشی و انتخابی.

من. نظریه آموزشی: یک آنتی ژن با دادن نمونه باعث تشکیل یک آنتی بادی خاص می شود که فقط با آن واکنش نشان می دهد (این نظریه در این شکل را می توان رد کرد.)

II. تئوری انتخاباتی: در نتیجه تحقیقات ژنتیکی و روشن شدن ساختار شیمیایی ایمونوگلوبولین می توان نظریه انتخابی را اثبات شده دانست. روی سطح آنتی ژن ها گروه های تعیین کننده (زنجیره های جانبی) وجود دارد. بدن دارای توانایی ارثی است که در DNA هسته سلولی تعبیه شده است تا آنتی بادی های خاصی را تشکیل دهد که با آنتی ژن ها واکنش نشان می دهند. اگر بدن با آنتی ژن خاصی مواجه شود، در نتیجه تحریک، کسانی که با پروتئین واکنشیلنفوسیت ها به طور انتخابی تکثیر می شوند. به جمعیت لنفوسیتی که قادر به تولید چنین آنتی بادی خاصی هستند، کلون گفته می شود.

آنتی بادی به دست آمده، طبق تجربه موجود، فقط تا حدی اختصاصی است، زیرا گونه‌ها یا پروتئین‌های نزدیک به هم با عملکرد مشابه، واکنش متقاطع ایجاد می‌کنند، و در برخی موارد حتی آنتی‌ژن‌های دوردست سیستمیک می‌توانند واکنش نشان دهند (مثلاً آنتی ژن فورسمن). . این به این دلیل است که در طول ایمن سازی، تقریباً همیشه یک یا چند مولکول پروتئین پیچیده با گروه های مشخصه متعدد (تعیین کننده ها) به بدن وارد می شود. با این حال، در مطالعه پروتئین های کریستالی و مصنوعی، مشخص شد که یک مولکول ایمونوگلوبولین نمی تواند با بیش از دو عامل تعیین کننده واکنش نشان دهد.

در رابطه با تعیین کننده آنتی ژنی، طبق تحقیقات لوین، در نتیجه تنظیم ژنتیکی، قانون "همه یا هیچ" برای پاسخ ایمنی اعمال می شود. طبق تحقیقات ما، همین قانون در مورد آلرژن‌ها نیز صدق می‌کند: کودکی که به لیزین-وازوپرسین مصنوعی حساس است، هیچ واکنش آلرژیکی به اکسی توسین نشان نمی‌دهد، اگرچه دومی با وازوپرسین تنها در یک اسید آمینه حلقوی، علاوه بر لیزین، که از نظر بیولوژیکی است، متفاوت است. تاثير گذار.

تحمل ایمنی. این وضعیت برعکس ایمنی است: بدن به معرفی یک آنتی ژن خارجی پاسخ ایمنی نمی دهد، که، همانطور که در بالا می آید، می تواند در نتیجه یک ویژگی ژنتیکی ایجاد شود: از این شخصهیچ کلون لنفوسیتی وجود ندارد که بتواند آنتی بادی مربوطه را تشکیل دهد. تحت تأثیر مقدار بسیار زیادی آنتی ژن (اشباع کننده) یا مکرر تکرار می شود دوز پایینآنتی ژن، یک پاسخ ایمنی از قبل موجود ممکن است متوقف شود و تحمل یک آنتی ژن خاص ممکن است ایجاد شود، یعنی بدن به طور موقت یا دائم توانایی سنتز یا آزادسازی مواد ایمنی را در رابطه با یک آنتی ژن داده شده از دست بدهد. تحمل به اندازه یک پاسخ ایمنی خاص است: فقط به یک آنتی ژن خاص مربوط می شود.

مکانیسم تحمل اکتسابی:

1. برتری آنتی ژن ها آنتی بادی های واقع در سطح لنفوسیت های B را مسدود می کند و از تکثیر کلون های سلولی مربوطه جلوگیری می کند. ترمز عملکردهای سلولیبا کمک عوامل سیتوتوکسیک، ظهور تحمل را ترویج می کند.

2. یک آنتی بادی، زمانی که در غلظت های بالا تجویز شود، همچنین می تواند با اتصال به آنتی ژن قبل از رسیدن به لنفوسیت های واکنش پذیر خاص منجر به تحمل شود.

3. بر اساس اکثر مطالعات جدید، تحریک سلول های T مهار کننده (سرکوبگر) در ایجاد تحمل بسیار مهم است.

هیبریداسیون. بر اساس آخرین تحقیقات، با رشد مشترک دو نوع لنفوسیت با قابلیت پاسخ های ایمنی مختلف در کشت بافت، می توان سلول های مونوکلونال (تشکیل دهنده یک نوع آنتی بادی) را به دست آورد. باز می شود فرصت جدیدحفاظت غیر فعال، و در آینده امکان به دست آوردن آنتی بادی های انسانی در مقادیر زیاد وجود خواهد داشت.

ساختار شیمیایی مولکول ایمونوگلوبولین از تحقیقات Edelman شناخته شده است. قبلاً مشخص شده بود که مولکول ایمونوگلوبولین با جدا کردن پل های دی سولفیدی می تواند به دو زنجیره H (سنگین) و دو زنجیره L (سبک) تقسیم شود. با هضم پاپائین، مولکول را می توان به روش دیگری تکه تکه کرد: سپس دو قسمت به نام Fab و یک قسمت به نام Fc جدا می شوند.

قطعه فاب. محل اتصال یک آنتی ژن خاص را تشکیل می دهد. قطعه شامل زنجیره L کامل و بخشی از زنجیره H است.قسمت خارجی (آمینو ترمینال) یا بخش N دو زنجیره، ناحیه V متغیر است. این حاوی 111 اسید آمینه است که اتصال ویژه آنها توسط توالی و پیکربندی استریو که در بین آنتی بادی های فردی متفاوت است تعیین می شود. ترتیب اسیدهای آمینه (توالی) قسمت دیگر مستقل از توانایی واکنش با یک آنتی ژن خاص است: این بخش C (ثابت) است. مورد دوم به طور جداگانه متفاوت است، و بنابراین انواع مختلفی در مورد کیفیت IgG توصیف شده است.

وزن مولکولی زنجیره ها L: 20000. از نظر آنتی ژنی، دو نوع زنجیره سبک وجود دارد: کاپا و لامبدا (اما در هر مولکول فقط یک نوع وجود دارد).

قطعه Fc. این نشان دهنده بخشی از زنجیره H است. به خودی خود، به آنتی ژن متصل نمی شود، اما در مورد واکنش فیزیکوشیمیایی بین Fab و آنتی ژن، زنجیره ای از واکنش های بیولوژیکی را القا می کند.

طبقه بندی ایمونوگلوبولین ها بر اساس آنتی ژنی متفاوت زنجیره های H امکان پذیر است. در حال حاضر، پنج نوع ایمونوگلوبولین متمایز شده است. زنجیره L در هر مورد می تواند دوگانه باشد: کاپا و لامبدا.

صفحه 5 از 19

در مورد ویژگی واکنش های ایمنی. پاسخ موجودات زنده به محرک های مختلف از جمله بیماری زا می تواند خاص و غیر اختصاصی باشد. مشخصه پاسخ فقط یک محرک معین، خاص نامیده می شود. و این یا آن واکنشی که هنگام قرار گرفتن در معرض طیف گسترده ای از محرک ها رخ می دهد غیر اختصاصی نامیده می شود. تشکیل آنتی بادی در بدن در پاسخ به قرار گرفتن در معرض آنتی ژن های خاص یک واکنش کاملاً خاص در نظر گرفته می شود.

بر اساس این واقعیت که اصطلاحات "ایمنی" یا "ایمونولوژیک" به معنای توانایی بسیار خاص بدن برای پاسخ دادن به مولکول های خارجی است، امروزه صحبت در مورد واکنش ایمنی خاص یا یک پاسخ ایمنی غیراختصاصی نامناسب تلقی می شود. آنها باید به عنوان عوامل حفاظتی غیر اختصاصی تعیین شوند. البته باید توجه داشت که ویژگی، علاوه بر پدیده های ایمونولوژیک، مشخصه بسیاری از پدیده های دیگر نیز می باشد. خاص بودن و عدم خاص بودن به عنوان مقوله های ماتریالیسم دیالکتیکی را باید در وحدت و پیوند نزدیک در نظر گرفت.

ماهیت ویژگی همه پدیده‌های ایمونولوژیک در نهایت به تعامل آنتی ژن‌ها و آنتی‌بادی‌ها به شیوه‌ای «قفل کلید» برمی‌گردد. این رابطه قرابتی است که به هر آنتی ژن اجازه می دهد فقط با مواد خارجی خاصی که وارد بدن شده و خطر بالقوه ای برای آن ایجاد می کند، تعامل داشته باشد. اتصال آنتی ژن ها مستلزم مجموعه ای از واکنش ها با هدف حذف آنتی ژن ها و رهایی بدن از آنها است. برای این کار، اول از همه، نیاز به تشکیل آنتی بادی های خاص است.

یک بدن سالم در شرایط عادی نیز دائماً حاوی آنتی بادی است (عمدتاً در سرم خون)، اما در مقادیر بسیار کمی که به وضوح برای اتصال مؤثر آنتی ژن ها کافی نیست. آنتی ژنی که در بدن ظاهر می شود باعث ایجاد آنتی بادی می شود. همانطور که I.P. Pavlov گفت، در اینجا نیز آسیب شناسی (یا یک عامل بیماریزا) شرایطی را برای از بین بردن عواقب آسیب شناسی یا جلوگیری از تأثیر عوامل بیماری زا ایجاد می کند.

عملکرد محافظتی خاص بدن، پاسخ ایمنی نامیده می شود. شرط حذف آنتی ژن ها در طول تعامل آنها با آنتی بادی ها، مرگ سلول های حامل این آنتی ژن ها است.

ما تکرار می کنیم اساس ایمنی آنتی ژن ها و آنتی بادی ها و همچنین روابط آنها است. آنتی ژن ها ماکرومولکول های خارجی هستند از یک موجود زنده. اصطلاح "آنتی بادی" به گروهی از مولکول های پروتئینی از یک نوع شناخته شده اطلاق می شود که قادر به اتصال به مکان های کاملاً تعریف شده هستند و گروه های عاملیماکرومولکول های آنتی ژن این پروتئین ها ایمونوگلوبولین نامیده می شوند که از گاما گلوبولین ها با مشارکت مستقیم بافت لنفاوی تشکیل می شوند.

ویژگی بالای آنتی بادی ها در درجه اول در این واقعیت نهفته است که فقط آنتی بادی ها (ضد A) علیه آنتی ژن A تولید می شوند که با هیچ آنتی ژن دیگری تعامل ندارند. آنتی ژن B همچنین دارای آنتی بادی های به همان اندازه خاص - ضد B است. بنابراین، بدن در پاسخ به تهاجم هر ماده خارجی، آنتی بادی هایی را به طور اختصاصی علیه این ماده تولید می کند.

هر ارگانیسم دارای مجموعه متنوعی از آنتی بادی های مختلف است و قادر به ایجاد آنتی بادی در برابر آنتی ژن های تقریباً هر ویژگی است. در حال حاضر، چندین شکل از واکنش های خاص در ایمونولوژی شناخته شده است که واکنش ایمنی را تشکیل می دهند: تولید آنتی بادی، حساسیت مفرط. نوع فوری، ازدیاد حساسیت نوع تاخیری، حافظه ایمونولوژیک، تحمل ایمونولوژیک، تعامل ایدیوتیپ - ضد ایدیوتیپی.

مکانیسم های اخیراً کشف شده نظارت ایمنی جایگاه ویژه ای را اشغال می کند. این پدیده ها به دسته شناخت اولیه "خود" و "خارجی" تعلق دارند که منجر به ممانعت از تولید مثل سلول های ژنتیکی خارجی می شود. واکنش های ایمونولوژیک بیشتر منجر به رد خارجی می شود.

بنابراین، آنتی ژن ها موادی هستند که یک یا شکل دیگری از یک پاسخ ایمنی خاص را تحریک می کنند. بر اساس فرمولاسیون ایمنی به عنوان راهی برای محافظت از بدن در برابر اجسام و مواد زنده، دارای علائمبیگانه بودن ژنتیکی، مفهوم "آنتی ژن" را می توان به صورت زیر فرمول بندی کرد: آنتی ژن ها همه آن دسته از موادی هستند که دارای علائم بیگانه بودن ژنتیکی هستند و هنگامی که به بدن وارد می شوند، باعث ایجاد واکنش های ایمنی خاص می شوند.

آنتی ژنی در پروتئین ها، بسیاری از پلی ساکاریدهای پیچیده، لیپوپلی ساکاریدها، پلی پپتیدها و همچنین برخی از ترکیبات مصنوعی با پلیمر بالا ذاتی است. آنتی ژن با ویژگی های زیر مشخص می شود: خارجی بودن، ایمنی زایی، ویژگی. بیگانه بودن مفهومی جدایی ناپذیر از آنتی ژن است. آنتی ژن ها اغلب منشأ درونی دارند و حتی در بدن سالم نیز می توانند تشکیل شوند. به عنوان مثال، اخیراً بیش از 30 آنتی ژن به تنهایی در مایع منی شناسایی شده است که می تواند باعث تشکیل آنتی بادی شود. در میان آنها آنتی ژن های اختصاصی و غیر اختصاصی وجود دارد. اغلب، ظهور آنتی بادی ها علیه این آنتی ژن ها می تواند عوارض جدی ایجاد کند.

آنتی بادی های ضد اسپرم باعث ایجاد اختلال در اسپرم زایی در هر مرحله می شوند. در شرایط عادی، این سلول‌ها از سیستم‌های واکنش‌دهنده ایمنی بدن انسان توسط سد خونی بیضه جدا می‌شوند. نقض این مانع به دلیل آسیب، جراحی یا عفونت می تواند باعث خودایمنی و ناباروری بعدی شود. به هر حال، فراوانی اشکال ایمونولوژیک ناباروری در محدوده های بسیار گسترده ای متفاوت است.

ویژگی پاتولوژیک مفهومی است که در ارتباط با جستجوی آنتی ژن های مشخصه بافت های آسیب شناختی ایجاد شده است. این شامل "سوختگی"، "تابش"، "سرطان" و سایر آنتی ژن های موجود در سوختگی، تشعشع، سرطان و غیره است.
هر مولکول ایمونوگلوبولین حاوی حداقل 2 جفت زنجیره پلی پپتیدی سنگین و سبک است. یک سر این زنجیرهای سنگین و سبک قسمت متغیر و بقیه زنجیره ثابت است. قسمت متغیر برای هر نوع آنتی بادی متفاوت است. این سیستم است که به یکی از آنتی ژن ها متصل می شود نوع خاص. قسمت ثابت یک آنتی بادی آن را مشخص می کند ویژگی های فیزیکوشیمیاییتحرک در بافت ها، تثبیت در آنها، ارتباط با مکمل، نفوذ آنتی بادی ها از طریق غشاء و سایر خواص بیولوژیکی.
در حیوانات و احتمالاً انسان، تنها حدود 1000 ژن راز تولید لنفوسیت های T و آنتی بادی های مختلف را دارند. آنتی بادی ها عمدتا از گاما گلوبولین ها با مشارکت مستقیم لنفوسیت های B تشکیل می شوند. اعتقاد بر این است که 3 نوع آنتی بادی وجود دارد: آنتی بادی های ایمنی، یا محافظ، تهاجمی و آنتی بادی های اطراف.

توسط ایده های مدرن، پنج نوع آنتی بادی وجود دارد. هر کدام از آنها ویژگی های خاص خود را دارند. در میان آنها بسیار است مهمدارای ایمونوگلوبولین G است که 75 درصد از کل آنتی بادی های یک فرد سالم را تشکیل می دهد. ایمونوگلوبولین E در مقادیر کم در بدن یافت می شود، اما اهمیت آن به ویژه در واکنش های آلرژیک بسیار زیاد است. بیشتر آنتی بادی هایی که در طی پاسخ اولیه تشکیل می شوند، ایمونوگلوبولین M هستند. این آنتی بادی ها دارای 10 گیرنده هستند و بنابراین بسیار فعال هستند.

روزی روزگاری، ایمونولوژیست ها بر این باور بودند که تمام تظاهرات ایمنی با آنتی بادی ها مرتبط است و بنابراین لازم است تا حد امکان در مورد خواص آنتی بادی ها بدانیم. تصادفی نیست که اکثر تئوری های ایمنی با مطالعه تشکیل و ماهیت آنتی بادی ها مرتبط بودند. و طبق مفاهیم امروزی، آنتی بادی ها نقش بسیار مهمی در واکنش های ایمونولوژیک دارند.
توسعه بیشتر ایمونولوژی نشان داده است که بسیاری از جنبه های آن به طور مستقیم با آنتی بادی ها و ایمنی ضد میکروبی مرتبط نیست.

اکنون می دانیم که حداقل حدود 1 میلیون لنفوسیت T مختلف و همین تعداد لنفوسیت B از قبل آماده شده اند و زمانی که توسط آنتی ژن های مربوطه فعال می شوند قادر به تهیه آنتی بادی های تخصصی هستند. هر یک از این لنفوسیت ها می توانند یک آنتی بادی (یا یک نوع سلول T) بسازند. فقط آن آنتی ژن خاصی که بتواند با یک سلول معین واکنش نشان دهد، فعالیت آن را افزایش می دهد. اما به محض اینکه یک لنفوسیت خاص توسط یک آنتی ژن خاص فعال می شود، شروع به تکثیر شدید می کند و ایجاد می کند. مقدار زیادیلنفوسیت های مشابه

آنتی بادی های ترشح شده توسط لنفوسیت های B در سراسر بدن در خون حمل می شوند. سلول های فعال شده توسط لنفوسیت های T ابتدا در لنف آزاد می شوند که خون را تامین می کند و سپس در سراسر بدن گردش می کنند. سپس دوباره به لنف باز می گردند و از این طریق می توانند ماه ها و گاهی سال ها در گردش باشند.

با شناسایی آنتی ژن، لنفوسیت های T در واکنش های ماکروفاژها قرار می گیرند. ماکروفاژها پس از جداسازی آنتی ژن ها به قسمت های کلوئیدی خود، ابتکار عمل را به لنفوسیت های B می دهند. امروزه وجود گیرنده‌های ویژه‌ای که آنتی‌ژن‌ها را تشخیص می‌دهند و مکانیسم‌های فعال‌سازی لنفوسیت‌های T و B و جمعیت آن‌ها شناسایی شده‌اند. با گذشت زمان، لنفوسیت های B تبدیل می شوند

به کارخانه تولید مثل آنتی بادی هنگامی که واکنش ایمنی به اوج خود می رسد و خطر عوارض ناشی از توسعه آن مشخص می شود، لنفوسیت های T فعال می شوند - سرکوبگرهایی که تنظیم (سرکوب پاسخ ایمنی) را انجام می دهند.

برای انجام اینها پیچیده ترین توابعآنتی ژن ها و آنتی بادی ها با مکانیسم های بسیار پیچیده ای مجهز هستند.
مولکول های آنتی ژن چند ظرفیتی هستند. گیرنده های متعدد روی سطح آنها را قادر می سازد تا به طور همزمان به مولکول های آنتی بادی خاصی متصل شوند. آنتی بادی ها از دو جزء تشکیل شده اند - یک پروتئین کلوئیدی بومی و یک گروه تعیین کننده. ویژگی آنتی بادی ها با توالی حرکت پروتئین گروه تعیین کننده (گلوبولین)، اسیدهای آمینه و پلی ساکاریدها بر روی سطح تعیین می شود. تا به امروز، مطالب واقعی کافی در ایمونولوژی انباشته شده است که نشان دهنده امکان تحریک تشکیل آنتی بادی و به طور کلی ایمونوژنز توسط تعدادی از مواد غیر اختصاصی است که تحت نام متداول"ادجوانت". بر اساس ادبیات و داده های ما مکان عالیاز جمله آنها به نمک ها و ترکیبات ریز عناصر مختلف تعلق دارد.

برهمکنش آنتی ژن با آنتی بادی نیز مکانیسم پیچیده ای دارد. فرض بر این است که اطلاعات مربوط به تشکیل آنتی بادی ها از نظر ژنتیکی تعیین می شود، در داخل سلول موجود است و با اسید ریبونوکلئیک مرتبط است. با این حال، تعامل آنتی ژن ها با آنتی بادی ها همیشه به خوبی برای بدن ختم نمی شود و همیشه منجر به از بین رفتن اثر آنتی ژن نمی شود. در برخی موارد، چنین تعاملی منجر به عوارض شدیدایمنی به شکل ایجاد شوک کلوئیدوکلاتیک و غیره.

در مکانیسم آسیب به آنتی بادی ها در سطح سلولی، اخیراً جایگاه ویژه ای به اختلال در نفوذپذیری غشای سلولی با تشکیل یک سوراخ به اصطلاح عملکردی در آنجا تحت تأثیر آنتی بادی ها و مکمل ها داده شده است. از طریق این "سوراخ" یون های Na+ و K+ آزادانه وارد سلول می شوند، در نتیجه فشار اسمزی داخل سلول افزایش می یابد و آب را به آنجا جذب می کند. تورم سلولی منجر به افزایش حتی بیشتر در اندازه "سوراخ" در داخل می شود غشای سلولی. تمام مولکول ها از طریق آن شروع به نفوذ به داخل سلول می کنند. اندازه های بزرگ، که منجر به تشدید روند پاتولوژیک می شود.

واکنش های آگلوتیناسیون
این واکنش‌ها شامل آنتی‌ژن‌هایی به شکل ذرات (سلول‌های میکروبی، گلبول‌های قرمز و سایر آنتی‌ژن‌های بدن) می‌شوند که توسط آنتی‌بادی‌ها به هم چسبیده و رسوب می‌کنند.
برای انجام واکنش آگلوتیناسیون (RA)، سه جزء مورد نیاز است: 1. آنتی ژن(آگلوتینوژن)؛ 2) پادتن(آگلوتینین) و 3) الکترولیت(محلول ایزوتونیک کلرید سدیم).
Ag + AT + الکترولیت = آگلوتینه

1. ایجاد تقریبی واکنش های آگلوتیناسیون (RA) روی شیشه برای شناسایی باکتری های کلیفرم.

برنج. 2. RA روی شیشه.

بر اسلایدبه صورت قطره ای اعمال می شود:

1 قطره: - سرم آگلوتینه کننده در برابر پاتوژن های اسهال خونی.
2 قطره ام: - سرم آگلوتینه کننده در برابر پاتوژن های تیفوئید.
3 قطره -ام: - محلول نمک (شاهد).
به هر قطره اضافه کنید کشت خالص باکتری را آزمایش کرد . هم بزنید.

توجه داشته باشید: نتیجه مثبت - وجود تکه های آگلوتینه،
منفی - بدون پوستهآگلوتینه کردن
نتیجه: باکتری های مورد مطالعه عوامل ایجاد کننده تب حصبه هستند.

2. حسابداری برای نتایج RNGAطراحی شده برای تشخیص سم بوتولینوم.

عامل بوتولیسم است کلستریدیوم بوتولینومسموم هفت سرووار (A، B، C، D، E، F، G) تولید می کند، اما سرووارهای A، B، E شایع تر از سایرین هستند.همه سموم از نظر خواص آنتی ژنی متفاوت هستند و می توانند در واکنش ها متمایز شوند. سرم های نوع خاص. برای این منظور می توان یک واکنش هماگلوتیناسیون غیرفعال (غیر مستقیم) با سرم بیمار انجام داد که در آن وجود سم فرض می شود و گلبول های قرمز با آنتی بادی های سرم های ضد بوتولینوم آنتی سمی انواع A، B، E بارگذاری می شوند. سرم به عنوان یک کنترل عمل می کند.

برنج. 3. بیانیه و نتیجه RNGA.

حسابداری چتر دکمه هایا یک حلقه

نتیجه: سم بوتولینوم نوع E در سرم بیمار تشخیص داده شد.

واکنش بارش -این تشکیل و رسوب مجموعه ای از آنتی ژن مولکولی محلول با آنتی بادی ها به شکل ابری به نام رسوب است. از مخلوط کردن آنتی ژن ها و آنتی بادی ها در مقادیر معادل تشکیل می شود. واکنش رسوب در لوله های آزمایش (واکنش رسوب حلقه ای)، در ژل ها، رسانه های مغذیآه و غیره

3. تنظیم و ضبط واکنش بارش حلقهبرای تعیین نوع لکه خون

صحنه سازی . در لوله آزمایش باریک شماره 1 به قطر 0.5 سانتی متر با رسوب رقیق نشده سرم علیه پروتئین های خون انساندر مقدار 0.3-0.5 میلی لیتر، با نگه داشتن آن در یک موقعیت شیبدار، همان حجم آنتی ژن به آرامی با پیپت پاستور در امتداد دیواره قرار می گیرد. عصاره لکه خون). سرم رسوبی علیه پروتئین های گوسفند در لوله آزمایش شماره 2 ریخته می شود و در لوله آزمایش شماره 3 - شور(کنترل) و آنتی ژن را مانند لوله آزمایش اول اضافه کنید. لوله های آزمایش را به صورت عمودی و با احتیاط قرار دهید تا مایعات با هم مخلوط نشوند. هنگامی که رسوب گیر به درستی روی سرم قرار می گیرد، مرز بین دو لایه مایع به وضوح مشخص می شود. واکنش لزوماً با کنترل سرم و آنتی ژن همراه است.
حسابداری . نتایج واکنش بسته به نوع آنتی ژن و آنتی بادی بعد از 5-10 دقیقه، 1-2 ساعت یا بعد از 20-24 ساعت در نظر گرفته می شود. مثبتدر واکنش در یک لوله آزمایش، یک رسوب به شکل یک حلقه سفید در مرز بین سرم و عصاره مورد مطالعه ظاهر می شود.

برنج. 4. واکنش بارش حلقه.

4. تعیین سمیت کورینه باکتریوم دیفتری در واکنش های بارش در آگار.

این واکنش رسوبی که مدت‌ها مورد استفاده قرار می‌گرفت، برای تعیین سمیت Corynebacterium diphtheria پیشنهاد شده بود، بر روی پپتون آگار فسفات در یک ظرف پتری انجام می‌شود. یک نوار از کاغذ صافی استریل مرطوب شده در امتداد آن در وسط قرار می گیرد. سرم آنتی سمی. پس از خشک شدن، محصولات انتخاب شده با پلاک هایی به قطر 10 میلی متر در فاصله 1 سانتی متری از لبه نوار کاشته می شوند. در یک فنجان می توانید از 3 تا 10 محصول بکارید که یکی از آنها، یعنی شاهد، باید سم زا باشد. محصولات در یک ترموستات قرار می گیرند.

حسابداریواکنش ها پس از 72-48-24 ساعت انجام می شود.اگر کشت سم زا باشد، خطوط رسوب در فاصله ای از نوار کاغذ ظاهر می شوند که با خطوط رسوب کشت شاهد منطبق است. شبیه " پیکان پیچک"، که به وضوح در نور عبوری قابل مشاهده هستند.

برنج. 5. واکنش بارش در آگار.

واکنش های ایمونولوژیک برای تشخیص آنتی بادی های خاص

5. صحنه سازی واکنش هماگلوتیناسیون غیر مستقیم (RNGA) شناسایی تیتر آنتی بادی های خاص در بیمار.

در واکنش هماگلوتیناسیون غیرفعال (RPHA) از گلبول های قرمز خون به عنوان ناقل استفاده می شود. گلبول های قرمز حاوی آنتی ژن در حضور آنتی بادی های خاص این آنتی ژن به هم می چسبند و رسوب می کنند. گلبول های قرمز حساس به آنتی ژن در RPGA به عنوان استفاده می شود تشخیص گلبول قرمزبرای تشخیص آنتی بادی ها (سروداگنوز).
صحنه سازی . یک سری رقت های سریالی سرم در چاهک های پلی استایرن تهیه می شود. 0.5 میلی لیتر سرم آشکارا مثبت را به چاه ماقبل آخر و 0.5 میلی لیتر محلول فیزیولوژیکی (شاهد) را به آخرین چاه اضافه کنید. سپس 0.1 میلی لیتر گلبول قرمز تشخیصی رقیق شده به تمام چاهک ها اضافه می شود، تکان داده می شود و به مدت 2 ساعت در ترموستات قرار می گیرد.
حسابداری . در حالت مثبت، گلبول‌های قرمز خون در انتهای سوراخ به شکل لایه‌ای از سلول‌ها با لبه‌های تاخورده یا دندانه‌دار (معکوس) می‌نشینند. چتر) ، در حالت منفی - در فرم مستقر شوید دکمه هایا یک حلقه

برنج. 6. نتیجه RNGA. تیتر آنتی بادی - 1:100.

6. صحنه سازی واکنش آگلوتیناسیون گستردهبه منظور شناسایی تیتر آنتی بادی های خاص در یک بیمار.

RA تمام عیار برای تشخیص سرمی در سرم بیماران ساخته می شود. همچنین در محلول ایزوتونیک کلرید سدیم از 1:50 - 1:100 تا 1:800 یا 1:1600 رقیق می شود. از آنجایی که تیترهای سرم پایین ممکن است حاوی آگلوتینین های طبیعی باشد که در افراد سالم یا بیماران با تشخیص دیگر یافت می شود. تیتر تشخیصی). Diagnosticum به عنوان یک آنتی ژن در این واکنش استفاده می شود - سوسپانسیون های شناخته شده، معمولا از باکتری های کشته شده، که کار با آنها بی خطر است.
قرار دادندواکنش به شرح زیر است. ابتدا 1 میلی لیتر محلول کلرید سدیم ایزوتونیک در لوله های آگلوتیناسیون ریخته می شود. 1 میلی لیتر سرم رقیق شده 1:100 به سرم اول اضافه می شود و پس از مخلوط کردن، 1 میلی لیتر به سرم دوم، از دوم به سوم و غیره منتقل می شود. 1-2 قطره از یک سوسپانسیون باکتریایی حاوی 3 میلیارد اجسام میکروبی در 1 میلی لیتر به رقت های دو برابری سرم (از 1:100 تا 1:1600 یا بیشتر) اضافه می شود. لوله ها را تکان داده و به مدت 2 ساعت در ترموستات با دمای 37 درجه سانتیگراد قرار می دهند و سپس به مدت 24 ساعت در دمای اتاق نگهداری می شوند.

حسابداریواکنش‌های آگلوتیناسیون دقیق با ارزیابی متوالی هر لوله آزمایش، از نمونه‌های کنترل، با تکان دادن ملایم انجام می‌شود. در لوله های کنترل نباید آگلوتیناسیون وجود داشته باشد. شدت واکنش آگلوتیناسیون با علائم زیر مشخص می شود: ++++ - آگلوتیناسیون کامل ( دانه های آگلوتینهدر یک مایع شفاف مطلق)؛ +++ - آگلوتیناسیون ناقص (تکه در یک مایع کمی مادی)؛ ++ - آگلوتیناسیون جزئی(فلکه ها به وضوح قابل مشاهده هستند، مایع کمی کدر است). + - آگلوتیناسیون ضعیف و مشکوک - مایع بسیار کدر است، تکه های موجود در آن به خوبی قابل تشخیص نیستند. - - عدم وجود آگلوتیناسیون (مایع یکنواخت کدر است).
پشت تیترسرم ها گرفته می شود آخرین نسل او، که در آن شدت آگلوتیناسیون حداقل دو مثبت (++) ارزیابی می شود.

برنج. 7. واکنش آگلوتیناسیون دقیق.

واکنش های ایمونوبیولوژیک، بر اساس برهمکنش یک آنتی ژن و یک آنتی بادی موجود در سرم ایمنی (طبق نظر ارلیش) یا یک آنتی ژن و یک سرم به طور خاص تحت تأثیر تحریک ایمن سازی تغییر یافته اند (طبق آخرین دیدگاه ها). مهم ترین واکنش ها عبارتند از: آگلوتیناسیون، رسوب، باکتریولیز، واکنش رد کمپلمان و واکنشی بر اساس عمل اپسونین ها. آگلوتیناسیون و رسوب زمانی اتفاق می‌افتد که یک آنتی ژن و آنتی‌بادی مربوطه به هم می‌رسند. برای انجام باکتریولیز، واکنش رد کمپلمان و غیره، علاوه بر آنتی ژن و آنتی بادی، مشارکت مکمل نیز لازم است. معنای واکنش های I. دو گونه است. با کمک آنها می توانید یک بیماری عفونی خاص را با تماس سرم بیمار با یک میکروب، عامل ایجاد کننده عفونت مشکوک (واکنش ویدال برای تب حصبه و تب پاراتیفوئید، واکنش رد مکمل برای تشخیص بیماری عفونی مشخص کنید. عفونت های مختلف). از سوی دیگر، با داشتن سرمی که در برابر یک عفونت خاص مصون است، می توان میکروبی را شناسایی کرد که ماهیت آن ناشناخته است. بارندگی نیز در شأن و منزلت اهمیت دارد. و پزشکی قانونی تمرین، به شخص اجازه می دهد تا گونه حیوانی را که ماده مورد مطالعه به آن تعلق دارد، تعیین کند.

واکنش های ایمونولوژیک (IR) به طور گسترده در تشخیص آزمایشگاهی عفونت ها استفاده می شود. آنها استفاده می شوند:
1) برای تشخیص آنتی بادی در سرم خون، به عنوان مثال. در تشخیص سرولوژیک بیماری های عفونی؛
2) برای تعیین نوع یا سرووار یک میکروارگانیسم، یعنی. شناسایی آنتی ژنی آن

IRتشکیل کمپلکس AG-AT شناسایی می شود. در این صورت جزء مجهول از معلوم مشخص می شود. IR ها با حساسیت بالا (اتصال AT به AG در مقادیر بسیار ناچیز) و ویژگی (تعیین شده توسط ویژگی های ساختاری مرکز فعال عوامل تعیین کننده AT و AG) متمایز می شوند. آنها با مراحل توسعه مشخص می شوند. مرحله اول خاص است، برای چشم نامرئی است و با اتصال گروه تعیین کننده AG با مرکز فعال AT مشخص می شود. در نتیجه یک کمپلکس AGATE تشکیل می شود که حلالیت خود را در محلول های ایزوتونیک از دست داده است. مرحله دوم غیراختصاصی است که با چشم قابل مشاهده است و ماهیت تظاهرات به وضعیت AG، AT و شرایط محیطی که در آن تعامل AG و AT رخ می دهد بستگی دارد.

هنگامی که آنتی بادی ها با آنتی ژن های بدن (باکتری ها، سلول های حیوانی، سلول های دیگر) تعامل می کنند، تغییرات قابل مشاهده با چشم غیر مسلح رخ می دهد (به عنوان مثال، تکه های آگلوتینه، لیز سلولی). اگر AG های محلول (به خوبی پراکنده) با AT ترکیب شوند، تشکیل کمپلکس ها در نتیجه جذب اولیه AG (AT) روی مواد سلولی (گلبول های قرمز، ذرات زغال سنگ و غیره) تشخیص داده می شود.

سرعت واکنش به موارد زیر بستگی دارد:
- نسبت بهینه AG و AT.
- درجه ویژگی AG و AT؛ - pH محیط (7.2-7.4)؛
- غلظت الکترولیت (0.85٪ کلرید سدیم).

بسته به وضعیت AG، AT و ویژگی های محیطی که در آن AG و AT برهم کنش دارند، واکنش های آگلوتیناسیون، بارش، لیز، مکمل، خنثی سازی و غیره متمایز می شوند.

IR ها به ساده (دو جزئی، فقط AG و AT درگیر هستند) و پیچیده (سه جزء و چند جزئی، AG، AT و سیستم واکنش دهنده درگیر هستند - گلبول های قرمز حساس، کشت سلولی، پوست حیوان حساس و غیره) تقسیم می شوند. ).

مفهوم مصونیت به معنای مصونیت بدن در برابر هر عامل خارجی ژنتیکی از جمله عوامل بیماری زاو سموم آنها (از لاتین immunitas - رهایی از چیزی).

هنگامی که ساختارهای ژنتیکی خارجی (آنتی ژن ها) وارد بدن می شوند، مکانیسم ها و عوامل مختلفی وارد بدن می شوند که این مواد خارجی را برای بدن شناسایی و خنثی می کنند.

سیستم اندام ها و بافت هایی که انجام می دهد واکنش های دفاعیدفاع بدن در برابر اختلال در پایداری محیط داخلی آن (هموستاز) سیستم ایمنی نامیده می شود.

علم ایمنی - ایمونولوژی واکنش های بدن به مواد خارجی از جمله میکروارگانیسم ها را مطالعه می کند. واکنش های بدن به بافت های خارجی (سازگاری) و تومورهای بدخیم؛ گروه های خونی ایمونولوژیک و غیره را تعیین می کند. پایه های ایمونولوژی با مشاهدات خودبخودی گذشتگان در مورد امکان محافظت مصنوعی از یک فرد در برابر یک بیماری عفونی پایه ریزی شد. مشاهدات افرادی که در کانون اپیدمی بودند به این نتیجه رسید که همه بیمار نمی شوند. بنابراین، کسانی که از این بیماری بهبود یافته اند، به طاعون مبتلا نمی شوند. سرخک معمولاً یک بار در دوران کودکی مبتلا می شود. کسانی که آبله گاوی داشته اند از آبله و غیره بیمار نمی شوند.

روش های شناخته شده ای از مردم باستان برای محافظت در برابر نیش مار با مالیدن گیاهان، زمین با آب، به بریدگی های روی پوست وجود دارد. زهر مار; از گله ها در برابر پریپنومونی دام محافظت کنید، همچنین با یک خنجر که قبلاً در ریه های گاو نر که از این بیماری مرده بود غوطه ور شده بود، بر روی پوست ایجاد کرد.

اولین واکسیناسیون مصنوعی برای جلوگیری از عفونت توسط E. Jenner (1876) ساخته شد. با این حال، تنها L. Pasteur قادر به اثبات علمی اصول حفاظت مصنوعی در برابر بیماری های عفونی بود. او ثابت کرد که عفونت با پاتوژن های ضعیف منجر به مصونیت بدن در برابر برخوردهای مکرر با این میکروارگانیسم ها می شود.

پاستور داروهایی ابداع کرد که در برابر سیاه زخم و هاری محافظت می کند.

ایمونولوژی بیشتر در آثار I.I. Mechnikov در مورد اهمیت ایمنی سلولی (فاگوسیتوز) و P. Ehrlich در مورد نقش عوامل هومورال (مایعات بدن) برای توسعه ایمنی توسعه یافت.

در حال حاضر، ایمونولوژی علمی است که محافظت در برابر بیماری های عفونی تنها یکی از پیوندهای آن است. او دلایل سازگاری و رد بافت در حین پیوند اعضا، مرگ جنین در شرایط درگیری رزوس، عوارض هنگام انتقال خون، حل مشکلات پزشکی قانونی و غیره را توضیح می دهد.

انواع اصلی ایمنی در نمودار ارائه شده است.

مصونیت ارثی (گونه ای).

مصونیت ارثی (گونه ای) بادوام ترین و کامل ترین نوع مصونیت است که ناشی از عوامل ارثی مقاومت (پایداری) است.

شناخته شده است که انسان از دیستمپر سگ و گاو، و حیوانات به وبا و دیفتری مبتلا نمی شوند. با این حال، ایمنی ارثی مطلق نیست: با ایجاد شرایط خاص و نامطلوب برای ماکرو ارگانیسم، می توان ایمنی آن را تغییر داد. برای مثال، گرمای بیش از حد، سرد شدن، کمبود ویتامین و عملکرد هورمون ها منجر به ایجاد بیماری می شود که معمولاً برای انسان یا حیوانات غیرعادی است. بنابراین پاستور با خنک کردن جوجه ها از طریق عفونت مصنوعی آنها را به سیاه زخم مبتلا کرد که در شرایط عادی بیمار نمی شوند.

مصونیت اکتسابی

مصونیت اکتسابی در فرد در طول زندگی شکل می گیرد، ارثی نیست.

مصونیت طبیعی. پس از آن ایمنی فعال تشکیل می شود بیماری گذشته(به آن پس عفونی می گویند). در بیشتر موارد، برای مدت طولانی باقی می ماند: پس از سرخک، آبله مرغان، طاعون، و غیره. اما، پس از برخی از بیماری ها، مدت زمان مصونیت کوتاه است و از یک سال بیشتر نمی شود (آنفولانزا، اسهال خونی و غیره). گاهی اوقات ایمنی فعال طبیعی بدون بیماری قابل مشاهده ایجاد می شود. در نتیجه یک عفونت پنهان (نهفته) یا عفونت مکرر ایجاد می شود در دوزهای کوچکپاتوژن هایی که باعث بیماری واضح نمی شوند (ایمن سازی کسری، خانگی).

ایمنی غیرفعال ایمنی نوزادان (جفتی) است که توسط آنها از طریق جفت در طی انجام می شود. رشد داخل رحمی. نوزادان تازه متولد شده نیز می توانند از شیر مادرشان مصونیت پیدا کنند. این نوع ایمنی کوتاه مدت است و معمولاً در 6-8 ماهگی از بین می رود. با این حال، اهمیت ایمنی غیرفعال طبیعی بسیار زیاد است - ایمنی را فراهم می کند نوزادانبه بیماری های عفونی

مصونیت مصنوعی. فرد در نتیجه ایمن سازی (واکسیناسیون) ایمنی فعال به دست می آورد. این نوع ایمنی پس از وارد شدن به بدن باکتری ها، سموم آنها، ویروس ها، ضعیف یا کشته شدن به روش های مختلف (واکسیناسیون علیه سیاه سرفه، دیفتری، آبله) ایجاد می شود.

در همان زمان، بازسازی فعال در بدن اتفاق می افتد، با هدف تشکیل موادی که تأثیر مضری بر پاتوژن و سموم آن (آنتی بادی) دارند. همچنین تغییری در خواص سلول هایی که میکروارگانیسم ها و محصولات متابولیکی آنها را از بین می برند، وجود دارد. ایجاد ایمنی فعال به تدریج طی 3-4 هفته رخ می دهد و برای مدت نسبتا طولانی - از 1 سال تا 3-5 سال - ادامه می یابد.

ایمنی غیرفعال با وارد کردن آنتی بادی های آماده به بدن ایجاد می شود. این نوع ایمنی بلافاصله پس از معرفی آنتی بادی ها (سرم ها و ایمونوگلوبولین ها) ایجاد می شود، اما تنها 15-20 روز طول می کشد و پس از آن آنتی بادی ها از بین می روند و از بدن دفع می شوند.

مفهوم "مصونیت محلی" توسط A. M. Bezredka معرفی شد. او معتقد بود که تک تک سلول ها و بافت های بدن دارای حساسیت خاصی هستند. با ایمن سازی آنها مانعی برای نفوذ عوامل عفونی ایجاد می کنند. در حال حاضر، وحدت مصونیت محلی و عمومی ثابت شده است. اما اهمیت ایمنی بافت ها و اندام های فردی در برابر میکروارگانیسم ها غیرقابل انکار است.

علاوه بر تقسیم فوق ایمنی بر اساس منشاء، اشکال ایمنی با هدف آنتی ژن های مختلف وجود دارد.

ایمنی ضد میکروبیدر بیماری های ناشی از میکروارگانیسم های مختلف یا با معرفی واکسن های بدن (از میکروارگانیسم های زنده ضعیف شده یا کشته شده) ایجاد می شود.

ایمنی ضد سمیتولید شده در رابطه با سموم باکتریایی - سموم.

ایمنی ضد ویروسیپس از بیماری های ویروسی ایجاد می شود. این نوع ایمنی عمدتاً طولانی مدت و پایدار است (سرخک، آبله مرغانو غیره.). ایمنی ضد ویروسی نیز در طول ایمن سازی با واکسن های ویروسی ایجاد می شود.

علاوه بر این، ایمنی را می توان بسته به دوره آزاد شدن بدن از پاتوژن تقسیم کرد.

مصونیت استریل. بیشتر پاتوژن ها با بهبودی فرد از بدن ناپدید می شوند. این نوع مصونیت استریل (سرخک، آبله و غیره) نامیده می شود.

ایمنی غیر استریل. حساسیت به عامل عفونی تنها در طول اقامت آن در بدن میزبان ادامه می یابد. چنین ایمنی غیر استریل یا عفونی نامیده می شود. این نوع ایمنی در سل، سیفلیس و برخی عفونت های دیگر مشاهده می شود.

کنترل سوالات

1. مصونیت چیست؟

2. چه اشکالی از مصونیت را می شناسید؟

مصونیت انسان در برابر بیماری های عفونی به دلیل عملکرد ترکیبی عوامل حفاظتی غیر اختصاصی و خاص است.

غیر اختصاصی خواص ذاتی بدن هستند که به تخریب طیف گسترده ای از میکروارگانیسم ها در سطح بدن انسان و در حفره های بدن کمک می کند.

ایجاد عوامل محافظتی خاص پس از تماس بدن با پاتوژن ها یا سموم اتفاق می افتد. عمل این عوامل فقط علیه این پاتوژن ها یا سموم آنها انجام می شود.

عوامل غیر اختصاصی دفاعی بدن

عوامل مکانیکی، شیمیایی و بیولوژیکی وجود دارد که از بدن در برابر اثرات مضر میکروارگانیسم های مختلف محافظت می کند.

چرم. پوست سالم مانعی در برابر نفوذ میکروارگانیسم ها است. در عین حال اهمیت دارند عوامل مکانیکی: رد اپیتلیال و سباسه و غدد عرقکه به حذف میکروارگانیسم ها از پوست کمک می کند.

نقش عوامل شیمیایی محافظ نیز توسط ترشحات غدد پوست (چربی و عرق) ایفا می شود. آنها حاوی اسیدهای چرب و لاکتیک هستند که دارای اثر باکتری کش (کشنده باکتری) هستند.

عوامل حفاظتی بیولوژیکی به دلیل اثرات مضر آن است میکرو فلور طبیعیپوست برای میکروارگانیسم های بیماری زا

غشاهای مخاطی اندام های مختلفیکی از موانع نفوذ میکروارگانیسم ها هستند. در دستگاه تنفسی، حفاظت مکانیکی توسط اپیتلیوم مژکدار انجام می شود. حرکت مژک های اپیتلیوم فوقانی دستگاه تنفسیبه طور مداوم یک فیلم از مخاط همراه با میکروارگانیسم های مختلف به سمت دهانه های طبیعی حرکت می کند: حفره دهانو مجرای بینی موهای موجود در مجرای بینی نیز همین تأثیر را روی باکتری ها دارند. سرفه و عطسه به حذف میکروارگانیسم ها و جلوگیری از آسپیراسیون آنها (استنشاق) کمک می کند.

اشک، بزاق، شیر مادر و سایر مایعات بدن حاوی لیزوزیم هستند. اثر مخرب (شیمیایی) روی میکروارگانیسم ها دارد. همچنین بر میکروارگانیسم ها تأثیر می گذارد محیط اسیدیمحتویات معده

میکرو فلور طبیعی غشاهای مخاطی، به عنوان یک عامل دفاعی بیولوژیکی، یک آنتاگونیست است میکروارگانیسم های بیماری زا.

کنترل سوالات

1. عوامل حفاظتی غیر اختصاصی چیست؟

2. چه عواملی مانع از نفوذ میکروارگانیسم های بیماری زا از طریق پوست و غشاهای مخاطی می شود؟

التهاب- واکنش یک ماکرو ارگانیسم به ذرات خارجی که به محیط داخلی آن نفوذ می کنند. یکی از علل التهاب، ورود عوامل عفونی به بدن است. توسعه التهاب منجر به تخریب میکروارگانیسم ها یا آزاد شدن از آنها می شود.

التهاب با اختلال در گردش خون و لنف در ناحیه آسیب دیده مشخص می شود. با تب، تورم، قرمزی و درد همراه است.

عوامل سلولی حفاظت غیر اختصاصی

فاگوسیتوز

یکی از مکانیسم های اصلی التهاب فاگوسیتوز است - فرآیند جذب باکتری.

پدیده فاگوسیتوز اولین بار توسط I.I. Mechnikov توصیف شد. او مطالعه فاگوسیتوز را از یک آمیب تک سلولی آغاز کرد، که فاگوسیتوز روشی برای جذب غذا است. I.I. Mechnikov با ردیابی این فرآیند در مراحل مختلف رشد دنیای حیوانات، آن را با کشف سلول های انسانی تخصصی تکمیل کرد که با کمک آنها باکتری ها از بین می روند، سلول های مرده دوباره جذب می شوند، کانون های خونریزی و غیره. دکترین فاگوسیتوز ایجاد شد که امروزه نیز از اهمیت بالایی برخوردار است.

سلول های مختلف بدن (لکوسیت های خون، سلول های اندوتلیال رگ های خونی) فعالیت فاگوسیتی دارند. این فعالیت در لکوسیت های متحرک چند شکلی، مونوسیت های خون و ماکروفاژهای بافتی و به میزان کمتری در سلول ها مشخص است. مغز استخوان. تمام سلول های فاگوسیتی تک هسته ای (و پیش سازهای مغز استخوان آنها) در سیستم فاگوسیت تک هسته ای (MPS) متحد شده اند.

سلول های فاگوسیتی دارای لیزوزوم هایی هستند که حاوی بیش از 25 آنزیم هیدرولیتیک مختلف و پروتئین هستند که خاصیت ضد باکتریایی دارند.

مراحل فاگوسیتوز. مرحله 1 - نزدیک شدن فاگوسیت به جسم به دلیل تأثیر شیمیایی دومی. این حرکت کموتاکسی مثبت (به سمت جسم) نامیده می شود.

مرحله 2 - چسبندگی میکروارگانیسم ها به فاگوسیت ها.

مرحله 3 - جذب میکروارگانیسم ها توسط سلول، تشکیل فاگوزوم.

مرحله 4 - تشکیل فاگولیزوزوم که آنزیم ها و پروتئین های باکتری کش را دریافت می کند، مرگ و هضم پاتوژن.

فرآیندی که با مرگ میکروب های فاگوسیتوز شده به پایان می رسد، فاگوسیتوز کامل نامیده می شود.

با این حال، برخی از میکروارگانیسم ها، در حالی که در داخل فاگوسیت ها هستند، نمی میرند، و حتی گاهی اوقات در آنها تکثیر می شوند. اینها گنوکوک، مایکوباکتریوم توبرکلوزیس و بروسلا هستند. این پدیده فاگوسیتوز ناقص نامیده می شود. در این حالت فاگوسیت ها می میرند.

مثل دیگران عملکردهای فیزیولوژیکیفاگوسیتوز به وضعیت بدن بستگی دارد - نقش تنظیمی سیستم عصبی مرکزی، تغذیه، سن.

فعالیت فاگوسیتی لکوسیت ها با تعداد زیاد و اغلب تغییر می کند بیماری های غیر مسری. با تعیین تعدادی از شاخص های فاگوسیتوز، می توان سیر بیماری را تعیین کرد - بهبود یا بدتر شدن وضعیت بیمار، اثربخشی درمان و غیره.

برای نرخ حالت عملکردیفعالیت جذب فاگوسیت ها اغلب با دو آزمایش تعیین می شود: 1) شاخص فاگوسیتی - درصد سلول های فاگوسیتی (تعداد لکوسیت ها با میکروب های جذب شده از 100 مشاهده شده). 2) عدد فاگوسیتی - میانگین تعداد میکروب ها یا سایر اشیاء فاگوسیتوز جذب شده توسط یک لکوسیت.

قابلیت باکتری کشی فاگوسیت ها با تعداد لیزوزوم ها، فعالیت آنزیم های داخل سلولی و روش های دیگر تعیین می شود.

فعالیت فاگوسیتوز با وجود آنتی بادی ها - اپسونین ها - در سرم خون همراه است. این آنتی بادی ها فاگوسیتوز را تقویت می کنند و سطح سلول را برای جذب توسط فاگوسیت آماده می کنند.

فعالیت فاگوسیتوز در تا اندازه زیادیایمنی بدن در برابر یک پاتوژن خاص را تعیین می کند. در برخی بیماری ها فاگوسیتوز عامل اصلی محافظتی و در برخی دیگر عامل کمکی است. با این حال، در همه موارد، فقدان توانایی فاگوسیتوز سلول ها به شدت روند و پیش آگهی بیماری را بدتر می کند.

واکنش سلولی

توسعه فرآیند عفونیو تشکیل ایمنی کاملاً به حساسیت اولیه سلول ها به پاتوژن بستگی دارد. مصونیت گونه های ارثی نمونه ای از عدم حساسیت سلول های یک گونه جانوری به میکروارگانیسم هایی است که برای سایرین بیماری زا هستند. مکانیسم این پدیده به خوبی درک نشده است. مشخص است که واکنش سلولی با افزایش سن و تحت تأثیر تغییر می کند عوامل مختلف(فیزیکی، شیمیایی، بیولوژیکی).

کنترل سوالات

1. فاگوسیتوز چیست؟

2. چه مراحلی از فاگوسیتوز را می شناسید؟

3. فاگوسیتوز کامل و ناقص چیست؟

عوامل اخلاقی حفاظت غیر اختصاصی

علاوه بر فاگوسیت ها، خون حاوی مواد غیر اختصاصی محلول است که بر میکروارگانیسم ها اثر مخربی دارند. اینها عبارتند از مکمل، پروپردین، بتا لیزین، ایکس لیزین، اریترین، لوکین، پلاکین، لیزوزیم و غیره.

متمم (از لاتین complementum - اضافه) است سیستم پیچیدهبخش های پروتئینی خون که توانایی لیز کردن میکروارگانیسم ها و سایر سلول های خارجی مانند گلبول های قرمز را دارند. اجزای مختلفی از مکمل وجود دارد: C 1، C 2، C 3 و غیره. کمپلمان در دمای 55 درجه سانتیگراد به مدت 30 دقیقه از بین می رود. این خاصیت حرارت پذیری نامیده می شود. همچنین با تکان دادن، تحت تأثیر اشعه ماوراء بنفش و غیره از بین می رود. علاوه بر سرم خون، مکمل در مایعات مختلف بدن و در ترشحات التهابی، اما در اتاق قدامی چشم و مایع مغزی نخاعی وجود ندارد.

پروپردین (از لاتین properde - آماده کردن) گروهی از اجزای سرم خون طبیعی است که مکمل را در حضور یون های منیزیم فعال می کند. شبیه آنزیم ها است و نقش مهمی در مقاومت بدن در برابر عفونت دارد. کاهش سطح پروپردین در سرم خون نشان دهنده فعالیت ناکافی فرآیندهای ایمنی است.

بتا لیزین ها مواد مقاوم در برابر حرارت (مقاوم در برابر دما) در سرم خون انسان هستند که اثر ضد میکروبی دارند، عمدتاً در برابر باکتری های گرم مثبت. در دمای 63 درجه سانتیگراد و تحت تأثیر اشعه ماوراء بنفش تخریب می شود.

X-lysine یک ماده پایدار در برابر حرارت است که از خون بیماران مبتلا به تب بالا جدا شده است. این توانایی لیز باکتری ها، عمدتا گرم منفی، بدون مشارکت مکمل را دارد. تا دمای 70 تا 100 درجه سانتی گراد را تحمل می کند.

اریترین از گلبول های قرمز حیوانی جدا می شود. این یک اثر باکتریواستاتیک بر پاتوژن های دیفتری و برخی میکروارگانیسم های دیگر دارد.

لوکین ها مواد باکتری کش جدا شده از لکوسیت ها هستند. پایدار در حرارت، در دمای 80-75 درجه سانتیگراد از بین می رود. در مقادیر بسیار کم در خون یافت می شود.

پلاکین ها موادی شبیه به لوکین های جدا شده از پلاکت ها هستند.

لیزوزیم آنزیمی است که غشای سلول های میکروبی را از بین می برد. در اشک، بزاق و مایعات خون یافت می شود. بهبود سریع زخم ملتحمه چشم، غشاهای مخاطی حفره دهان و بینی عمدتاً به دلیل وجود لیزوزیم است.

اجزای تشکیل دهنده ادرار، مایع پروستات و عصاره های بافت های مختلف نیز خاصیت باکتری کشی دارند. سرم معمولی حاوی مقادیر کمی اینترفرون است.

کنترل سوالات

1. عوامل هومورال حفاظت غیر اختصاصی چیست؟

2. چه عوامل هومورال حفاظت غیر اختصاصی را می شناسید؟

عوامل دفاعی خاص بدن (ایمنی)

اجزای ذکر شده در بالا کل زرادخانه عوامل حفاظت هومورال را خسته نمی کنند. اصلی ترین آنها آنتی بادی های خاص - ایمونوگلوبولین ها هستند که با ورود عوامل خارجی - آنتی ژن ها به بدن تشکیل می شوند.

آنتی ژن ها

آنتی ژن ها موادی هستند که از نظر ژنتیکی برای بدن بیگانه هستند (پروتئین ها، نوکلئوپروتئین ها، پلی ساکاریدها و غیره) که بدن با ایجاد واکنش های ایمنی خاص به معرفی آنها پاسخ می دهد. یکی از این واکنش ها تشکیل آنتی بادی است.

آنتی ژن ها دو ویژگی اصلی دارند: 1) ایمنی زایی، یعنی توانایی القای تشکیل آنتی بادی ها و لنفوسیت های ایمنی. 2) توانایی وارد شدن به یک تعامل خاص با آنتی بادی ها و لنفوسیت های ایمنی (حساس شده) که خود را به شکل واکنش های ایمونولوژیک (خنثی سازی، آگلوتیناسیون، لیز و غیره) نشان می دهد. آنتی ژن هایی که هر دو ویژگی را دارند کامل نامیده می شوند. اینها عبارتند از پروتئین های خارجی، سرم ها، عناصر سلولی، سموم، باکتری ها، ویروس ها.

موادی که باعث واکنش های ایمونولوژیک، به ویژه تولید آنتی بادی نمی شوند، اما وارد یک تعامل خاص با آنتی بادی های آماده می شوند، هاپتن ها - آنتی ژن های معیوب نامیده می شوند. هاپتن ها پس از ترکیب با مواد مولکولی بزرگ - پروتئین ها، پلی ساکاریدها، خواص آنتی ژن های کامل را به دست می آورند.

شرایط تعیین کننده خواص آنتی ژنی مواد مختلف، عبارتند از: خارجی بودن، درشت مولکولی بودن، حالت کلوئیدی، حلالیت. آنتی ژنی زمانی خود را نشان می دهد که یک ماده وارد محیط داخلی بدن می شود، جایی که با سلول های سیستم ایمنی مواجه می شود.

ویژگی آنتی ژن ها، توانایی آنها برای ترکیب تنها با آنتی بادی مربوطه، یک پدیده بیولوژیکی منحصر به فرد است. این زیربنای مکانیسم حفظ ثبات محیط داخلی بدن است. این ثبات توسط سیستم ایمنی تضمین می شود، که مواد ژنتیکی خارجی (از جمله میکروارگانیسم ها و سموم آنها) موجود در محیط داخلی خود را شناسایی و از بین می برد. سیستم ایمنی انسان تحت نظارت دائمی ایمونولوژیک است. زمانی که سلول‌ها فقط با یک ژن (سرطان) متفاوت هستند، می‌تواند خارجی بودن را تشخیص دهد.

ویژگی یک ویژگی ساختاری مواد است که آنتی ژن ها با یکدیگر متفاوت هستند. این توسط عامل تعیین کننده آنتی ژن، یعنی بخش کوچکی از مولکول آنتی ژن، که با آنتی بادی ترکیب می شود، تعیین می شود. تعداد چنین مکان‌هایی (گروه‌بندی) برای آنتی‌ژن‌های مختلف متفاوت است و تعداد مولکول‌های آنتی‌بادی را تعیین می‌کند که آنتی‌ژن می‌تواند با آن‌ها متصل شود (والانس).

توانایی آنتی ژن ها برای ترکیب فقط با آنتی بادی هایی که در پاسخ به فعال شدن سیستم ایمنی توسط یک آنتی ژن معین (ویژگی) ایجاد می شوند در عمل استفاده می شود: 1) تشخیص بیماری های عفونی (تعیین آنتی ژن های خاص یک پاتوژن یا آنتی بادی های خاص در سرم خون بیمار)؛ 2) پیشگیری و درمان بیماران مبتلا به بیماری های عفونی (ایجاد ایمنی در برابر میکروب ها یا سموم خاص، خنثی سازی خاص سموم پاتوژن های تعدادی از بیماری ها در طول ایمونوتراپی).

سیستم ایمنی به وضوح بین آنتی ژن های "خود" و "خارجی" تفاوت قائل می شود و فقط به دومی واکنش نشان می دهد. با این حال، واکنش به آنتی ژن های خود بدن - اتوآنتی ژن ها و ظهور آنتی بادی ها علیه آنها - اتوآنتی بادی ها امکان پذیر است. اتوآنتی ژن ها به آنتی ژن های "مانعی" تبدیل می شوند - سلول ها، موادی که در طول زندگی فرد با سیستم ایمنی تماس پیدا نمی کنند (عدسی چشم، اسپرم، تیروئیدو غیره)، اما زمانی که با آن در تماس باشید صدمات مختلف، معمولاً جذب خون می شود. و از آنجایی که در طول رشد بدن این آنتی ژن ها به عنوان "خود" شناخته نشدند، تحمل طبیعی (عدم پاسخ ایمنی خاص) تشکیل نشد، یعنی سلول های سیستم ایمنی در بدن باقی ماندند که قادر به پاسخ ایمنی به این آنتی ژن های خود هستند.

در نتیجه ظهور اتوآنتی بادی ها، بیماری های خودایمنی می توانند در نتیجه ایجاد شوند: 1) اثر سیتوتوکسیک مستقیم اتوآنتی بادی ها بر روی سلول های اندام های مربوطه (به عنوان مثال، گواتر هاشیموتو - آسیب). غده تیروئید) 2) اثر غیر مستقیم کمپلکس های اتوآنتی ژن-خودآنتی بادی که در اندام آسیب دیده رسوب می کنند و باعث آسیب آن می شوند (به عنوان مثال، لوپوس اریتماتوز سیستمیک، آرتریت روماتوئید).

آنتی ژن های میکروارگانیسم ها. یک سلول میکروبی حاوی تعداد زیادی آنتی ژن است که مکان های متفاوتی در سلول دارند و اهمیت متفاوتی برای توسعه فرآیند عفونی دارند. گروه های مختلف میکروارگانیسم ها ترکیبات آنتی ژنی متفاوتی دارند. در باکتری های روده، آنتی ژن های O-، K- و H به خوبی مورد مطالعه قرار گرفته اند.

آنتی ژن O با دیواره سلولی سلول میکروبی مرتبط است. معمولاً "سوماتیک" نامیده می شد، زیرا اعتقاد بر این بود که این آنتی ژن در بدن (سوما) سلول وجود دارد. آنتی ژن O باکتری های گرم منفی- کمپلکس لیپوپلی ساکارید-پروتئین (اندوتوکسین). در برابر حرارت پایدار است و هنگام درمان با الکل و فرمالدئید فرو نمی ریزد. از یک هسته اصلی و زنجیره های پلی ساکارید جانبی تشکیل شده است. ویژگی آنتی ژن های O به ساختار و ترکیب این زنجیره ها بستگی دارد.

آنتی ژن های K (کپسولی) با کپسول و دیواره سلولی سلول میکروبی مرتبط هستند. به آنها پوسته نیز می گویند. آنتی ژن های K در سطحی تر از آنتی ژن های O قرار دارند. آنها عمدتاً پلی ساکاریدهای اسیدی هستند. انواع مختلفی از آنتی ژن های K وجود دارد: A، B، L، و غیره. این آنتی ژن ها از نظر مقاومت در برابر تأثیرات دما با یکدیگر متفاوت هستند. آنتی ژن A پایدارترین، L - کمترین است. آنتی ژن های سطحی همچنین شامل آنتی ژن Vi است که در پاتوژن های تب تیفوئید و برخی دیگر از باکتری های روده یافت می شود. در دمای 60 درجه سانتی گراد از بین می رود. وجود آنتی ژن Vi با حدت میکروارگانیسم ها مرتبط است.

آنتی ژن H (تاژک دار) در تاژک های باکتری ها قرار دارند. آنها یک پروتئین خاص - فلاژلین هستند. هنگام گرم شدن از بین می رود. هنگامی که با فرمالین درمان می شوند، خواص خود را حفظ می کنند (شکل 70 را ببینید).

آنتی ژن محافظ (محافظت کننده) (از لاتین محافظت - حفاظت، محافظت) توسط پاتوژن ها در بدن بیمار تشکیل می شود. عوامل ایجاد کننده سیاه زخم، طاعون و بروسلوز قادر به تشکیل یک آنتی ژن محافظ هستند. در ترشحات بافت های آسیب دیده یافت می شود.

یکی از روش های تشخیص آزمایشگاهی بیماری های عفونی، شناسایی آنتی ژن در مواد پاتولوژیک است. روش های مختلفی برای تشخیص آنتی ژن ها استفاده می شود. واکنش های ایمنی(پایین را ببینید).

در طول رشد، رشد و تولید مثل میکروارگانیسم ها، آنتی ژن های آنها ممکن است تغییر کند. از بین رفتن برخی از اجزای آنتی ژنی که بیشتر در سطحی قرار دارند وجود دارد. این پدیده تفکیک نامیده می شود. نمونه ای از این تفکیک "S" - "R" است.

کنترل سوالات

1. آنتی ژن چیست؟

2. خواص اصلی آنتی ژن ها چیست؟

3. چه آنتی ژن های سلول میکروبی را می شناسید؟

آنتی بادی ها

آنتی بادی ها پروتئین های خاص خون هستند - ایمونوگلوبولین ها که در پاسخ به معرفی یک آنتی ژن تشکیل می شوند و قادر به واکنش خاص با آن هستند.

دو نوع پروتئین در سرم انسان وجود دارد: آلبومین ها و گلوبولین ها. آنتی‌بادی‌ها عمدتاً با گلوبولین‌هایی مرتبط هستند که توسط آنتی‌ژن اصلاح می‌شوند و ایمونوگلوبولین‌ها (Ig) نامیده می‌شوند. گلوبولین ها ناهمگن هستند. بر اساس سرعت حرکت در ژل هنگامی که جریان الکتریکی از آن عبور می کند به سه بخش α، β، γ تقسیم می شوند. آنتی بادی ها عمدتاً به γ-گلوبولین ها تعلق دارند. این بخش از گلوبولین ها بیشترین سرعت حرکت را در میدان الکتریکی دارند.

ایمونوگلوبولین ها با وزن مولکولی، سرعت رسوب در طول اولتراسانتریفیوژ مشخص می شوند (سانتریفیوژ با بسیار سرعت بالا) و غیره تفاوت در این خواص باعث شد که ایمونوگلوبولین ها به 5 کلاس تقسیم شوند: IgG، IgM، IgA، IgE، IgD. همه آنها در ایجاد ایمنی در برابر بیماری های عفونی نقش دارند.

ایمونوگلوبولین های G (IgG) حدود 75 درصد از کل ایمونوگلوبولین های انسانی را تشکیل می دهند. آنها بیشتر در توسعه ایمنی فعال هستند. تنها ایمونوگلوبولین ها به جفت نفوذ می کنند و ایمنی غیرفعال را برای جنین ایجاد می کنند. آنها دارای وزن مولکولی کم و سرعت رسوب در طول اولتراسانتریفیوژ هستند.

ایمونوگلوبولین M (IgM) در جنین تشکیل می شود و اولین چیزی است که پس از عفونت یا ایمن سازی ظاهر می شود. این کلاس شامل آنتی بادی های انسانی "عادی" است که در طول زندگی او بدون تظاهرات قابل مشاهده عفونت یا در طول عفونت های مکرر خانگی تشکیل می شود. آنها دارای وزن مولکولی بالا و سرعت رسوب در طول اولتراسانتریفیوژ هستند.

ایمونوگلوبولین های A (IgA) توانایی نفوذ به ترشحات مخاطی (آغوز، بزاق، محتویات برونش و غیره) را دارند. آنها در محافظت از غشاهای مخاطی دستگاه تنفسی و گوارشی در برابر میکروارگانیسم ها نقش دارند. از نظر وزن مولکولی و سرعت رسوب در طول اولتراسانتریفیوژ، آنها نزدیک به IgG هستند.

ایمونوگلوبولین E (IgE) یا ریجین ها مسئول واکنش های آلرژیک هستند (به فصل 13 مراجعه کنید). در توسعه ایمنی موضعی نقش داشته باشد.

ایمونوگلوبولین D (IgD). به مقدار کم در سرم خون یافت می شود. به اندازه کافی مطالعه نشده است.

ساختار ایمونوگلوبولین ها. مولکول های ایمونوگلوبولین های همه کلاس ها به همین ترتیب ساخته می شوند. ساده ترین ساختار مولکول های IgG این است: دو جفت زنجیره پلی پپتیدی که توسط یک پیوند دی سولفید به هم متصل شده اند (شکل 31). هر جفت از یک زنجیره سبک و سنگین تشکیل شده است که وزن مولکولی آنها متفاوت است. هر زنجیره دارای بخش های ثابتی است که از نظر ژنتیکی از پیش تعیین شده اند و بخش های متغیری که تحت تأثیر آنتی ژن تشکیل می شوند. این مناطق خاص آنتی بادی، مراکز فعال نامیده می شوند. آنها با آنتی ژنی که باعث تشکیل آنتی بادی می شود، تعامل دارند. تعداد مراکز فعال در یک مولکول آنتی بادی ظرفیت را تعیین می کند - تعداد مولکول های آنتی ژنی که آنتی بادی می تواند با آنها تماس بگیرد. IgG و IgA دو ظرفیتی و IgM پنج ظرفیتی هستند.

ایمونوژنز- تشکیل آنتی بادی به دوز، دفعات و روش تجویز آنتی ژن بستگی دارد. پاسخ ایمنی اولیه به آنتی ژن دو مرحله دارد: القایی - از لحظه تجویز آنتی ژن تا ظهور سلول های سازنده آنتی بادی (تا 20 ساعت) و تولیدی که در پایان روز اول پس از تجویز آنتی ژن شروع می شود. و با ظهور آنتی بادی در سرم خون مشخص می شود. مقدار آنتی بادی ها به تدریج افزایش می یابد (در روز چهارم)، در روز 7-10 به حداکثر می رسد و در پایان ماه اول کاهش می یابد.

یک پاسخ ایمنی ثانویه زمانی ایجاد می شود که آنتی ژن دوباره وارد شود. در عین حال، فاز القایی بسیار کوتاهتر است - آنتی بادی ها سریعتر و شدیدتر تولید می شوند.

کنترل سوالات

1. آنتی بادی ها چیست؟

2. چه دسته ای از ایمونوگلوبولین ها را می شناسید؟

مکانیسم های سلولی پاسخ ایمنی

سلول های لنفوئیدی بدن عملکرد اصلی را در توسعه ایمنی انجام می دهند - ایمنی، نه تنها در برابر میکروارگانیسم ها، بلکه همچنین برای تمام سلول های ژنتیکی خارجی، به عنوان مثال در حین پیوند بافت. سلول های لنفوئیدی توانایی تشخیص «خود» از «خارجی» و حذف «خارجی» (از بین بردن) را دارند.

جد تمام سلول های سیستم ایمنی خون ساز است سلول بنیادی. پس از آن، دو نوع لنفوسیت ایجاد می شود: T و B (وابسته به تیموس و وابسته به بورس). سلول ها این نام ها را در ارتباط با منشاء خود دریافت کردند. سلول های T در تیموس رشد می کنند (تیموس، یا غده تیموس) و تحت تأثیر مواد ترشح شده توسط تیموس در بافت لنفاوی محیطی.

نام لنفوسیت های B (وابسته به بورس) از کلمه "بورسا" - کیسه گرفته شده است. پرندگان سلول هایی شبیه به لنفوسیت های B انسان در بورس فابریسیوس ایجاد می کنند. اگرچه هیچ عضوی شبیه بورس فابریسیوس در انسان یافت نشده است، اما این نام با این بورس مرتبط است.

هنگامی که لنفوسیت های B از یک سلول بنیادی رشد می کنند، چندین مرحله را طی می کنند و به لنفوسیت هایی تبدیل می شوند که قادر به تشکیل هستند. سلول های پلاسما. سلول های پلاسما، به نوبه خود، آنتی بادی ها را تشکیل می دهند و در سطح آنها ایمونوگلوبولین های سه کلاس وجود دارد: IgG، IgM و IgA (شکل 32).

پاسخ ایمنی به شکل تولید آنتی بادی های خاص به شرح زیر است: یک آنتی ژن خارجی که به بدن نفوذ کرده است، در درجه اول توسط ماکروفاژها فاگوسیتوز می شود. ماکروفاژها، با پردازش و تمرکز آنتی ژن روی سطح خود، اطلاعات مربوط به آن را به سلول های T منتقل می کنند، که شروع به تقسیم، "بلوغ" و ترشح یک فاکتور هومورال می کنند که شامل لنفوسیت های B در تولید آنتی بادی است. دومی همچنین "بالغ" می شود و به سلول های پلاسما تبدیل می شود که آنتی بادی هایی با ویژگی خاص را سنتز می کنند.

بنابراین، با تلاش مشترک، ماکروفاژها، لنفوسیت های T و B عملکرد ایمنی بدن را انجام می دهند - محافظت از هر چیزی که از نظر ژنتیکی خارجی است، از جمله پاتوژن های بیماری های عفونی. حفاظت با کمک آنتی بادی ها به گونه ای انجام می شود که ایمونوگلوبولین های سنتز شده برای یک آنتی ژن معین، با ترکیب آن (آنتی ژن)، آن را آماده می کنند، آن را به تخریب و خنثی سازی با مکانیسم های مختلف طبیعی حساس می کنند: فاگوسیت ها، مکمل و غیره.

کنترل سوالات

1. نقش ماکروفاژها در پاسخ ایمنی چیست؟

2. نقش لنفوسیت های T در پاسخ ایمنی چیست؟

3. نقش لنفوسیت های B در پاسخ ایمنی چیست؟

نظریه های ایمنی. اهمیت آنتی بادی ها در ایجاد ایمنی غیرقابل انکار است. مکانیسم تشکیل آنها چیست؟ این موضوع از دیرباز محل بحث و گفتگو بوده است.

چندین نظریه در مورد تشکیل آنتی بادی ایجاد شده است که می توان آنها را به دو گروه تقسیم کرد: انتخابی (انتخاب - انتخاب) و آموزنده (آموزش - دستور دادن، راهنما).

تئوری های انتخابی وجود آنتی بادی های آماده برای هر آنتی ژن یا سلول هایی را که قادر به سنتز این آنتی بادی ها هستند در بدن فرض می کنند.

بنابراین، ارلیچ (1898) فرض کرد که سلول دارای "گیرنده" (آنتی بادی) آماده ای است که به آنتی ژن متصل می شود. پس از ترکیب با آنتی ژن، آنتی بادی ها حتی در مقادیر بیشتری تشکیل می شوند.

همین نظر توسط خالقان دیگر نظریه های انتخابی: N. Erne (1955) و F. Burnet (1957) مشترک بود. آنها استدلال کردند که در حال حاضر در بدن جنین، و سپس در بدن بالغ، سلول هایی وجود دارد که قادر به تعامل با هر آنتی ژنی هستند، اما تحت تأثیر آنتی ژن های خاص، سلول های خاصی آنتی بادی های "ضروری" را تولید می کنند.

نظریه های آموزشی [Gaurowitz F., Pauling L., Landsteiner K., 1937-1940] آنتی ژن را به عنوان یک "ماتریکس" در نظر می گیرند، مهری که گروه های خاصی از مولکول های آنتی بادی بر روی آن تشکیل می شوند.

با این حال، این نظریه ها همه پدیده های مصونیت را توضیح ندادند و در حال حاضر پذیرفته شده ترین آنها نظریه انتخاب کلونال F. Burnet (1964) است. بر اساس این نظریه، در دوره جنینی، جنین دارای لنفوسیت های زیادی است - سلول های پیش ساز، که در هنگام مواجهه با آنتی ژن های خود از بین می روند. بنابراین، در بدن بالغ دیگر سلولی برای تولید آنتی بادی برای آنتی ژن های خود وجود ندارد. با این حال، هنگامی که یک ارگانیسم بالغ با یک آنتی ژن خارجی مواجه می شود، انتخاب (انتخاب) یک کلون از سلول های فعال ایمونولوژیک رخ می دهد و آنها آنتی بادی های خاصی را علیه این آنتی ژن "خارجی" تولید می کنند. هنگامی که آنها دوباره با این آنتی ژن مواجه می شوند، سلول های بیشتری از کلون "انتخابی" وجود دارد و آنها به سرعت آنتی بادی های بیشتری را تشکیل می دهند. این نظریه به طور کامل پدیده های اساسی ایمنی را توضیح می دهد.

مکانیسم تعامل بین آنتی ژن و آنتی بادیتوضیحات مختلفی دارد بنابراین، ارلیخ ترکیب آنها را به واکنش بین یک اسید قوی و یک باز قوی با تشکیل یک ماده جدید مانند نمک تشبیه کرد.

Bordet معتقد بود که آنتی ژن و آنتی بادی ها مانند رنگ و کاغذ صافی یا ید و نشاسته به طور متقابل یکدیگر را جذب می کنند. با این حال، این نظریه ها چیز اصلی - ویژگی واکنش های ایمنی را توضیح ندادند.

مکانیسم ارتباط بین آنتی ژن و آنتی بادی به طور کامل توسط فرضیه Marrek (نظریه شبکه) و Pauling (نظریه مزرعه) توضیح داده شده است (شکل 33). Marrek ترکیب آنتی ژن و آنتی بادی ها را به شکل شبکه ای در نظر می گیرد که در آن آنتی ژن با آنتی بادی متناوب می شود و کنگلومراهای شبکه را تشکیل می دهد. طبق فرضیه پالینگ (نگاه کنید به شکل 33)، آنتی بادی ها دارای دو ظرفیت (دو عامل تعیین کننده) هستند و یک آنتی ژن دارای چندین ظرفیت است - چند ظرفیتی است. هنگامی که آنتی ژن و آنتی بادی با هم ترکیب می شوند، آگلومره هایی تشکیل می شوند که شبیه "مزرعه" ساختمان ها هستند.

با نسبت بهینه آنتی ژن و آنتی بادی ها، مجتمع های بزرگ و بادوام تشکیل می شوند که با چشم غیر مسلح قابل مشاهده هستند. با بیش از حد آنتی ژن، هر مرکز فعال آنتی بادی ها با یک مولکول آنتی ژن پر می شود، آنتی بادی کافی برای ترکیب با سایر مولکول های آنتی ژن وجود ندارد و مجتمع های کوچک نامرئی برای چشم تشکیل می شود. با وجود آنتی بادی زیاد، آنتی ژن کافی برای تشکیل شبکه وجود ندارد، عوامل تعیین کننده آنتی بادی وجود ندارند و هیچ تظاهرات قابل مشاهده ای از واکنش وجود ندارد.

بر اساس تئوری های فوق، امروزه ویژگی واکنش آنتی ژن-آنتی بادی به عنوان برهمکنش گروه تعیین کننده آنتی ژن و مراکز فعال آنتی بادی نشان داده می شود. از آنجایی که آنتی بادی ها تحت تأثیر یک آنتی ژن تشکیل می شوند، ساختار آنها با گروه های تعیین کننده آنتی ژن مطابقت دارد. گروه تعیین کننده آنتی ژن و قطعات مراکز فعال آنتی بادی دارای بارهای الکتریکی مخالف هستند و در صورت ترکیب یک کمپلکس را تشکیل می دهند که قدرت آن به نسبت اجزا و محیطی که در آن برهم کنش دارند بستگی دارد.

مطالعه ایمنی - ایمونولوژی - در دهه های گذشته به موفقیت های زیادی دست یافته است. کشف الگوهای فرآیند ایمنی، حل مشکلات مختلف در بسیاری از زمینه های پزشکی را ممکن کرده است. روش‌هایی برای پیشگیری از بسیاری از بیماری‌های عفونی توسعه یافته و در حال بهبود هستند. درمان عفونی و تعدادی از بیماری های دیگر (خود ایمنی، نقص ایمنی)؛ جلوگیری از مرگ جنین در شرایط درگیری رزوس؛ پیوند بافت و عضو؛ مبارزه با نئوپلاسم های بدخیم؛ Immunodiagnostics - استفاده از واکنش های ایمنی برای اهداف تشخیصی.

واکنش های ایمنی- اینها واکنش هایی بین یک آنتی ژن و یک آنتی بادی یا بین یک آنتی ژن و لنفوسیت های * حساس هستند که در یک موجود زنده رخ می دهند و می توانند در آزمایشگاه تکثیر شوند.

* (حساس - بیش از حد حساس.)

واکنش های ایمنی در اواخر قرن نوزدهم و آغاز قرن بیستم وارد عمل تشخیص بیماری های عفونی شد. به دلیل حساسیت بالا (آنها آنتی ژن ها را در رقت های بسیار زیاد جذب می کنند) و مهمتر از همه، اختصاصی بودن دقیق (آنها به فرد اجازه می دهند آنتی ژن هایی را که از نظر ترکیب مشابه هستند تشخیص دهند)، کاربرد گسترده ای در حل مسائل نظری و عملی پزشکی و زیست شناسی پیدا کرده اند. . این واکنش‌ها توسط ایمونولوژیست‌ها، میکروبیولوژیست‌ها، متخصصان بیماری‌های عفونی، بیوشیمی‌دانان، ژنتیک‌شناسان، زیست‌شناسان مولکولی، انکولوژیست‌های تجربی و پزشکان سایر تخصص‌ها استفاده می‌شوند.

واکنش های یک آنتی ژن با یک آنتی بادی سرولوژیکی (از سرم لاتین - سرم) یا هومورال (از لاتین humor - مایع) نامیده می شود، زیرا آنتی بادی های دخیل در آنها (ایمونوگلوبولین ها) همیشه در سرم خون یافت می شوند.

واکنش های آنتی ژنی با لنفوسیت های حساس را واکنش های سلولی می نامند.

کنترل سوالات

1. آنتی بادی ها چگونه تشکیل می شوند؟

2. چه تئوری هایی در مورد تشکیل آنتی بادی می دانید؟

3. مکانیسم برهمکنش آنتی ژن و آنتی بادی چیست؟

واکنش های سرولوژیکی

واکنش های سرولوژیکی - واکنش های برهمکنش بین آنتی ژن و آنتی بادی در دو مرحله رخ می دهد: فاز 1 - اختصاصی - تشکیل مجموعه ای از یک آنتی ژن و آنتی بادی مربوط به آن (نگاه کنید به شکل 33). هیچ تغییر قابل مشاهده ای در این مرحله وجود ندارد، اما کمپلکس حاصل به عوامل غیر اختصاصی موجود در محیط (الکترولیت ها، مکمل، فاگوسیت) حساس می شود. فاز 2 - غیر اختصاصی. در این مرحله، کمپلکس آنتی ژن-آنتی بادی خاص با عوامل محیطی غیر اختصاصی که در آن واکنش رخ می دهد، برهمکنش می کند. نتیجه تعامل آنها با چشم غیر مسلح قابل مشاهده است (چسباندن، حل شدن و غیره). گاهی اوقات این تغییرات قابل مشاهده وجود ندارند.

ماهیت فاز مرئی واکنش های سرولوژیکی به وضعیت آنتی ژن و شرایط محیطی که در آن برهمکنش آن با آنتی بادی رخ می دهد بستگی دارد. واکنش های آگلوتیناسیون، رسوب، لیز ایمنی، تثبیت کمپلمان و غیره وجود دارد (جدول 14).

کاربرد آزمایشات سرولوژیکی. یکی از کاربردهای اصلی تست های سرولوژیکی تشخیص آزمایشگاهی عفونت ها می باشد. از آنها استفاده می شود: 1) برای تشخیص آنتی بادی در سرم بیمار، به عنوان مثال برای تشخیص سرمی. 2) برای تعیین نوع یا نوع آنتی ژن، به عنوان مثال، جدا شده از یک میکروارگانیسم بیمار، یعنی برای شناسایی آن.

در این صورت جزء مجهول از معلوم مشخص می شود. به عنوان مثال، برای شناسایی آنتی بادی ها در سرم بیمار، یک کشت آزمایشگاهی شناخته شده از یک میکروارگانیسم (آنتی ژن) گرفته می شود. اگر سرم با آن واکنش نشان دهد، حاوی آنتی بادی های مربوطه است و می توان تصور کرد که این میکروب عامل بیماری در بیمار مورد معاینه است.

در صورت لزوم تعیین اینکه کدام میکروارگانیسم جدا شده است، در یک واکنش با یک سرم تشخیصی (ایمنی) شناخته شده آزمایش می شود. نتیجه واکنش مثبت نشان می دهد که این میکروارگانیسم مشابه میکروارگانیسمی است که حیوان با آن برای بدست آوردن سرم ایمن سازی شده است (جدول 15).

از واکنش های سرولوژیکی نیز برای تعیین فعالیت (تیتر) سرم ها و در تحقیقات علمی استفاده می شود.

انجام واکنش های سرولوژیکینیاز به آماده سازی خاصی دارد.

ظروف برای واکنش های سرولوژیکی باید تمیز و خشک باشند. از لوله های آزمایش (باکتریولوژیک، آگلوتیناسیون، رسوب و سانتریفیوژ)، پیپت های مدرج استفاده کنید. اندازه های متفاوتو پاستور *، فلاسک ها، استوانه ها، اسلایدها و لیوان های پوششی، ظروف پتری، بشقاب های پلاستیکی چاه دار.

* (هر یک از اجزای واکنش در یک پیپت جداگانه ریخته می شود. پیپت ها باید تا پایان آزمایش نگهداری شوند. برای انجام این کار، راحت است که آنها را در لوله های آزمایش استریل با علائمی که نشان می دهد کدام پیپت است، قرار دهید.)

ابزار و تجهیزات: حلقه، پایه، ذره بین، آگلوتینوسکوپ، ترموستات، یخچال، سانتریفیوژ، ترازوی شیمیایی با وزنه.

مواد: آنتی بادی ها (سرم های ایمنی و آزمایش)، آنتی ژن ها (کشت های میکروارگانیسم ها، تشخیص ها، عصاره ها، لیزات ها، هاپتن ها، گلبول های قرمز، سموم)، مکمل، محلول ایزوتونیک کلرید سدیم.

توجه! در واکنش های سرولوژیکی فقط از کلرید سدیم خالص شیمیایی استفاده می شود.

سرم ها. سرم بیمار سرم معمولاً در هفته دوم بیماری، زمانی که می توان انتظار وجود آنتی بادی در آن را داشت، تهیه می شود؛ گاهی اوقات از سرم های نقاهتمندان (در حال بهبودی) و بهبود یافته ها استفاده می شود.

بیشتر اوقات، برای به دست آوردن سرم، خون از ورید به مقدار 3-5 میلی لیتر در یک لوله استریل گرفته می شود و همراه با برچسبی که نام خانوادگی و حروف اول بیمار، تشخیص و تاریخ مورد انتظار را نشان می دهد، به آزمایشگاه ارسال می شود.

خون باید با معده خالی یا زودتر از 6 ساعت پس از غذا مصرف شود. سرم خون بعد از غذا ممکن است حاوی قطرات چربی باشد که آن را کدر و برای تحقیق نامناسب می کند (به این سرم چیلوس می گویند).

توجه! هنگام خونگیری، لازم است قوانین آسپسیس را رعایت کنید.

برای بدست آوردن سرم خون را به مدت 1 ساعت در دمای اتاق می گذارند یا به مدت 30 دقیقه در ترموستات 37 درجه سانتیگراد قرار می دهند تا لخته تشکیل شود.

توجه! سرم نباید بیش از 30 دقیقه در ترموستات نگهداری شود - ممکن است همولیز رخ دهد که در تحقیقات اختلال ایجاد می کند.

لخته حاصل از دیواره های لوله آزمایش با پیپت یا حلقه پاستور ("دایره") جدا می شود. لوله آزمایش را برای مدتی (معمولاً 1 ساعت اما نه بیشتر از 48 ساعت) در یخچال قرار می دهند تا سرم را از لخته ای که در سرما جمع شده بهتر جدا کند. سپس سرم با پیپت پاستور استریل مجهز به بالون یا شلنگ لاستیکی آسپیره می شود.

سرم باید با دقت مکیده شود تا عناصر تشکیل شده جذب نشود. سرم باید کاملا شفاف و بدون هیچ گونه ترکیب سلولی باشد. سرم های کدر پس از ته نشین شدن سلول ها دوباره آسپیره می شوند. آب پنیر را می توان با سانتریفیوژ از عناصر تشکیل شده آزاد کرد.

توجه! آب پنیر می تواند بیش از 48 ساعت در دمای +4 درجه سانتیگراد روی لخته باقی بماند.

برای بدست آوردن سرم می توان از سوراخ شدن گوشت انگشت یا لاله گوش با پیپت پاستور خون گرفت. در نوزادان، خون از یک برش Y شکل در پاشنه پا گرفته می شود.

هنگام استفاده از پیپت پاستور، خون از طریق سوراخ به داخل پیپت مکیده می شود. انتهای تیز پیپت مهر و موم شده است. پیپت با انتهای تیز به سمت پایین در لوله آزمایش قرار می گیرد. برای جلوگیری از شکستن آن، یک تکه پنبه در پایین لوله آزمایش قرار می دهند. لوله با برچسب مناسب به آزمایشگاه ارسال می شود. سرم انباشته شده در انتهای پهن پیپت مکیده می شود.

سرم های ایمنی از خون افراد یا حیوانات (معمولاً خرگوش و اسب) به دست می آیند که طبق یک طرح خاص با آنتی ژن (واکسن) مربوطه ایمن سازی شده اند. در سرم حاصل، فعالیت آن (تیتر) تعیین می شود، یعنی بالاترین رقت که در آن با آنتی ژن مربوطه در واکنش نشان می دهد. شرایط خاصتجربه.

سرم ها معمولاً در مرحله تولید تهیه می شوند. آنها در آمپول هایی ریخته می شوند که روی آن نام و تیتر مشخص شده است. در بیشتر موارد سرم ها خشک می شوند. قبل از استفاده، آب پنیر خشک در آب مقطر حل می شود تا حجم اصلی آن (همچنین روی برچسب مشخص شده است). تمام داروهای تشخیصی خشک (لیوفیلیزه) را در دمای 4 تا 10 درجه سانتیگراد نگهداری کنید.

برای مطالعات سرولوژیکیاز سرم های ایمنی بومی (غیر جذب شده) و جذب شده استفاده می شود. عیب سرم های بومی وجود آنتی بادی های گروهی در آنها است، یعنی آنتی بادی های میکروارگانیسم هایی که دارای آنتی ژن های مشترک هستند. به طور معمول، چنین آنتی ژن هایی در میکروب های متعلق به یک گروه، جنس یا خانواده یافت می شوند. سرم های جذب شده با ویژگی دقیق مشخص می شوند: آنها فقط با یک آنتی ژن همولوگ واکنش نشان می دهند. آنتی بادی های دیگر آنتی ژن ها (ناهمگن) با جذب حذف می شوند. تیتر آنتی بادی سرم های جذب شده پایین است (1:40، 1:320)، بنابراین آنها رقیق نمی شوند *.

* (در حال حاضر، با استفاده از بیوتکنولوژی، سلول های خاصی (هیبریدوم ها) به دست آمده اند که آنتی بادی های مونوکلونال را در شرایط آزمایشگاهی تولید می کنند، یعنی آنتی بادی هایی که به طور دقیق (با یک آنتی ژن) واکنش نشان می دهند.)

واکنش آگلوتیناسیون

واکنش آگلوتیناسیون (RA) به چسباندن و رسوب میکروب ها یا سایر سلول ها تحت تأثیر آنتی بادی ها در حضور الکترولیت (محلول کلرید سدیم ایزوتونیک) است. رسوب حاصل را آگلوتینات می نامند. برای واکنش شما نیاز دارید:

1. آنتی بادی ها (آگلوتینین ها) - در سرم بیمار یا در سرم ایمنی یافت می شود.

2. آنتی ژن - تعلیق میکروارگانیسم های زنده یا کشته شده، گلبول های قرمز خون یا سایر سلول ها.

3. محلول ایزوتونیک.

واکنش آگلوتیناسیون برای تشخیص سرمی به طور گسترده برای تب حصبه، تب پاراتیفوئید (واکنش ویدال)، بروسلوز (واکنش رایت) و غیره استفاده می شود. آنتی بادی در این مورد سرم بیمار است و آنتی ژن یک میکروب شناخته شده است.

هنگام شناسایی میکروب ها یا سلول های دیگر، از سوسپانسیون آنها به عنوان آنتی ژن و یک سرم ایمنی شناخته شده به عنوان آنتی بادی استفاده می شود. این واکنش به طور گسترده در تشخیص استفاده می شود عفونت های روده ای، سیاه سرفه و غیره

تهیه مواد: 1) به دست آوردن آب پنیر، به ص. 200; 2) تهیه آنتی ژن. سوسپانسیون میکروب های زنده باید همگن بوده و (در 1 میلی لیتر) تقریباً 30 واحد باشد. کدورت بر اساس استاندارد نوری GISC. برای تهیه آن معمولاً از کشت 24 ساعته کشت شده روی کج آگار استفاده می شود. فرهنگ با 3-4 میلی لیتر محلول ایزوتونیک شسته می شود، به یک لوله استریل منتقل می شود، چگالی آن تعیین می شود و در صورت لزوم رقیق می شود.

استفاده از سوسپانسیون میکروب های کشته شده - تشخیصی - کار را تسهیل می کند و آن را ایمن می کند. معمولاً از دستگاه های تشخیصی تهیه شده در تولید استفاده می کنند.

تنظیم یک واکنش دو روش برای انجام این واکنش وجود دارد: واکنش آگلوتیناسیون شیشه (که گاهی اوقات واکنش نشان دهنده نامیده می شود) و واکنش آگلوتیناسیون گسترده (در لوله های آزمایش).

واکنش آگلوتیناسیون روی شیشه. 2 قطره سرم اختصاصی (جذب شده) و یک قطره محلول ایزوتونیک را روی یک لام شیشه ای بدون چربی بمالید. سرم های غیر جذبی از قبل به نسبت 1:5 - 1:25 رقیق می شوند. قطره ها به شیشه ریخته می شود تا بین آنها فاصله وجود داشته باشد. با استفاده از یک مداد مومی روی لیوان جایی که هر قطره است علامت بزنید. کشت با استفاده از یک حلقه یا پیپت روی شیشه کاملاً آسیاب می شود و سپس به یک قطره محلول ایزوتونیک و یکی از قطره های سرم اضافه می شود و هر کدام را هم می زنیم تا سوسپانسیون همگن تشکیل شود. یک قطره سرم بدون کشت کنترل سرم است.

توجه! شما نمی توانید کشت را از سرم به یک قطره محلول ایزوتونیک که یک کنترل آنتی ژن است، منتقل کنید.

واکنش در دمای اتاق به مدت 1-3 دقیقه انجام می شود. کنترل سرم باید شفاف بماند و کنترل آنتی ژن باید کدورت یکنواختی را نشان دهد. اگر در قطره ای که کشت با سرم مخلوط می شود، تکه های آگلوتینه در پس زمینه یک مایع شفاف ظاهر شود، نتیجه واکنش مثبت در نظر گرفته می شود. اگر واکنش منفی باشد، مانند کنترل آنتی ژن، کدورت یکنواختی در قطره وجود خواهد داشت.

این واکنش زمانی که در پس زمینه ای تاریک در نور عبوری مشاهده می شود به وضوح قابل مشاهده است. هنگام مطالعه آن می توانید از ذره بین استفاده کنید.

واکنش آگلوتیناسیون دقیق. سرم، اغلب رقت های دو برابری تهیه می شود. سرم بیمار معمولاً از 1:50 تا 1:1600 رقیق می شود، سرم ایمنی - تا تیتر یا تا نصف تیتر. تیتر یک سرم آگلوتینه کننده حداکثر رقت آن است که در آن سلول های همولوگ را آگلوتینه می کند.

رقت سرم: 1) تعداد مورد نیاز لوله آزمایش با همان قطر، ارتفاع و پیکربندی پایین را در یک قفسه قرار دهید.

2) روی هر لوله آزمایش درجه رقت سرم نشان داده شده است، علاوه بر این، روی لوله آزمایش 1 شماره آزمایش یا نام آنتی ژن درج شده است. روی لوله های کنترل می نویسند "KS" - کنترل سرم و "KA" - کنترل آنتی ژن.

3) 1 میلی لیتر محلول ایزوتونیک در تمام لوله های آزمایش ریخته می شود.

4) رقت اولیه (کار) سرم در یک لوله آزمایش جداگانه تهیه می شود. به عنوان مثال، برای تهیه رقت کاری 1:50، 4.9 میلی لیتر محلول ایزوتونیک و 0.1 میلی لیتر سرم در یک لوله آزمایش ریخته می شود. درجه رقت باید روی لوله آزمایش نشان داده شود. رقت اولیه سرم به دو لوله آزمایش اول و به لوله کنترل سرم اضافه می شود.

5) رقت های دو برابری سرم را تهیه کنید.

یک طرح تقریبی برای رقت آن در جدول آورده شده است. 16.

توجه داشته باشید. فلش ها انتقال مایع از لوله آزمایش به لوله آزمایش را نشان می دهد. از لوله آزمایش 5 و لوله کنترل سرم، 1.0 میلی لیتر در محلول ضد عفونی کننده ریخته می شود.

توجه! تمام لوله های آزمایش باید دارای حجم یکسانی از مایع باشند.

پس از رقیق شدن سرم، 1-2 قطره آنتی ژن (دیاگنتیکوم یا سوسپانسیون تازه تهیه شده از باکتری) به تمام لوله های آزمایش به جز سرم کنترل اضافه می شود. ابری یکنواخت خفیف باید در لوله های آزمایش ظاهر شود. کنترل سرم روشن باقی می ماند.

لوله های آزمایش کاملاً تکان داده می شوند و در یک ترموستات (37 درجه سانتیگراد) قرار می گیرند. حسابداری اولیه از نتایج واکنش پس از 2 ساعت و حسابداری نهایی پس از 18-20 ساعت (نگهداری در دمای اتاق) انجام می شود.

حسابداری برای نتایج، مانند همیشه، با کنترل آغاز می شود. کنترل سرم باید شفاف باقی بماند، کنترل آنتی ژن یکنواخت کدورت باشد. لوله ها را در نور عبوری (بسیار راحت در پس زمینه تاریک) با چشم غیرمسلح و با استفاده از ذره بین یا آگلوتینوسکوپ بررسی کنید.

آگلوتینوسکوپ- دستگاهی متشکل از یک لوله فلزی توخالی که روی پایه نصب شده است. در بالای آن یک چشمی با یک پیچ تنظیم قرار دارد. یک آینه گردان در زیر لوله وصل شده است. لوله آزمایش با مایع مورد مطالعه از پهلو به اندازه ای وارد سوراخ لوله می شود که مایع موجود در آن زیر چشمی باشد. با تنظیم نور با استفاده از آینه و تمرکز چشمی، وجود و ماهیت آگلوتینه مشخص می شود.

اگر نتیجه واکنش مثبت باشد، دانه ها یا تکه های آگلوتینات در لوله های آزمایش قابل مشاهده است. آگلوتینات به تدریج به شکل یک "چتر" به پایین می نشیند و مایع بالای رسوب شفاف می شود (در مقایسه با کنترل آنتی ژن یکنواخت کدورت).

برای مطالعه اندازه و ماهیت رسوب، محتویات لوله های آزمایش کمی تکان داده می شود. آگلوتیناسیون ریزدانه و لخته ای وجود دارد. ریزدانه (O-aglutination) هنگام کار با O-sera * بدست می آید. پوسته مانند (H) - در طول تعامل میکروارگانیسم های متحرک با سرم های H تاژکدار.

* (سرم O حاوی آنتی بادی برای آنتی ژن O (سوماتیک)، سرم H - آنتی ژن تاژک است.)

آگلوتیناسیون فلوکولنت سریعتر اتفاق می افتد؛ رسوب حاصل بسیار شل است و به راحتی شکسته می شود.

همه سلول ها ته نشین شده اند، مایع داخل لوله آزمایش کاملا شفاف است. نتیجه واکنش به شدت مثبت است.

رسوب کمتری وجود دارد، مایع به طور کامل پاک نمی شود. نتیجه واکنش مثبت است.

حتی رسوب کمتری وجود دارد، مایع کدر است. نتیجه واکنش کمی مثبت است.

رسوب کم، مایع کدر. نتیجه واکنش مشکوک

هیچ رسوبی وجود ندارد، مایع به طور یکنواخت کدر است، مانند کنترل آنتی ژن. نتیجه منفی واکنش.

خطاهای احتمالی هنگام انجام واکنش آگلوتیناسیون. 1. آگلوتیناسیون خود به خود (خود به خودی). برخی از سلول‌ها، به‌ویژه میکروب‌های شکل R، سوسپانسیون یکنواخت (همگن) تولید نمی‌کنند و به سرعت رسوب می‌کنند. برای جلوگیری از این، باید از کشت به شکل S استفاده کنید که آگلوتیناسیون خود به خودی ایجاد نمی کند.

2. سرم افراد سالم حاوی آنتی بادی هایی برای میکروارگانیسم های خاص است (به اصطلاح "آنتی بادی های طبیعی"). تیتر آنها پایین است. بنابراین، یک نتیجه مثبت از یک واکنش در رقت 1:100 یا بیشتر نشان دهنده ویژگی آن است.

3. واکنش گروهی با میکروب های مشابه در ساختار آنتی ژنی. به عنوان مثال، سرم یک بیمار مبتلا به حصبه همچنین می تواند باکتری های پاراتیفوئید A و B را آگلوتینه کند. برخلاف واکنش گروهی خاص، در تیترهای پایین تر رخ می دهد. سرم های جذب شده واکنش گروهی نشان نمی دهند.

4. باید در نظر داشت که آنتی بادی های خاص پس از یک بیماری و حتی پس از واکسیناسیون می توانند برای مدت طولانی باقی بمانند. آنها را "آنامنستیک" می نامند. برای تشخیص آنها از آنتی بادی های "عفونی" تشکیل شده در طول بیماری فعلی، واکنش به صورت پویا انجام می شود، یعنی سرم بیمار مورد بررسی قرار می گیرد و پس از 5-7 روز دوباره گرفته می شود. افزایش تیتر آنتی بادی نشان دهنده وجود یک بیماری است؛ تیتر آنتی بادی های "آنامنستیک" افزایش نمی یابد و حتی ممکن است کاهش یابد.

کنترل سوالات

1. واکنش های ایمنی چیست، خواص اصلی آنها چیست؟

2. چه اجزایی در واکنش های سرولوژیکی نقش دارند؟ چرا به واکنش ها سرولوژیک می گویند؟از چند فاز تشکیل شده اند؟

3. واکنش آگلوتیناسیون چیست؟ کاربرد و روش های اجرای آن. تشخیص چیست؟

4. هنگام معاینه سرم بیمار از چه آنتی ژنی استفاده می شود؟ برای تعیین نوع میکروب ناشناخته از چه سرمی استفاده می شود؟

5. آگلوتیناسیون O و H چیست؟ رسوب لخته ای در چه مواردی تشکیل می شود و چه زمانی ریزدانه می شود؟

ورزش

1. انجام یک آزمایش آگلوتیناسیون دقیق برای تعیین تیتر آنتی بادی در سرم بیمار و در نظر گرفتن نتیجه آن.

2. برای تعیین نوع میکروارگانیسم جدا شده، واکنش آگلوتیناسیون را روی شیشه انجام دهید.

واکنش هماگلوتیناسیون

در عمل آزمایشگاهی، از دو واکنش هماگلوتیناسیون (HRAs) که در مکانیسم اثر آنها متفاوت است استفاده می شود.

اول RGAبه سرولوژی اشاره دارد. در این واکنش، گلبول های قرمز در هنگام تعامل با آنتی بادی های مناسب (هماگلوتینین) آگلوتینه می شوند. این واکنش به طور گسترده ای برای تعیین گروه های خونی استفاده می شود.

RGA دومسرولوژیک نیست در آن، چسباندن گلبول های قرمز نه توسط آنتی بادی ها، بلکه توسط مواد خاصی که توسط ویروس ها تشکیل شده است، ایجاد می شود. به عنوان مثال، ویروس آنفولانزا گلبول های قرمز مرغ را آگلوتینه می کند و خوک گینه، ویروس فلج اطفال - گلبول های قرمز گوسفند. این واکنش قضاوت در مورد وجود یک ویروس خاص در ماده مورد مطالعه را ممکن می سازد.

تنظیم یک واکنش واکنش در لوله های آزمایش یا روی صفحات مخصوص با چاه انجام می شود. ماده آزمایش شده برای حضور ویروس با محلول ایزوتونیک از 1:10 تا 1:1280 رقیق می شود. 0.5 میلی لیتر از هر رقت با حجم مساوی از 1-2٪ سوسپانسیون گلبول قرمز مخلوط می شود. در شاهد، 0.5 میلی لیتر گلبول قرمز با 0.5 میلی لیتر محلول ایزوتونیک مخلوط می شود. لوله ها به مدت 30 دقیقه در یک ترموستات قرار می گیرند و صفحات به مدت 45 دقیقه در دمای اتاق قرار می گیرند.

حسابداری برای نتایج اگر واکنش مثبت باشد، رسوبی از گلبول‌های قرمز با لبه‌های صدفی ("چتر") در انتهای لوله آزمایش یا چاه ظاهر می‌شود و تمام کف چاه را می‌پوشاند. اگر نتیجه منفی باشد، گلبول های قرمز خون رسوبی متراکم با لبه های صاف ("دکمه") تشکیل می دهند. همان رسوب باید در کنترل باشد. شدت واکنش با علائم مثبت بیان می شود. تیتر ویروس حداکثر رقت ماده ای است که در آن آگلوتیناسیون اتفاق می افتد.

واکنش مهار هماگلوتیناسیون

این واکنش سرولوژیکیکه در آن آنتی بادی های ضد ویروسی خاص، در تعامل با ویروس (آنتی ژن)، آن را خنثی می کنند و توانایی چسباندن گلبول های قرمز را از آن سلب می کنند، یعنی واکنش هماگلوتیناسیون را مهار می کنند. ویژگی بالای واکنش مهار هماگلوتیناسیون (HAI) اجازه می دهد تا از آن برای تعیین نوع و حتی نوع ویروس های شناسایی شده در طول آزمایش HRA استفاده شود.

تنظیم یک واکنش 0.25 میلی لیتر سرم ضد ویروسی در رقت های دو برابری متوالی از 1:10 تا 1:2560 با حجم مساوی از مواد حاوی ویروس مخلوط می شود که 4 برابر کمتر از تیتر تعیین شده در RGA رقیق شده است. مخلوط تکان داده می شود و به مدت 30 دقیقه در ترموستات قرار می گیرد و پس از آن 0.5 میلی لیتر از یک سوسپانسیون 1-2٪ گلبول های قرمز خون اضافه می شود.

واکنش با سه کنترل همراه است (جدول 17).

نتایج پس از انکوباسیون مکرر در یک ترموستات به مدت 30 یا 45 دقیقه در دمای اتاق ثبت می شود. اگر آزمایش به درستی انجام شود، باید یک "دکمه" در کنترل سرم و گلبول های قرمز تشکیل شود - هیچ عاملی برای آگلوتیناسیون گلبول های قرمز وجود ندارد. در کنترل آنتی ژن، یک "چتر" تشکیل می شود - ویروس باعث آگلوتیناسیون گلبول های قرمز خون می شود.

در یک آزمایش، اگر سرم با ویروس مورد مطالعه همولوگ باشد، یک "دکمه" تشکیل می شود - سرم ویروس را خنثی کرده است. تیتر سرم حداکثر رقت آن است که در آن هماگلوتیناسیون به تاخیر می افتد.

واکنش هماگلوتیناسیون غیر مستقیم

واکنش هماگلوتیناسیون غیرمستقیم (غیرفعال) (IRHA) مبتنی بر این واقعیت است که گلبول های قرمز، اگر آنتی ژن محلول روی سطح آنها جذب شود، در هنگام تعامل با آنتی بادی های آنتی ژن جذب شده، توانایی آگلوتیناسیون را به دست می آورند. نمودار RNGA در شکل نشان داده شده است. 34. RNGA به طور گسترده در تشخیص تعدادی از عفونت ها استفاده می شود.

تنظیم یک واکنش سرم آزمایش به مدت 30 دقیقه در دمای 56 درجه سانتی گراد حرارت داده می شود، به طور متوالی به نسبت 1:10 - 1:1280 رقیق می شود و در 0.25 میلی لیتر در لوله های آزمایش یا چاه ها ریخته می شود، جایی که 2 قطره گلبول های قرمز تشخیصی (گلبول های قرمز با آنتی ژن جذب شده بر روی آنها) ) سپس اضافه می شوند.

کنترل ها: تعلیق گلبول های قرمز تشخیصی با سرم ایمنی شناخته شده. تعلیق تشخیص با سرم طبیعی؛ تعلیق گلبول های قرمز طبیعی با سرم آزمایش. در کنترل اول باید آگلوتیناسیون اتفاق بیفتد، در کنترل دوم و سوم نباید اتفاق بیفتد.

با استفاده از RIGA، اگر آنتی‌بادی‌های شناخته شده روی گلبول‌های قرمز جذب شوند، می‌توانید یک آنتی ژن ناشناخته را شناسایی کنید.

واکنش هماگلوتیناسیون را می توان در حجم 025/0 میلی لیتر (میکرو روش) با استفاده از میکروتیتراتور تاکاچی انجام داد.

کنترل سوالات

1. نتیجه آنالیز اشعه ایکس مثبت بین گلبول‌های قرمز خون و ماده مورد آزمایش برای وجود ویروس چه چیزی را نشان می‌دهد؟

2. آیا در صورت افزودن ویروس و سرم مربوط به آن به گلبول های قرمز آگلوتیناسیون رخ می دهد؟ نام واکنشی که این پدیده را آشکار می کند چیست؟

ورزش

نتیجه RIGA را در نظر بگیرید و ثبت کنید.

واکنش بارش

در واکنش رسوب، یک کمپلکس ایمنی خاص، متشکل از یک آنتی ژن محلول (لیز، عصاره، هاپتن) و یک آنتی بادی خاص در حضور الکترولیت ها رسوب می کند.

حلقه ابری یا رسوبی که در نتیجه این واکنش ایجاد می شود، رسوب نامیده می شود. این واکنش عمدتاً از نظر اندازه ذرات آنتی ژن با واکنش آگلوتیناسیون متفاوت است.

واکنش بارش معمولاً برای تعیین آنتی ژن در تشخیص تعدادی از عفونت ها استفاده می شود. سیاه زخممننژیت و غیره)؛ V پزشکی قانونی- تعیین گونه های خون، اسپرم و غیره؛ در مطالعات بهداشتی و بهداشتی - هنگام ایجاد جعل محصولات؛ با کمک آن، رابطه فیلوژنتیکی حیوانات و گیاهان مشخص می شود. برای واکنش شما نیاز دارید:

1. آنتی بادی ها (رسوبیتین ها) - سرم ایمنی با تیتر آنتی بادی بالا (نه کمتر از 1:100000). تیتر سرم رسوب دهنده با بالاترین رقت آنتی ژنی که با آن واکنش نشان می دهد تعیین می شود. سرم معمولاً رقیق نشده یا در رقت 1:5 تا 1:10 استفاده می شود.

2. آنتی ژن - مواد محلول پروتئین یا پلی ساکارید لیپویدی طبیعت (آنتی ژن ها و هاپتن های کامل).

3. محلول ایزوتونیک.

روشهای اصلی برای انجام واکنش رسوبی عبارتند از: واکنش رسوب حلقه ای و واکنش رسوب در آگار (ژل).

توجه! تمام اجزای دخیل در واکنش بارش باید کاملا شفاف باشند.

واکنش بارش حلقه ای. با استفاده از پیپت پاستور، 0.2-0.3 میلی لیتر (5-6 قطره) سرم را به لوله رسوب اضافه کنید (سرم نباید روی دیواره های لوله قرار گیرد). آنتی ژن در همان حجم به دقت روی سرم قرار می گیرد و آن را با یک پیپت نازک پاستور در امتداد دیواره لوله آزمایش می ریزد. لوله آزمایش در موقعیت شیبدار قرار می گیرد. هنگامی که به درستی لایه بندی شود، باید مرز مشخصی بین سرم و آنتی ژن وجود داشته باشد. با احتیاط برای اینکه مایع مخلوط نشود، لوله آزمایش را در پایه قرار دهید. اگر واکنش مثبت باشد، یک "حلقه" کدر در سطح مشترک آنتی ژن و آنتی بادی تشکیل می شود - یک رسوب (شکل 48 را ببینید).

واکنش با تعدادی کنترل همراه است (جدول 18). ترتیب افزودن مواد واکنش به لوله آزمایش بسیار مهم است. شما نمی توانید سرم را روی آنتی ژن قرار دهید (در کنترل - روی محلول ایزوتونیک)، از آنجایی که چگالی نسبی سرم بیشتر است، به ته لوله آزمایش فرو می رود و مرز بین مایعات آشکار نمی شود.

توجه داشته باشید. + وجود "حلقه"؛ - عدم وجود "حلقه".

نتایج پس از 5-30 دقیقه، در برخی موارد پس از یک ساعت، مانند همیشه با شروع با کنترل ثبت می شود. "حلقه" در لوله آزمایش 2 نشان دهنده توانایی سرم ایمنی برای وارد شدن به یک واکنش خاص با آنتی ژن مربوطه است. در 3-5 لوله آزمایش نباید "حلقه" وجود داشته باشد - هیچ آنتی بادی و آنتی ژن مربوط به یکدیگر وجود ندارد. یک "حلقه" در لوله 1 - یک نتیجه واکنش مثبت - نشان می دهد که آنتی ژن آزمایش با سرم ایمنی گرفته شده مطابقت دارد ، عدم وجود "حلقه" (حلقه فقط در لوله دوم) نشان دهنده اختلاف آنها است - نتیجه منفیواکنش ها

واکنش رسوب در آگار (ژل). ویژگی واکنش این است که تعامل آنتی ژن و آنتی بادی در یک محیط متراکم، یعنی در یک ژل رخ می دهد. رسوب به دست آمده یک رگه کدورت در ضخامت محیط ایجاد می کند. عدم وجود نوار نشان دهنده اختلاف بین اجزای واکنش است. این واکنش به طور گسترده در تحقیقات زیست پزشکی، به ویژه در مطالعه تشکیل سم در عامل ایجاد کننده دیفتری استفاده می شود.

کنترل سوالات

1. تفاوت اصلی بین واکنش های آگلوتیناسیون و رسوب چیست؟

2. چرا نمی توان از مواد کدر در واکنش بارش استفاده کرد؟

ورزش

1. واکنش بارش حلقه را تنظیم کنید و نتیجه را ترسیم کنید.

2. ماهیت برهمکنش آنتی ژن با آنتی بادی در واکنش رسوب در آگار را مطالعه کنید، نتیجه را ترسیم کنید (یک فنجان از معلم خود بگیرید).

واکنش لیز (سیتولیز ایمنی)

لیز ایمنی انحلال سلول ها تحت تأثیر آنتی بادی ها با مشارکت اجباری مکمل است. برای واکنش شما نیاز دارید:

1. آنتی ژن - میکروب ها، گلبول های قرمز یا سایر سلول ها.

2. آنتی بادی (لیزین) - سرم ایمنی، کمتر سرم بیمار. سرم باکتریولیتیک حاوی آنتی بادی هایی است که در لیز باکتری ها نقش دارند. همولیتیک - همولیزین هایی که لیز گلبول های قرمز را افزایش می دهند. برای لیز اسپیروکت ها، اسپیروکتولیزین ها، سلول ها - ایتولیزین ها و غیره مورد نیاز هستند.

3. مکمل. سرم خوکچه هندی حاوی بیشترین مکمل است. این سرم (مخلوطی از چندین حیوان) معمولاً به عنوان مکمل استفاده می شود. مکمل تازه (بومی) ناپایدار است و به راحتی با حرارت دادن، تکان دادن یا ذخیره سازی از بین می رود، بنابراین نمی توان آن را بیش از دو روز پس از دریافت استفاده کرد. برای حفظ مکمل، 2 درصد به آن اضافه می شود اسید بوریکو 3 درصد سولفات سدیم. این مکمل را می توان تا دو هفته در دمای 4 درجه سانتی گراد نگهداری کرد. مکمل خشک اغلب استفاده می شود. قبل از استفاده، آن را در محلول ایزوتونیک به حجم اصلی (که روی برچسب نشان داده شده است) حل می کنند.

4. محلول ایزوتونیک.

واکنش همولیز(جدول 19). برای واکنش شما نیاز دارید:

1. آنتی ژن - 3% سوسپانسیون گلبول های قرمز شسته شده گوسفند به میزان 0.3 میلی لیتر رسوب گلبول قرمز و 9.7 میلی لیتر محلول ایزوتونیک.

2. آنتی بادی - سرم همولیتیک (همولیزین) علیه گلبول های قرمز گوسفند. معمولاً در مرحله تولید تهیه می شود، لیوفیلیز می شود و تیتر آن روی برچسب مشخص می شود.

تیتر همولیزین بالاترین رقت سرم است که در آن همولیز کامل سوسپانسیون 3 درصدی گلبول های قرمز در حضور مکمل اتفاق می افتد. برای واکنش همولیز، همولیزین در تیتر سه گانه گرفته می شود، یعنی 3 برابر کمتر از قبل از تیتر رقیق می شود. به عنوان مثال، با تیتر سرم 1:1200، سرم 1:400 (0.1 میلی لیتر سرم * و 39.9 میلی لیتر محلول ایزوتونیک) رقیق می شود. همولیزین اضافی لازم است، زیرا مقداری از آن می تواند توسط سایر اجزای واکنش جذب شود.

* (شما نباید کمتر از 0.1 میلی لیتر سرم مصرف کنید - دقت اندازه گیری آسیب می بیند.)

3. کمپلمان 1:10 رقیق می شود (0.2 میلی لیتر مکمل و 1.8 میلی لیتر محلول ایزوتونیک).

4. محلول ایزوتونیک.

حسابداری برای نتایج اگر واکنش به درستی انجام شود، همولیز در اولین لوله آزمایش رخ می دهد - محتویات آن شفاف می شود. در کنترل ها، مایع کدر می ماند: در لوله دوم مکمل کافی برای همولیز وجود ندارد، در لوله سوم همولیزین وجود ندارد، در لوله چهارم نه همولیزین وجود دارد و نه مکمل، در لوله 5 آنتی ژن وجود دارد. با آنتی بادی مطابقت ندارد،

در صورت لزوم، سرم همولیتیک طبق طرح زیر تیتر می شود (جدول 20).

قبل از تیتراسیون، یک رقت اولیه سرم 1:100 (0.1 میلی لیتر سرم و 9.9 میلی لیتر محلول ایزوتونیک) تهیه کنید که از آن رقت های لازم به عنوان مثال:

از این رقت ها، همانطور که در جدول نشان داده شده است، 0.5 میلی لیتر سرم را به لوله های آزمایش تیتراسیون اضافه کنید. 20.

در مثال ارائه شده در جدول 20، تیتر سرم همولیتیک 1:1200 است.

هنگام استفاده از سرم همولیتیک تازه، باید آن را غیرفعال کرد تا مکمل موجود در آن از بین برود. برای انجام این کار، به مدت 30 دقیقه در دمای 56 درجه سانتیگراد در یک حمام آب یا در یک غیرفعال کننده با ترموستات گرم می شود. روش دوم بهتر است: امکان گرم شدن بیش از حد آب پنیر، یعنی دناتوره شدن آن را از بین می برد. سرم های دناتوره شده برای آزمایش نامناسب هستند.

واکنش باکتریولیز. در این واکنش، مکمل در حضور سرم مناسب (همولوگ) باکتری ها را لیز می کند. طرح واکنش اساساً شبیه طرح واکنش همولیز است. تفاوت در این است که پس از یک انکوباسیون دو ساعته، تمام لوله‌های آزمایش روی ظروف پتری با محیطی مناسب برای میکروارگانیسم‌های وارد شده در آزمایش کاشته می‌شوند تا مشخص شود آیا لیز شده است یا خیر. اگر آزمایش به درستی انجام شود، کشت از 2-5 لوله آزمایش (شاهد) باید رشد فراوانی را نشان دهد. عدم رشد یا رشد ضعیف در تلقیح از اولین لوله آزمایش (آزمایش) نشان دهنده مرگ میکروب ها است، یعنی همولوگ بودن آنها با آنتی بادی.

توجه! واکنش باکتریولیز باید در شرایط آسپتیک انجام شود.

کنترل سوالات

1. اگر به جای محلول ایزوتونیک سدیم کلرید از آب مقطر استفاده شود، چه اتفاقی برای گلبول های قرمز می افتد؟ اساس این پدیده چیست؟

2. وقتی گلبول های قرمز با سرم ایمنی همولوگ در غیاب کمپلمان برهم کنش می کنند چه واکنشی رخ خواهد داد؟

ورزش

واکنش همولیز را تنظیم کنید. نتیجه را ضبط و ترسیم کنید.

واکنش تثبیت مکمل

واکنش تثبیت کمپلمان (CFR) بر این واقعیت استوار است که یک مجموعه آنتی ژن-آنتی بادی خاص همیشه مکمل را به خود جذب می کند (پیوند می کند).

این واکنش به طور گسترده در شناسایی آنتی ژن ها و در تشخیص سرمی عفونت ها، به ویژه بیماری های ناشی از اسپیروکت ها (واکنش واسرمن)، ریکتزیا و ویروس ها استفاده می شود.

RSC یک واکنش سرولوژیکی پیچیده است. این شامل مکمل و دو سیستم آنتی ژن-آنتی بادی است. در اصل، این دو واکنش سرولوژیکی هستند.

سیستم اول - سیستم اصلی شامل یک آنتی ژن و یک آنتی بادی است (یکی شناخته شده است، دیگری مشخص نیست). مقدار مشخصی مکمل به آن اضافه می شود. اگر آنتی ژن و آنتی بادی این سیستم با هم تطابق داشته باشند، به مکمل متصل می شوند. مجموعه حاصل به خوبی پراکنده شده و قابل مشاهده نیست.

تشکیل این کمپلکس با استفاده از یک سیستم همولیتیک یا اندیکاتور دوم تشخیص داده می شود. این شامل گلبول های قرمز گوسفند (آنتی ژن) و سرم همولیتیک مربوطه (آنتی بادی)، یعنی یک کمپلکس ایمنی آماده است. در این سیستم، لیز گلبول های قرمز تنها در حضور مکمل می تواند رخ دهد. اگر مکمل به سیستم اول متصل شود (اگر آنتی ژن و آنتی بادی در آن مطابقت دارند)، در سیستم دوم همولیز وجود نخواهد داشت - زیرا مکمل آزاد وجود ندارد. عدم وجود همولیز (محتویات لوله کدر است یا رسوب گلبول های قرمز در پایین وجود دارد) به عنوان نتیجه مثبت RSC ثبت می شود (شکل 35).

اگر در سیستم اول آنتی ژن با آنتی بادی مطابقت نداشته باشد، کمپلکس ایمنی تشکیل نمی شود و مکمل آزاد می ماند. در صورت آزاد ماندن، مکمل در سیستم دوم شرکت می کند و باعث همولیز می شود - نتیجه RSC منفی است (محتویات لوله ها شفاف است - "خون لاکی").

اجزای واکنش تثبیت کمپلمان: 1. آنتی ژن - معمولا لیز، عصاره، هاپتن. تعلیق میکروارگانیسم ها اصلی 2. آنتی بادی - سیستم سرم بیمار 3. مکمل - سرم خوکچه هندی 4. آنتی ژن - گلبول های قرمز گوسفند Hemoliti- 5. آنتی بادی - همولیزین به گلبول های قرمز گوسفند 6. سیستم محلول ایزوتونیک

با توجه به اینکه تعداد زیادی از اجزای پیچیده در RSC دخیل هستند، ابتدا باید تیتر شده و در آن واکنش نشان داد. مقادیر دقیقو در حجم های مساوی: 0.5 یا 0.25، کمتر 0.2 میلی لیتر. بر این اساس، کل آزمایش در حجم های 2.5، 1.25 یا 1.0 میلی لیتر انجام می شود (حجم های بزرگتر نتیجه دقیق تری می دهد). تیتراسیون اجزای واکنش در همان حجم آزمایش انجام می شود و مواد از دست رفته را با محلول ایزوتونیک جایگزین می کند.

آماده سازی مواد

1. سرم همولیتیک(همولیزین). سرم 3 برابر کمتر از تیتر آن رقیق می شود. رقت کلی سرم را برای کل آزمایش آماده کنید. حجم آن با ضرب حجم سرم در یک لوله آزمایش (مثلاً 0.5 میلی لیتر) در تعداد لوله های آزمایش تعیین می شود که کمی بیشتر از تعداد آزمایش * است.

* (مایع اضافی هنگام آماده سازی تمام اجزای واکنش ضروری است: مقداری از آن روی دیواره های لوله های آزمایش، فلاسک ها و پیپت ها باقی می ماند.)

2. گلبول های قرمز گوسفند. یک سوسپانسیون 3% از گلبول های قرمز شسته شده گوسفند برای کل تعداد لوله های آزمایش در آزمایش تهیه کنید.

برای تهیه سیستم همولیتیک، 30 دقیقه قبل از وارد کردن آن به آزمایش، حجم مساوی از همولیزین رقیق شده و سوسپانسیون گلبول های قرمز را مخلوط کرده و سرم را در گلبول های قرمز ریخته، کاملاً مخلوط کرده و به مدت 30 دقیقه در دمای 37 درجه سانتی گراد انکوبه کنید. حساس کردن).

3. متمممعمولاً 1:10 رقیق می شود. قبل از هر آزمایش باید تیتر شود. تیتر کمپلمان کوچکترین مقدار آن است، هنگامی که به سیستم همولیتیک اضافه می شود، همولیز کامل در عرض 1 ساعت در دمای 37 درجه سانتیگراد رخ می دهد. طرح تیتراسیون مکمل در جدول ارائه شده است. 21.

توجه داشته باشید. حجم کل مایع در لوله های آزمایش 2.5 میلی لیتر است.

توجه! مکمل در همان حجم آزمایش اصلی تیتر می شود و مواد از دست رفته را با محلول ایزوتونیک جایگزین می کند.

حسابداری برای نتایج حتی نباید اثری از همولیز در کنترل وجود داشته باشد، زیرا یکی از آنها حاوی مکمل نیست، دیگری همولیزین است. کنترل‌ها نشان می‌دهند که اجزای واکنش سمیت خونی (قابلیت لیز کردن خود به خود گلبول‌های قرمز) ندارند.

در جدول داده شده در مثال 21، تیتر مکمل در رقت 1:10 0.15 میلی لیتر است. در یک آزمایش، فعالیت مکمل می تواند به دلیل جذب غیر اختصاصی آن توسط سایر اجزای واکنش کاهش یابد، بنابراین، برای آزمایش، مقدار مکمل افزایش می یابد: دوز بعد از تیتر گرفته می شود. این دوز کار است. در مثال ارائه شده، برابر با 0.2 میلی لیتر مکمل در رقت 1:10 است. از آنجایی که تمام اجزای درگیر در RSC باید در حجم های مساوی گرفته شوند (در مثال ما 0:5 میلی لیتر است)، لازم است 0.3 میلی لیتر محلول ایزوتونیک به دوز کاری مکمل اضافه شود (0.2 میلی لیتر 1:10). برای کل آزمایش، حجم هر یک از آنها (محلول مکمل و ایزوتونیک) در تعداد لوله های آزمایش شرکت کننده در RSC ضرب می شود. به عنوان مثال، برای انجام آزمایش در 50 لوله آزمایش، باید 10 میلی لیتر مکمل 1:10 (0.2 میلی لیتر × 50) و 15 میلی لیتر محلول ایزوتونیک (0.3 میلی لیتر × 50) مصرف کنید.

4. آنتی ژنمعمولاً به صورت آماده با نشان دادن تیتر آن به دست می آید، یعنی مقداری که پس از رقیق شدن آنتی ژن باید در 1 میلی لیتر باشد. به عنوان مثال، با تیتر 0.4، آن را در 0.96 میلی لیتر محلول ایزوتونیک رقیق می کنند. مقدار آنتی ژن معادل نصف تیتر (0.5 میلی لیتر) در آزمایش گرفته می شود. این دوز کاری اوست. یک رقت کلی از آنتی ژن برای کل آزمایش تهیه کنید و 0.5 میلی لیتر را در تعداد لوله های آزمایش در آزمایش ضرب کنید.

5. پادتن- سرم بیمار سرم تازه قبل از آزمایش غیرفعال می شود تا مکمل موجود در آن از بین برود. برای انجام این کار، به مدت 30 دقیقه در دمای 56 درجه سانتیگراد در یک حمام آب یا در یک غیرفعال کننده با ترموستات گرم می شود. روش دوم ترجیح داده می شود: احتمال گرم شدن بیش از حد آب پنیر، یعنی دناتوره شدن آن را از بین می برد. سرم های دناتوره شده برای آزمایش مناسب نیستند. سرم بیمار معمولاً با رقت 1:10 تا 1:160 استفاده می شود.

سرم های ایمنی اغلب در شرایط تولید تهیه و به صورت غیر فعال آزاد می شوند. آنها 1:50 و بالاتر رقیق می شوند.

توجه! همه مواد با مقدار کمی اضافه آماده می شوند.

انجام آزمایش اصلی

هنگام تنظیم یک آزمایش، ترتیب اضافه کردن اجزا بسیار مهم است. آزمایش در دو مرحله انجام می شود (جدول 22).

1 (در آزمایش‌ها، سرم را می‌توان در رقت‌های متوالی دو برابری مطالعه کرد.)

فاز I. مقدار مورد نیاز محلول ایزوتونیک کلرید سدیم در لوله های آزمایش ریخته می شود، سپس حجم مورد نیاز سرم رقیق شده و دوزهای کاری آنتی ژن و مکمل در همان حجم ریخته می شود. آزمایش باید با کنترل تمام اجزای درگیر در آن همراه باشد: سرم، آنتی ژن، سیستم همولیتیک و مکمل.

لوله ها کاملاً تکان داده می شوند و در دمای 37 درجه سانتیگراد به مدت 45 دقیقه - 1 ساعت یا در دمای 4 درجه سانتیگراد ("RSK در سرما") به مدت 18 ساعت انکوبه می شوند.در این مدت در حضور یک کمپلکس خاص، اتصال مکمل اتفاق می افتد. انجام واکنش "در سرما" به طور قابل توجهی حساسیت و ویژگی آن را افزایش می دهد.

فاز دوم. در پایان انکوباسیون، 1 میلی لیتر سیستم همولیتیک به تمام لوله های آزمایش اضافه می شود که ابتدا به مدت 30 دقیقه در ترموستات نگهداری می شود (حساس شده). لوله های آزمایش تکان داده می شوند و دوباره در ترموستات قرار می گیرند.

حسابداری برای نتایج لوله ها تا همولیز کامل در لوله های 2، 3، 6 و 7 در ترموستات باقی می مانند (کنترل سرم، آنتی ژن و مکمل برای یک و دو دوز). همولیز ابتدا در لوله آزمایش هفتم رخ می دهد که حاوی مقدار دو برابر مکمل است. پس از اینکه همولیز در این لوله رخ داد و محتویات آن کاملاً شفاف شد، باید کنترل های باقیمانده را با دقت کنترل کنید. به محض شفاف شدن مایع لوله های آزمایش 2، 3 و 6، باید بلافاصله قفسه با لوله های آزمایش را از ترموستات خارج کنید. این واقعیت که آزمایش بیش از حد لازم در ترموستات نگه داشته نشده است با وجود کدورت خفیف (همولیز ناقص) در لوله آزمایش 5 نشان داده شده است - این آزمایش فقط حاوی نیمی از دوز کاری مکمل است و در صورت آزمایش همولیز کامل نمی تواند رخ دهد. به درستی تنظیم کنید

همولیز در سرم و کنترل آنتی ژن (لوله های 2 و 3) نشان می دهد که دوزهای آنها به درستی انتخاب شده است و نه سرم و نه خود آنتی ژن به مکمل متصل نمی شوند.

در کنترل سیستم همولیتیک (لوله آزمایش 4)، اگر به درستی کار می کند، حتی نباید اثری از همولیز وجود داشته باشد - هیچ مکملی در آن وجود ندارد.

هنگامی که مطمئن شدید که کنترل ها به درستی تکمیل شده اند، می توانید تجربه را در نظر بگیرید. عدم وجود همولیز در لوله های آزمایش به عنوان نتیجه مثبت واکنش در نظر گرفته می شود. این نشان می دهد که سرم حاوی آنتی بادی های مخصوص آنتی ژن گرفته شده است. کمپلکسی که آنها تشکیل می‌دهند، مکمل متصل شده را تشکیل می‌دهند و از مشارکت آن در واکنش همولیز جلوگیری می‌کنند. اگر همولیز در لوله های آزمایش رخ دهد، نتیجه واکنش منفی ارزیابی می شود. که در در این موردهیچ تناسبی بین آنتی ژن و آنتی بادی وجود ندارد، مکمل متصل نیست و در واکنش همولیز نقش دارد.

به موازات سرم بیمار، آزمایش مشابهی با سرم آشکارا مثبت (یعنی با سرمی حاوی آنتی بادی برای یک آنتی ژن معین) و سرم بدیهی منفی که حاوی آنتی بادی خاصی نیست، انجام می شود. اگر آزمایش به درستی تنظیم شود، در حالت اول باید همولیز تاخیر داشته باشد و در حالت دوم همولیز انجام می شود.

شدت واکنش به صورت زیر بیان می شود:

تأخیر کامل همولیز. گلبول‌های قرمز کدورت یکنواختی را تشکیل می‌دهند یا به پایین می‌نشینند. در این حالت مایع داخل لوله آزمایش بی رنگ می شود.

تقریباً 25 درصد از گلبول های قرمز خون لیز می شوند. رسوب کمتری وجود دارد، مایع بالای آن کمی صورتی است. نتیجه RSC نیز به شدت مثبت ارزیابی می شود.

تقریباً 50 درصد از گلبول های قرمز خون لیز می شوند. رسوب کوچک است، مایع صورتی است. نتیجه RSC مثبت؛

تقریباً 75 درصد از گلبول های قرمز خون لیز می شوند. رسوبی خفیف که بالای آن مایعی با رنگ شدید وجود دارد. نتیجه مشکوک RSC؛

تمام گلبول های قرمز خون لیز شدند. مایع به شدت رنگی و کاملا شفاف است. نتیجه RSK منفی

کنترل سوالات

1. اصل RSK چیست؟

2. چه سیستم هایی در DSC دخیل هستند؟ سیستم همولیتیک از چه چیزی تشکیل شده و چه نقشی در واکنش دارد؟

3. آمادگی برای تجربه اصلی RSK چیست؟ در چه ترتیبی انجام می شود؟ چند فاز در DGC وجود دارد؟

4. عدم وجود همولیز در RSC نشان دهنده چیست؟

ورزش

1. مکمل را تیتر کنید و دوز کاری آن را تنظیم کنید.

2. تمام مواد تشکیل دهنده برای تنظیم آزمایش اصلی را محاسبه کنید، آزمایش را انجام دهید، نتیجه را در نظر بگیرید و ترسیم کنید.

واکنش ایمونوفلورسانس

واکنش ایمونوفلورسانس (IFR) از میکروسکوپ فلورسانس (به فصل 2 مراجعه کنید) برای مطالعات سرولوژیکی استفاده می کند. این واکنش بر این واقعیت استوار است که سرم های ایمنی، که فلوروکروم ها از نظر شیمیایی به آن متصل هستند، هنگام تعامل با آنتی ژن های مربوطه، یک مجتمع درخشان خاص را تشکیل می دهند که در یک میکروسکوپ فلورسنت قابل مشاهده است. به چنین سرم هایی فلورسنت * می گویند. این روش بسیار حساس، ساده است و نیازی به جداسازی یک کشت خالص ندارد (میکروارگانیسم ها را می توان مستقیماً در مواد بیمار شناسایی کرد: مدفوع برای وبا، خلط برای سیاه سرفه، بافت مغزبا هاری). نتیجه را می توان نیم ساعت پس از استفاده از سرم لومینسانس روی آماده به دست آورد. بنابراین، RIF به طور گسترده در تشخیص سریع (تسریع) تعدادی از عفونت ها استفاده می شود.

* (فلوروکروم: فلورسئین درخشش سبز می دهد، رودامین درخشش قرمز می دهد.)

برای تهیه آماده سازی، یک اسلاید شیشه ای با یک اسمیر ثابت (نقطه، بخش) در یک محفظه مرطوب قرار می گیرد. اتاقک به شرح زیر تهیه می شود. کاغذ صافی مرطوب در پایین ظرف پتری قرار می گیرد. دو میله شیشه ای به موازات آن قرار داده شده است (می توانید از قسمت پهن پیپت پاستور استفاده کنید). یک اسلاید شیشه ای روی آنها قرار داده می شود، آغشته کنید.

توجه! اسمیر را فراموش نکنید سمت معکوسبا مداد مومی ردیابی کنید.

یک قطره از سرم لومینسانس روی اسمیر اعمال می شود. در فنجان را ببندید و در ترموستات قرار دهید یا به مدت 20 تا 30 دقیقه در دمای اتاق بگذارید. پس از انکوباسیون، آنها را با یک محلول ایزوتونیک بافر (pH 7.4) شسته، با آب مقطر شستشو داده، خشک می کنند، یک قطره گلیسرول بافر زده می شود، با یک پوشش پوششی (با ضخامت 0.17 میلی متر!) پوشانده می شود و در یک میکروسکوپ فلورسنت بررسی می شود. اگر این دارو حاوی میکروب های همولوگ با آنتی بادی های سرم درخشان باشد، در یک پس زمینه تاریک به خوبی می درخشند. این روش مستقیم نامیده می شود (شکل 36). ناراحتی روش مستقیم RIF این است که تولید آن به سرم های درخشان برای هر آنتی ژن قابل تشخیص نیاز دارد که تهیه آن دشوار است و مجموعه کاملی از سرم های شب تاب آماده برای هیچ آنتی ژنی وجود ندارد. بنابراین اغلب از روش غیر مستقیم استفاده می شود. این شامل این واقعیت است که در مرحله اول دارو با سرم ایمنی غیر درخشان مخصوص آنتی ژن مورد نظر درمان می شود. اگر دارو حاوی آنتی ژن های مورد نظر (میکروب) باشد، یک کمپلکس آنتی ژن-آنتی بادی تشکیل می شود که قابل مشاهده نیست. پس از خشک شدن، در مرحله دوم، فرآورده با سرم شب تاب حاوی آنتی بادی نه به آنتی ژن مورد نظر، بلکه به گلوبولین های گونه حیوانی که سرم اختصاصی از آن به دست آمده است، درمان می شود. به عنوان مثال، اگر سرم اول با ایمن سازی یک خرگوش به دست آمده باشد، سرم دوم باید حاوی آنتی بادی برای گلوبولین های خرگوش باشد (شکل 36 را ببینید). این آنتی‌بادی‌ها با گلوبولین‌های سرم خاصی ترکیب می‌شوند که روی آنتی‌ژن مورد نظر جذب می‌شوند و زمانی که آماده‌سازی در زیر میکروسکوپ فلورسنت مشاهده می‌شود، کمپلکس می‌درخشد.

واکنش اپسونوفاگوسیتیک

واکنش اپسونوفاگوسیتیک (OPR) یکی از روش‌های ارزیابی فعالیت فاگوسیتوز ایمنی است. هر چه این فعالیت بیشتر باشد، مقاومت بدن در برابر عفونت بیشتر می شود. در ارگانیسم ایمنی، تحت تأثیر آنتی بادی ها (اپسونین ها)، فاگوسیتوز فعال تر رخ می دهد (میکروب های بیشتری در مدت زمان کوتاه تری جذب می شوند). بنابراین، شاخص های فعالیت فاگوسیتیک نه تنها ارزش تشخیصی دارند (به عنوان مثال، در بروسلوز)، بلکه امکان پیش بینی نتیجه فرآیند عفونی، ارزیابی نتایج درمان و واکسیناسیون را نیز فراهم می کنند. برای واکنش شما نیاز دارید:

1. آنتی ژن - تعلیق میکروارگانیسم های زنده یا کشته شده.

2. آنتی بادی (opsonins) - سرم آزمایش.

3. فاگوسیت ها - معمولا نوتروفیل های خون مورد آزمایش.

تنظیم یک واکنش با استفاده از یک میکروپیپت، 0.05 میلی لیتر محلول سیترات سدیم 2٪ در لوله های آزمایش کوچک ریخته می شود. 0.1 میلی لیتر خون آزمایش و 0.05 میلی لیتر سوسپانسیون میکروارگانیسم ها که چگالی آن معادل 10 واحد در 1 میلی لیتر است. کدورت بر اساس استاندارد نوری GISC.

توجه! برای هر ماده باید از یک پیپت جداگانه استفاده شود.

محتویات لوله های آزمایش مخلوط می شوند. لوله ها به مدت 30 دقیقه در ترموستات قرار می گیرند و پس از آن مجدداً محتویات آنها مخلوط شده و اسمیرهای نازکی (مثل لام خون) تهیه می شود. رنگ آمیزی به گفته رومانوفسکی - گیمسا.

حسابداری برای نتایج که در جاهای مختلف 25 نوتروفیل از یک اسمیر با در نظر گرفتن تعداد میکروارگانیسم های دستگیر شده در هر یک از آنها شمارش می شود. شاخص واکنش اپسونوفاگوسیتیک (POFR) با استفاده از فرمول محاسبه می شود:

POFR = 3a + 2b + 1c + 0،

که در آن a تعداد نوتروفیل های حاوی بیش از 41 باکتری است. ب - تعداد نوتروفیل های حاوی 21 تا 40 باکتری. c تعداد نوتروفیل های حاوی 1 تا 20 باکتری است. 0 - تعداد نوتروفیل هایی که باکتری ندارند.

حداکثر شاخص واکنش اپسونوفاگوسیتیک با این سیستم حسابداری 75 است.

نتیجه واکنش بر اساس طرح زیر ارزیابی می شود:

با POFR از 1 تا 24 - ضعیف مثبت؛

با POFR از 25 تا 49 - به وضوح بیان شده است.

با POFR از 50 تا 75 - به شدت مثبت است.

در افراد سالم، POFR 0-1 و به ندرت 4-5 است. نتایج به وضوح بیان شده و به شدت مثبت از واکنش نشان دهنده اثر اپسونیزاسیون بالای سرم فردی است که با فعالیت برجسته فاگوسیت های خون مورد بررسی قرار می گیرد.

تعیین تنها فعالیت آنتی بادی ها - اپسونین ها - با تجربه ایجاد شاخص اپسوئیک - نسبت شاخص فاگوسیتیک در حضور سرم ایمنی (تست) به شاخص فاگوسیتی در سرمی انجام می شود که حاوی آنتی بادی به یک سرم نیست. میکروب داده شده آزمایش به شرح زیر انجام می شود: 2 لوله آزمایش را بردارید که در یکی از آنها (آزمایشی) به مقدار مساوی (معمولا 0.2 میلی لیتر) اضافه کنید: 1) سرم فرد مورد معاینه. 2) تعلیق میکروب ها که در آن وجود اپسونین ها مشخص می شود. 3) لکوسیت ها (می تواند از حفره شکمی موش باشد). موارد زیر به لوله کنترل اضافه می شود: 1) سرم بدون اپسونین (کنترل). 2) همان میکروب ها در آزمایشی. 3) لکوسیت ها (همانطور که در لوله آزمایش وجود دارد).

هر دو لوله به مدت 30 دقیقه در یک ترموستات نگهداری می شوند و سپس از هر دو لوله اسمیر تهیه می شود که طبق رومانوفسکی-گیمسا ثابت و رنگ آمیزی می شود. اسمیرها میکروسکوپی می شوند و شاخص فاگوسیتی در لوله های آزمایش و کنترل تعیین می شود.

اگر اپسونین در سرم آزمایش وجود داشته باشد، شاخص اپسونیک بیشتر از یک خواهد بود. هرچه عدد حاصل از تقسیم شاخص فاگوسیتوز سرم آزمایش بر شاخص فاگوسیتوز سرم کنترل بیشتر باشد، تأثیر آنتی بادی ها - اپسونین ها بیشتر است.

کنترل سوالات

1. ODF بر اساس کدام خاصیت آنتی بادی ها است؟ آیا این واکنش خاص است؟

2. GFR 75 نشان دهنده چیست؟

ورزش

ODF خون گرفته شده از انگشت را بررسی کنید. فاگوسیت ها را بکشید. PORF را محاسبه کنید.

واکنش های ایمنی in vivo (آزمایش های پوستی)

هنگامی که آنتی ژن روی پوست زخم زده یا تزریق داخل پوستی اعمال می شود، هم وضعیت ایمنی و هم حساسیت بیش از حدبه این دارو

تست پوست با سم. مقدار تیتر شده سم به صورت داخل جلدی تزریق می شود. اگر بدن مصون باشد، یعنی سطح خاصی از آنتی‌توکسین داشته باشد، اثر سم خود را نشان نمی‌دهد - سم توسط آنتی‌توکسین خنثی می‌شود. در یک ارگانیسم غیر ایمنی، یک نفوذ التهابی (قرمزی، ضخیم شدن و غیره) در محل تزریق سم ایجاد می شود.

تست های پوستی حساسیت زا(تست های حساسیت پوستی) برای مطالعه افزایش واکنش ها (به فصل 13 مراجعه کنید). با افزایش حساسیت فوری، آلرژن معرفی شده (آنتی ژن) با آنتی بادی های جذب شده روی سلول های اندام های مختلف واکنش نشان می دهد. افزایش حساسیت نوع تاخیری به دلیل واکنش لنفوسیت های T حساس شده به آلرژن است. چنین حساسیتی با تعدادی از عفونت ها در بیمارانی که بیمار و واکسینه شده اند (سل، بروسلوز و غیره) رخ می دهد. بنابراین تست های حساسیت پوستی برای این عفونت ها ارزش تشخیصی دارند.

آماده سازی برای آزمایش های پوستی توسط تولید کنندگان ویژه تهیه می شود و دستورالعمل هایی را برای استفاده از آنها ارائه می دهد.

کنترل سوالات

1. آنتی بادی در چیست تست پوستبا سم؟ نتیجه منفی این آزمایش چه چیزی را نشان می دهد؟

2. چه واکنشی به ما امکان می دهد وضعیت افزایش حساسیت بدن به یک عامل عفونی را شناسایی کنیم؟

ایمونوپروفیلاکسی و ایمونوتراپی بیماری های عفونی

تلاش برای جلوگیری از سیر شدید یک بیماری کشنده با ایجاد نوع خفیف بیماری قرن هاست که در کشورهای مختلف جهان انجام شده است.

پایه علمی و اجرای عملی ایمونوپروفیلاکسی اولین بار توسط L. Pasteur ارائه شد که اصول استفاده از میکروارگانیسم های ضعیف شده (تضعیف شده) و داروهای آماده (واکسن) را برای جلوگیری از برخی بیماری های عفونی انسان و حیوانات ایجاد کرد.

بیش از صد سال می گذرد و اکنون ایجاد مصونیت مصنوعی اساس مبارزه با بیماری های عفونی است.

ایمن سازی - تجویز داروها برای ایجاد ایمنی فعال مصنوعی - در سال های خاصی در طول زندگی فرد انجام می شود. در روزهای اول پس از تولد، کودک واکسن BCG را علیه سل دریافت می کند. در سال اول زندگی برای پیشگیری از بیماری های دیفتری، سیاه سرفه و کزاز، واکسن فلج اطفال، سرخک و ... واکسینه می شود و به این ترتیب پیشگیری اختصاصی از بیماری های عفونی انجام می شود که برای آن از واکسن استفاده می شود.

واکسن ها- مواد مخدر برای ایمن سازی فعالمی تواند:

1. کورپوسکولار (از سلول های میکروبی) - زنده و مرده.

2. شیمیایی (آنتی ژن ها و فراکسیون های آنتی ژنی).

3. آناتوکسین ها.

واکسن های ضعیف شده زنده از میکروارگانیسم های زنده تهیه می شوند که قدرت بیماری آنها ضعیف شده است (از لاتین تضعیف - تضعیف، نرم شدن) و خواص ایمنی (توانایی ایجاد ایمنی) حفظ می شود.

راه های مختلفی برای به دست آوردن چنین میکروارگانیسم هایی وجود دارد:

1) کشت بر روی محیط های غذایی نامطلوب برای رشد و تولید مثل پاتوژن؛ تحت تأثیر عوامل فیزیکی و شیمیایی (به این ترتیب واکسن BCG برای پیشگیری از سل به دست آمد). 2) عبور پاتوژن از بدن حیوانی که خیلی مستعد ابتلا به عفونت قابل تکرار نیست (ال. پاستور واکسن هاری را اینگونه دریافت کرد). 3) انتخاب کشت های طبیعی میکروارگانیسم هایی که برای انسان قدرت بیماری زایی پایینی دارند (واکسن طاعون به این ترتیب بدست آمد) و غیره.

واکسن‌های زنده ایمنی شدیدی ایجاد می‌کنند، زیرا فرآیندی شبیه به یک عفونی طبیعی ایجاد می‌کنند، فقط به صورت خفیف بیان می‌شوند و تقریباً هیچ تظاهرات بالینی ندارند. در این مورد، کل مکانیسم ایمنی زایی فعال می شود - ایمنی ایجاد می شود.

واکسن های کشته شده کشت میکروارگانیسم هایی هستند که در دمای بالا غیرفعال می شوند. مواد شیمیایی(فنل، فرمالدئید، الکل، استون)، اشعه ماوراء بنفش و غیره در این مورد، فاکتورهای نوردهی انتخاب می شوند که به طور کامل خواص ایمنی زایی سلول های میکروبی را حفظ می کنند.

واکسن های شیمیایی اجزای منفرد یک سلول میکروبی (آنتی ژن) هستند که با پردازش ویژه سوسپانسیون میکروبی به دست می آیند.

واکسن‌های شیمیایی معمولاً پس از ورود به بدن به سرعت جذب می‌شوند، که امکان دستیابی به تحریک ایمنی مورد نظر را نمی‌دهد، بنابراین موادی به واکسن‌ها اضافه می‌شوند که زمان جذب را طولانی‌تر می‌کنند: هیدروکسید آلومینیوم، آلومینیم پتاسیم، روغن‌های معدنی و غیره. ایجاد یک "دپو".

از واکسن های شیمیایی برای پیشگیری از تب حصبه، مننژیت و غیره استفاده می شود.

آناتوکسین ها (از لاتین ana - back) اگزوتوکسین های باکتری هستند که با قرار گرفتن در معرض فرمالدئید (0.3-0.4٪) و قرار گرفتن در معرض دمای 37 درجه سانتیگراد به مدت 3-4 هفته خنثی می شوند. در این مورد، از دست دادن خواص سمی، اما حفظ آنهایی که ایمنی زا وجود دارد.

در حال حاضر از سموم دیفتری، کزاز و ... سموم به دست آمده و استفاده می شود.

سموم از ناخالصی های موجود در محیط های غذایی (پروتئین های بالاست) خالص شده و روی موادی که به آرامی از محل تزریق جذب می شوند جذب می شوند.

بر اساس تعداد آنتی ژن های موجود در واکسن، آنها را متمایز می کنند: تک واکسن (از یک نوع آنتی ژن)، دیواکسن (از دو آنتی ژن)، سه واکسن (از سه آنتی ژن) و غیره.

واکسن های مرتبط از آنتی ژن های باکتری ها و سموم مختلف تهیه می شوند. برای مثال، واکسن سیاه سرفه-دیفتری-کزاز (DTP) حاوی میکروب‌های سیاه سرفه و سموم است: دیفتری و کزاز.

واکسن ها به صورت عضلانی، زیر جلدی، پوستی، داخل پوستی، خوراکی تزریق می شوند. یک یا دو بار یا سه بار در فواصل 1-2 هفته یا بیشتر ایمن سازی کنید. دفعات تجویز و فواصل بین واکسیناسیون ها به ماهیت واکسن بستگی دارد - رژیم های تجویز برای هر کدام ایجاد شده است.

پس از تجویز واکسن، واکنش های عمومی و موضعی ممکن است رخ دهد. علائم عمومی شامل افزایش دما (تا 39 درجه سانتیگراد)، سردرد، بی حالی این پدیده ها معمولاً پس از 2-3 روز از بین می روند. واکنش های موضعی - قرمزی و نفوذ در محل تزریق واکسن ممکن است 1-2 روز پس از واکسیناسیون ظاهر شود. با تجویز پوستی واکسن (علیه تولارمی، BCG و غیره) ظاهر واکنش موضعیاثربخشی واکسن را نشان می دهد.

موارد منع مصرف برای واکسیناسیون وجود دارد: تب، بیماری های عفونی حاد، آلرژی و غیره زنان نیز در نیمه دوم بارداری واکسینه نمی شوند.

واکسن ها و سموم در کارخانه هایی تهیه می شوند که فرآورده های باکتریایی تولید می کنند. تولید آنها به مقادیر زیادی سوسپانسیون میکروبی (زیست توده) یا مواد حاوی ویروس نیاز دارد.

آماده سازی تمام شده در آمپول یا ویال ریخته می شود و بیشتر خشک می شود. آماده سازی های خشک فعالیت و سایر خواص خود را برای مدت طولانی تری حفظ می کنند.

برخی از واکسن ها مانند فلج اطفال به شکل قرص یا قرص هستند.

هر آمپول، بطری و جعبه دارو با نام دارو، حجم، تاریخ انقضا، شماره بسته و شماره کنترل برچسب گذاری شده است.

دستورالعمل استفاده در هر جعبه گنجانده شده است.

فرآورده ها معمولاً در دمای 4 درجه سانتیگراد نگهداری می شوند. فرآورده ها نباید در معرض انجماد و ذوب شدن یا دمای بالا قرار گیرند. در هنگام حمل و نقل شرایط خاصی رعایت می شود. از داروهایی که دارای ترک در آمپول و ظاهر تغییر یافته هستند استفاده نکنید.

در اتحاد جماهیر شوروی، یک سیستم کنترل دولتی بر کیفیت آماده سازی های ایمونوبیولوژیکی پزشکی وجود دارد که اثربخشی و استانداردسازی آنها را تضمین می کند.

یک نوع خاص از واکسن - و آن یک واکسن است. در تهیه می شوند آزمایشگاه های باکتریولوژیکاز میکروب های جدا شده از بیمار فقط برای درمان این بیمار از اتوواکسن استفاده می شود. اغلب، اتوواکسن ها برای درمان عفونت های مزمن (استافیلوکوک و غیره) استفاده می شود. اتوواکسن به طور مکرر، در دوزهای کوچک، طبق رژیمی که برای هر واکسن ایجاد شده است، تجویز می شود. اتوواکسن ها دفاع بدن را تحریک می کنند که به بهبودی کمک می کند.

آماده سازی سرمبرای ایجاد ایمنی غیرفعال مصنوعی استفاده می شود. اینها شامل سرم های ایمنی خاص و ایمونوگلوبولین ها هستند.

این داروها حاوی آنتی بادی های آماده هستند. آنها از خون اهداکنندگان - افراد یا حیوانات مخصوص ایمن سازی شده (در برابر سرخک، آنفولانزا، کزاز) به دست می آیند. علاوه بر این، سرم افراد بهبودیافته و حتی سالم در صورتی استفاده می شود که حاوی مقدار کافی آنتی بادی باشد. خون جفت و سقط جنین نیز به عنوان مواد اولیه برای تهیه داروهای ایمنی استفاده می شود.

سرم های آنتی باکتریال و آنتی سمی موجود است. اولی ها کاربرد محدودتری دارند. سرم های آنتی توکسیک برای درمان دیفتری، کزاز، بوتولیسم و ​​... استفاده می شود. این سرم ها با محتوای آنتی توکسین خاصی تولید می شوند که در واحدهای بین المللی (IU) اندازه گیری می شود.

آماده سازی سرم ایمنی از خون حیوانات، عمدتاً اسب، که چندین بار واکسینه شده اند، به دست می آید. در پایان ایمن سازی سطح آنتی بادی در خون مشخص شده و خون ریزی انجام می شود. سرم حاصل حفظ می شود، عقیمی، فعالیت و خواص فیزیکی آن کنترل می شود.

فرآورده‌های به‌دست‌آمده از خون اسب حاوی پروتئین‌های بیگانه برای انسان هستند که در صورت مصرف مکرر می‌توانند باعث واکنش‌های آلرژیک شوند: بیماری سرمیو شوک آنافیلاکتیک برای جلوگیری از عوارض، داروهای سرمی باید با احتیاط تجویز شوند (طبق گفته Bezredka) (به فصل 13 مراجعه کنید). برای آزادسازی سرم حیوانی از پروتئین های بالاست و تغلیظ آنتی بادی ها از روش های مختلفی استفاده می شود که اصلی ترین آنها روش Diaferm-3 توسعه یافته در کشور ما و شامل هیدرولیز آنزیمی پروتئین های بالاست می باشد.

علاوه بر این، برای تغلیظ آنتی بادی ها در حجم کمتری از دارو، روش هایی برای جداسازی گاما گلوبولین های حاوی آنتی بادی از سرم خون ایجاد شده است. چنین داروهایی ایمونوگلوبولین نامیده می شوند. آنها از سرم انسان (همولوگ) و حیوان (هترولوگ) تهیه می شوند.

اثربخشی ایمونوگلوبولین ها بسیار بیشتر از اثربخشی سرم های ایمنی است و به طور نامتناسبی عوارض کمتری مشاهده می شود. در حال حاضر، ایمونوگلوبولین ها بسیار بیشتر از سرم ها استفاده می شوند.

در کشور ما از ایمونوگلوبولین ها برای پیشگیری از سرخک، هپاتیت، سرخجه و ... استفاده می شود. تجویز پیشگیرانه ایمونوگلوبولین ها در مواقع مشکوک بودن به عفونت و یا در صورت عفونت انجام می شود. تجویز این داروها در روزهای اول پس از عفونت (آغاز دوره کمون)، تا زمانی که فرآیند پاتولوژیکهنوز توسعه نیافته است.

در استفاده داروییتجویز زودهنگام دارو تأثیر بیشتری می دهد.

سرم ها و ایمونوگلوبولین ها به صورت عضلانی و داخل وریدی تجویز می شوند.

استفاده به موقع و صحیح از فرآورده های سرم می تواند بروز بسیاری از عفونت ها را کاهش دهد.

کنترل سوالات

1. چه نوع واکسن هایی را می شناسید؟

2. چه داروهایی ایمنی غیرفعال ایجاد می کنند؟

3. اتوواکسن چیست؟